董氏奇穴“三肩穴”治疗气滞血瘀型冻结肩的疗效观察

冻结肩是由于各种原发性或继发性原因导致患者肩关节活动范围受限的一种疾病,但病因尚不明确[1]。本病好发于40岁以上[2],以40~60岁中老年人发病率最高[3],女性多于男性,左侧多见。其临床特征为肩关节疼痛、僵硬、运动受限[4-5],给患者的生活造成影响。冻结肩属中医“肩痹”范畴,针灸具有治疗优势。针刺治疗冻结肩多选用传统经穴及经外奇穴施治[6]。本文在临床中运用董氏奇穴三肩穴治疗冻结肩气滞血瘀证患者疗效明显。现报道如下。

虚瘀兼顾——治疗原发性骨质疏松症的基本原则

原发性骨质疏松症属中医"骨痿""骨痹""骨枯"等范畴。目前,中医药在治疗该病中所扮演的角色越来越重要。中医治疗该病的主要原则为补肾健脾、行气活血,但是中医学者们对此尚未达成统一共识。我们认为治疗原发性骨质疏松症的目的是为了减轻骨痛、降低骨丢失的速度以及降低骨折和再骨折的发生率,并提出了治疗骨质疏松症的原则为针对其虚、兼顾其瘀、标本兼治,强调虚瘀兼顾才是治疗原发性骨质疏松症的基本治疗原则。希望我们的认识能够引发中医学者们对原发性骨质疏松症的共同探讨,以期能更好地指导临床,造福于广大骨质疏松症患者。

韦氏颈椎手法配合中药烫疗治疗神经根型颈椎病的临床研究

目的:观察韦氏颈椎手法配合中药烫疗治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法:将264例神经根型颈椎病患者随机分为治疗组133例和对照组131例。治疗组采用韦氏颈椎手法配合中药烫疗治疗,对照组采用颈椎牵引配合中药烫疗治疗。治疗结束后3个月分别采用Boeden测量法、Northwick Park颈痛量表及《中医病证诊断疗效标准》中的颈椎病疗效标准评定并比较2组患者的颈椎生理曲度、颈椎症状体征功能评分及总体疗效。结果:①颈椎生理曲度。治疗前2组患者颈椎生理曲度比较,差异无统计学意义[(3.67±2.32)mm,(3.15±2.14)mm,t=-1.194,P=0.234];治疗结束后3个月2组患者颈椎生理曲度均改善[(7.79±3.74)mm,(5.98±3.56)mm],治疗组改善更明显[(4.12±2.34)mm,(2.83±1.18)mm,t=5.221,P=0.000]。②颈椎症状体征功能评分。治疗前2组患者颈椎症状体征功能评分比较,差异无统计学意义[(38.77±12.25)分,(38.36±8.79)分,t=0.311,P=0.756];治疗结束后3个月2组患者的颈椎症状体征功能评分均降低[(17.65±5.94)分,(20.50±8.79)分],治疗组降低更明显[(21.12±10.64)分,(17.86±8.93)分,t=2.310,P=0.022]。③总体疗效。治疗组治愈32例,显效81例,有效15例,未愈5例;对照组治愈12例,显效85例,有效17例,未愈17例。治疗组总体疗效优于对照组,差异有统计学意义(Z=-3.569,P=0.000)。结论:采用韦氏颈椎手法配合中药烫疗治疗神经根型颈椎病,能有效改善患者的临床症状与体征,以及颈椎生理曲度和颈椎功能,疗效优于颈椎牵引配合中药烫疗,值得临床推广应用。

淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨折原始骨痂发生的影响及其机制

目的:探讨淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨质疏松性骨折愈合中骨痂形成的影响。方法:选取40只6~8周龄,体重209~246 g的雌性SD大鼠,采用钢锯截断加克氏针髓内固定法,建立去势大鼠股骨中段骨质疏松性骨折模型。按随机数字表法随机分为淫羊藿总黄酮组和对照组,每组20只。淫羊藿总黄酮组给予淫羊藿总黄酮150 mg·kg^(-1)·d^(-1),对照组给予等量生理盐水口服。在干预6周后,使用双能X线骨密度仪检测股骨BMD,使用Micro-CT系统测量骨痂的骨体积、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量及骨小梁分离度等参数。采用HE染色技术观察两组骨痂愈合进程中的骨痂组织形态学差异,采用免疫组织化学染色技术检测骨痂处酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2-interacting protein 1,CKIP-1)的表达量。采用RT-PCR技术检测两组骨痂样本中骨特异性转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)表达量,采用3点弯曲力学方法测量骨痂处最大载荷值。结果 :干预6周后,淫羊藿总黄酮组骨密度为(129.4±3.1)mg/cm^2,与对照组的(117.3±3.3)mg/cm^2比较差异有统计学意义(t=-4.628 8,P<0.001);MicroCT扫描结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组在骨痂骨小梁数量、骨痂体积、骨痂体积/总体积、骨小梁分离度和骨小梁厚度方面比较差异有统计学意义(P<0.05)。200倍和400倍光镜下骨痂HE染色切片,见骨小梁微结构参数与骨痂Micro-CT扫描结果趋势一致,同时发现淫羊藿总黄酮组软骨细胞骨化水平明显高于对照组。骨痂中Runx2因子RTPCR检测结果显示,两组的Runx2 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.001)。400倍镜下观察骨痂中CKIP-1蛋白免疫组化检测结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组CKIP-1蛋白阳性表达数分别为9.30±1.16,40.50±1.08,差异有统计学意义(t=-62.26,P<0.001)。骨痂生物力学结果显示,淫羊藿总黄酮组和对照组最大载荷分别为(98.37±9.64)、(68.45±6.07)N,差异有统计学意义(t=6.433 4,P<0.001)。结论:淫羊藿总黄酮可以促进去势大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中成骨细胞骨形成能力和软骨骨化能力,促进原始骨痂的形成,增强骨折愈合强度,而其促进骨愈合和增强骨折愈合强度可能是通过调节CKIP-1蛋白来实现的。

中药穴位敷贴治疗绝经后骨质疏松症

目的观察自制外用中药穴位敷贴对绝经后骨质疏松患者的影响。方法将符合本研究纳入标准的200例患者随机分为治疗组及对照组,各100例,治疗组予外用中药穴位敷贴,内服钙尔奇D片治疗,对照组予内服钙尔奇D片治疗,疗程为6个月。比较2组用药前、用药后6个月腰椎骨密度、PINP及S-CTX、VAS疼痛评分,所得数据进行统计分析。结果 200例中176例获得完整随访,治疗组85例,对照组91例,治疗组治疗后骨密度值无明显变化,但在PINP及S-CTX、VAS疼痛评分方面均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药穴位敷贴能缓解绝经后妇女疼痛,降低骨转化指标,提高绝经后妇女的生活水平。

脆性骨折的防治进展

脆性骨折是骨质疏松症的严重并发症,其危害较为严重,因此防治意义重大。脆性骨折的发生与骨强度下降密切相关,而骨密度仅能部分反映骨强度情况,因此临床应结合骨质量进行综合分析,预测骨折风险。本文从骨质量与骨强度、脆性骨折的危险因素与预防及脆性骨折的风险预测和防治几个方面,对脆性骨折防治的研究进展进行了综述。

发育性髋脱位术后再脱位的三维CT分析

目的利用3D-CT影像,来探讨发育性髋脱位术后再脱位的髋臼及股骨近段的骨性病理形态改变,以分析术后再脱位的原因,从而指导和改进发育性髓脱位的治疗。方法对28例(28侧)发育性髋脱位术后再脱位患者的3D-CT影像资料进行分析,测量各参数指标,并与38例(51侧)手术成功患者术后值以及正常组对比分析,来探讨术后再脱位的原因。结果术后再脱位组患者的颈干角与正常组和手术成功组比较,均有高度显著性差异,其数值明显增大;术后再脱位组患者髋臼外上缘重型缺损者所占比例,与手术成功组比较有高度显著性差异;术后再脱位组股骨颈前倾角与正常组比较差异有显著性,而与手术成功组比较差异则无显著性。结论术后再脱位原因与股骨颈干角的角度、髋臼外上缘形态、股骨头与髋臼是否恢复同心圆复位关系等密切相关;股骨颈前倾角值比正常组偏大并非导致术后再脱位的必然因素,其术中矫正范围不能完全以正常组为标准,而应当以健侧为标准,纠正到一个比正常组略大的范围。

