白细胞介素27在肾小球足细胞损伤的作用及他克莫司对其的影响

目的研究嘌呤霉素(PAN)致肾小球足细胞损伤中白细胞介素27(IL-27)mRNA和蛋白表达的变化,探讨他克莫司(FK506)在肾小球足细胞损伤中的保护作用机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分为3组:对照组、PAN组和FK506组。3组足细胞经处理8 h、24 h、48 h后在显微镜下观察细胞形态,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察IL-27水平的变化,并收集培养的足细胞行实时荧光定量PCR(qPCR)检测IL-27 mRNA表达的变化,采用Western blot检测IL-27蛋白表达的变化。结果1.足细胞形态:在各个时间点(8 h、24 h、48 h),PAN组细胞体积较对照组缩小,形态改变;FK506组较PAN组体积偏大并饱满,趋于正常。2.IL-27的水平:在各个时间点(8 h、24 h、48 h),PAN组[(110.00±3.52)ng/L、(302.00±6.23)ng/L、(397.00±8.92)ng/L]均高于对照组[(90.00±5.12)ng/L、(85.00±4.21)ng/L、(88.00±4.20)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.05);FK506组[(96.00±4.17)ng/L、(107.00±4.86)ng/L、(112.00±6.24)ng/L]均低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.IL-27 mRNA表达量:在各个时间点(8 h、24 h、48 h),PAN组(1.25±0.11、1.57±0.08、1.73±0.13)均高于对照组(1.02±0.02、1.10±0.04、0.96±0.02),差异均有统计学意义(均P<0.05);FK506组8 h时(1.10±0.06)无明显升高,24 h和48 h时(1.21±0.04、1.30±0.09)表达量稍有升高;与PAN组比较,FK506组均低于PAN组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。4.IL-27蛋白的表达量:在各个时间点(8 h、24 h、48 h),PAN组(0.94±0.04、1.56±0.07、1.63±0.04)均高于对照组(0.83±0.04、0.85±0.03、0.83±0.05),差异均有统计学意义(均P<0.05);FK506组(0.84±0.05、0.89±0.04、0.91±0.06)与PAN组比较,8 h无明显差异,24 h后IL-27蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),48 h后IL-27蛋白表达下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-27参与肾脏疾病的发病,FK506通过降低IL-27的表达,抑制肾小球足细胞的损伤,为临床应用FK506治疗肾脏病提供一定依据。