三维CT在发育性髋关节脱位研究中的应用

发育性髋关节脱位（Developmental dislocation of hip，DDH）是小儿骨科最常见的先天性畸形之一，其病理变化非常复杂，主要表现为髋臼缺损、股骨头发育不良及头臼非同心对位关系。在90年代中期以前，由于检查手段的限制，仅以X线片及二维CT作为临床影像诊断的依据，其中所包含的信息十分有限，

基于WNT16预防骨质疏松非椎体骨折的研究进展

随着我国老龄化程度加深,骨质疏松发病率持续升高,已经严重威胁我国国民健康。骨折作为骨质疏松最严重的并发症,是骨质疏松患者死亡的主要原因。近年来,关于骨质疏松骨折的研究有很多,但偏重于骨质疏松椎体骨折,而骨质疏松非椎体骨折的研究较少。目前,市场上预防骨质疏松的药物也往往针对椎体骨折,而骨质疏松非椎体骨折的可用药物较少。WNT信号通路在预防骨质疏松骨折方面的研究较多,WNT16作为WNT家族中新成员,是调控骨皮质的关键因子,骨质疏松非椎体骨折的关键原因在于骨皮质变薄,因此,WNT16可能是预防非椎体骨折的潜在靶标。本文主要通过总结近期关于WNT16在骨质疏松骨折上的研究,探讨WNT16在骨质疏松非椎体骨折的预防上所起的作用,为临床预防骨质疏松非椎体骨折提供参考,以及为骨质疏松非椎体骨折药物开发提供新思路。

早期干预对偏瘫患者继发骨质疏松症的防治

脑卒中的发生率由于多种原因在逐年增长,偏瘫患者也随之增多。脑卒中偏瘫患者由于病情复杂性带来的一系列并发症引起广泛热议,其中偏瘫患者继发性骨质疏松症的关注度尤高,成为研究热点和难点。早期干预由于其对疾病的防治具有安全性和有效性等优点,已成为防治疾病的主要策略之一。目前对于早期干预偏瘫患者继发骨质疏松症的防治研究较少,人们普遍对于早期干预偏瘫患者继发骨质疏松症的危害认识不足,该领域的医生大多数也存在重视程度不够的问题。因此,笔者围绕早期干预对偏瘫患者继发骨质疏松症的防治这一主题,强调早期干预对偏瘫患者继发骨质疏松症的防治重要性,详细介绍早期干预健康教育、早期干预骨质疏松药物及早期干预运动疗法等相关措施,总结得出早期干预对于防治偏瘫患者继发骨质疏松症的意义。

强骨膏方治疗原发性骨质疏松症的临床研究

目的:观察强骨膏方对原发性骨质疏松症的疗效。方法:选择符合纳入标准的我院骨伤科门诊原发性骨质疏松症病例120例,采用双盲随机对照的临床试验方法,分为强骨膏方组(n=40)、仙灵骨葆胶囊组(n=40)、阿伦膦酸钠组(n=40)进行为期6个月的治疗。结果:临床研究表明,强骨膏方能显著缓解原发性骨质疏松症患者的骨痛,治疗前后BMD平均提高6.2%,E2、ALP、Ca增高,PYD下降,疼痛缓解总有效率为97.5%,以上指标明显优于仙灵骨葆胶囊组及阿伦膦酸钠组。结论:本研究提示,强骨膏对原发性骨质疏松有较好的治疗,为指导临床中医药传统方法对原发性骨质疏松症的治疗、中医"治未病"诊疗措施的应用和新药开发提供可靠的理论依据,对于提高中医传统保健方法在现代医学研究领域中的地位,有着极其重要的意义。

促胰液素对去卵巢骨质疏松大鼠血清骨转换指标和骨密度的影响

目的观察促胰液素(secretin,SCT)对去卵巢骨质疏松大鼠骨转换指标和骨密度的影响。方法采用双侧卵巢去除法制备绝经后骨质疏松大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、雌激素治疗组和促胰液素治疗组,每组各15只。干预3个月后,测定腰椎骨密度(bone mineral density,BMD),采取ELISA法测定血清I型胶原N前端肽(procollagen I N-Terminal propeptide,PINP)和I型胶原C末端肽(collagen type I C-terminal cross-linked telopeptide,CTX),另使用STRING10.0蛋白相互作用网络分析工具分析骨质疏松相关差异蛋白。结果与假手术组比较,模型对照组、雌激素治疗组、促胰液素治疗组的PINP含量升高(P<0.05),模型对照组的CTX含量升高(P<0.05),模型对照组的BMD下降(P<0.05),雌激素治疗组和促胰液素治疗组的CTX、BMD含量无显著差异(P>0.05);与模型对照组比较,雌激素治疗组、促胰液素治疗组PINP、CTX含量有所下降,而BMD含量升高(P<0.05);雌激素组与促胰液素组之间PINP、CTX、BMD含量无显著差异(P>0.05)。结论促胰液素能改善去卵巢骨质疏松大鼠的PINP和CTX含量,增加骨密度,抑制骨质丢失,具有较好的抗骨质疏松效果。

浙江省中医药防治原发性骨质疏松症分级诊疗专家共识(2017)

根据浙江省中医药防治重大疾病攻关项目的要求，浙江省中西医结合学会骨质疏松专业委员会对近年有关中医药防治原发性骨质疏松症方面的国内外文献进行检索和评价，结合“中医药综合防治原发性骨质疏松症的临床研究——多中心随机对照试验”研究，经过3次专家组的会议讨论，参考《原发性骨质疏松症诊疗指南（2017）》和《中医药防治原发性骨质疏松症专家共识（2015）》，并充分咨询国内和省内中医骨伤科界名老专家和浙江省中西医结合学会骨质疏松专业委员会成员的意见，形成了《浙江省中医药防治原发性骨质疏松症分级诊疗专家共识（2017）》，于2017年12月28日浙江省中西医结合学会骨质疏松专业委员会讨论通过。

常规序列和弥散张量成像序列MRI在颈椎后路椎管扩大成形术治疗脊髓型颈椎病疗效评价中的应用

目的:探讨常规序列及弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)序列MRI在颈椎后路椎管扩大成形术治疗脊髓型颈椎病疗效评价中的应用价值。方法:脊髓型颈椎病患者59例,均为接受过颈椎后路椎管扩大成形术治疗的患者,手术至本次检查时间12~14个月。按日本骨科学会脊髓型颈椎病评分计算患者术后临床改善率,根据改善率将患者分为2组,2组患者均行颈椎常规序列及DTI序列MRI检查。分析术后病变节段最狭窄层面脊髓MRI表现,记录2组患者T2加权像高信号影情况,采集DTI序列各向异性分数(fractional anisotropy,FA)、平均弥散率(mean diffusivity,MD)、轴向弥散率(axial diffusivity,AD)及纵向弥散率(radial diffusivity,RD)参数图像,测量FA、MD、AD及RD参数值,并分别做两组间对比。结果:59例患者中临床改善较好29例(改善较好组)、改善较差30例(改善较差组)。2组患者常规序列MRI检查均示手术减压彻底,但部分患者T2加权像可见高信号影,其中改善较好组17例、改善较差组25例;改善较好组T2加权像出现高信号影的比例较改善较差组低(χ~2=4.390,P=0.036)。DTI序列上,改善较好组FA信号强度较改善较差组高,MD、AD及RD信号强度较改善较差组低。2组患者间MD、RD参数值比较,差异有统计学意义,改善较好组低于改善较差组[(0.86±0.13)×10^(-3)mm^2·s^(-1),(0.93±0.13)×10^(-3)mm^2·s^(-1),t=-2.231,P=0.030;(0.58±0.16)×10^(-3)mm^2·s^(-1),(0.67±0.16)×10^(-3)mm^2·s^(-1),t=﹣2.142,P=0.036];2组患者间FA、AD参数值比较,差异无统计学意义[0.54±0.10,0.49±0.10,t=1.704,P=0.094;(1.42±0.12)×10^(-3)mm^2·s^(-1),(1.47±0.13)×10^(-3)mm^2·s^(-1),t=-1.677,P=0.099]。结论:脊髓型颈椎病患者行颈椎后路椎管扩大成形术后,尽管手术减压彻底,但部分患者的脊髓仍可能存在不同程度的损伤,临床改善较好者的脊髓损伤发生率低于改善较差者,且前者脊髓微结构的破坏程度较后者轻。常规序列和DTI序列MRI检查有助于颈椎后路椎管扩大成形术治疗脊髓型颈椎病的疗效评估。

基于中药系统药理学方法研究六味地黄丸治疗骨质疏松症的药效成分、作用靶点及作用特点

目的:基于中药系统药理学方法探讨六味地黄丸治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)的药效成分、作用靶点及作用特点。方法:在中药综合数据库中检索六味地黄丸中的已知化学成分,然后使用中医药分子机制生物信息学分析工具预测六味地黄丸已知化学成分的作用靶点。通过检索DisGeNET数据库和人工阅读文献,查找OP相关靶基因和蛋白,通过与预测得到的作用靶点进行交叠,筛选六味地黄丸治疗OP的作用靶点。利用Cytoscape 3.7软件自带的BiNGO和ClueGO插件,分别对筛选出的靶点进行基因注释和信号通路富集分析。最后选取前期构建的绝经后OP疾病模型中的87个差异表达蛋白(基于血清蛋白质组学筛选的绝经后OP女性与绝经后骨量正常女性的血清差异表达蛋白),与筛选出的六味地黄丸治疗OP的作用靶点进行交叠,筛选六味地黄丸治疗OP的关键靶点,通过分析原始数据,确定相应的中药及其药效成分。结果:通过检索发现六味地黄丸化学成分130个,其中熟地黄化学成分8个、山药化学成分20个、山茱萸化学成分46个、泽泻化学成分21个、牡丹皮化学成分18个、茯苓化学成分21个;茯苓与山茱萸、山茱萸与牡丹皮各含有1个相同化学成分,泽泻与山茱萸含有2个相同化学成分。根据六味地黄丸化学成分共预测到1169个作用靶点,其中君药熟地黄作用靶点42个,臣药山茱萸和山药作用靶点997个,佐药泽泻、牡丹皮和茯苓作用靶点共622个;君药与臣药共有12个共同作用靶点,君药与佐药有14个共同作用靶点,臣药与佐药有472个共同作用靶点,君药、臣药、佐药共有6个共同作用靶点。经检索DisGeNET数据库和人工阅读文献,共检索到OP相关靶点687个,通过与预测到的六味地黄丸作用靶点交叠,共筛选出六味地黄丸治疗OP的作用靶点142个。靶点基因注释发现,六味地黄丸治疗OP的142个作用靶点主要参与了20种生物学过程,分布于8种细胞成分中,具有10种分子功能,其作用涉及骨重建、骨化、血管重塑、软骨发育、肌肉发育、骨骼发育、维生素D代谢、维生素应答、雌激素刺激应答、破骨细胞分化、成骨细胞分化、骨矿化、Wnt信号通路和Samd信号通路等生物学行为的调控。信号通路富集分析发现,119个信号通路被显著富集,破骨细胞分化、NF-κB信号通路和卵巢类固醇生成等24个功能组被显著富集,其中Wnt信号通路和与绝经后OP密切相关的雌激素调控信号通路等在24个功能组中广泛分布。通过将87个差异表达蛋白与筛选出的六味地黄丸治疗OP的作用靶点交叠,筛选出血管紧张素原、载脂蛋白E、Dickkopf相关蛋白3、RAS相关蛋白7a和蛋白质二硫键异构酶共5个关键靶点,对应山茱萸、山药、茯苓的6个药效成分,包括马兜铃酮、α-考绕咖烯、豆甾醇、尿囊素、鞘氨醇A及齿孔醇。结论:六味地黄丸治疗OP的药效成分包括山药、山茱萸和茯苓所含化合物马兜铃酮、α-考绕咖烯、豆甾醇、尿囊素、鞘氨醇A及齿孔醇,主要作用靶点包括血管紧张素原、载脂蛋白E、Dickkopf相关蛋白3、RAS相关蛋白7a和蛋白质二硫键异构酶。六味地黄丸治疗OP具有多靶点、多系统协同作用的特点。

强骨膏方对绝经后骨质疏松性椎体骨折患者经皮椎体后凸成形术后骨代谢及生活质量的影响

目的:观察强骨膏方对绝经后骨质疏松性椎体骨折患者经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)后骨代谢及生活质量的影响。方法:选择2018年9—12月因骨质疏松性椎体骨折接受了PKP治疗的患者为研究对象。采用随机数字表将符合要求的患者随机分为2组。常规治疗组自术后第2天开始口服碳酸钙D3片(每天1次,每次600 mg)和阿法骨化醇软胶囊(每天1次,每次1μg),强骨膏方组在常规治疗组治疗方案的基础上自术后第2天开始口服强骨膏方(每次15 mL,每天早晚各1次)。所有药物每服用3个月,停药1个月,共治疗1年。分别于入组时和治疗结束时,测定患者的血清总Ⅰ型原胶原氨基端前肽(total procollagen typeⅠN-terminal propeptide,T-PⅠNP)含量、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)含量、腰椎和髋部骨密度及简明健康状况调查表(short form 36 health survey questionnaire,SF-36)评分。结果:①分组结果。共纳入109例患者,强骨膏方组57例、常规治疗组52例。至试验结束时,强骨膏方组3例因出现药物性胃肠道不良反应退出、2例主动要求退出、1例因再次发生骨折退出;常规治疗组2例因出现药物性胃肠道不良反应退出、1例主动要求退出、2例因再次发生骨折退出。出现药物性胃肠道不良反应患者改用抗骨质疏松针剂治疗,再次出现骨折患者均再次行PKP和抗骨质疏松治疗,预后良好。②骨转换标志物及骨密度测定结果。入组时2组患者的血清T-PⅠNP含量、血清β-CTX含量、腰椎骨密度及髋部骨密度比较,组间差异均无统计学意义(t=-1.335,P=0.185;t=0.471,P=0.693;t=-1.734,P=0.086;t=-1.190,P=0.237)。治疗结束时2组患者的血清T-PⅠNP和β-CTX含量均较入组时降低[T-PⅠNP:(60.83±4.57)ng·mL^-1,(39.26±4.06)ng·mL^-1,t=26.460,P=0.000;(62.14±5.11)ng·mL^-1,(31.32±2.49)ng·mL^-1,t=38.692,P=0.000;β-CTX:(0.77±0.08)ng·mL^-1,(0.44±0.05)ng·mL^-1,t=25.880,P=0.000;(0.76±0.10)ng·mL^-1,(0.52±0.06)ng·mL^-1,t=14.961,P=0.000],腰椎和髋部骨密度均较入组时升高[腰椎骨密度:(0.758±0.011)g·cm^-2,(0.786±0.024)g·cm^-2,t=-10.238,P=0.000;(0.761±0.006)g·cm^-2,(0.779±0.028)g·cm^-2,t=-4.239,P=0.000;髋部骨密度:(0.528±0.008)g·cm^-2,(0.567±0.036)g·cm^-2,t=-7.550,P=0.000;(0.530±0.010)g·cm^-2,(0.556±0.024)g·cm^-2,t=-8.039,P=0.000];治疗结束时强骨膏方组的血清T-PⅠNP含量高于常规治疗组(t=11.754,P=0.000),血清β-CTX含量低于常规治疗组(t=-6.901,P=0.000),腰椎和髋部骨密度的组间差异均无统计学意义(t=1.355,P=0.179;t=1.770,P=0.080)。③SF-36评分。入组时2组患者的SF-36评分比较,差异无统计学意义(t=-1.212,P=0.229)。治疗结束时,2组患者的SF-36评分均较入组时升高[(102.221.69)分,(124.55±2.56)分,t=-98.085,P=0.000;(102.68±2.03)分,(115.34±2.29)分,t=-80.066,P=0.000],强骨膏方组的SF-36评分高于常规治疗组(t=18.702,P=0.000)。结论:绝经后骨质疏松性椎体骨折患者PKP术后应用强骨膏方,可以改善骨代谢、改善生活质量。

LC-MS法筛选强骨饮对绝经后骨质疏松症患者全血差异蛋白的研究

目的应用LC-MS法筛选分析经强骨饮治疗的绝经后骨质疏松症患者(postmenopausal osteoporosis,PMOP)和未经治疗的绝经后骨质疏松症患者全血差异蛋白,探索强骨饮治疗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法采用液相色谱-串联质谱联用测定法分别对7例经强骨饮治疗后的绝经后骨质疏松症患者(治疗组)及8例未经治疗的绝经后骨质疏松症患者(对照组)全血蛋白进行检测,并对差异蛋白质进行定量分析,筛选出差异蛋白,进行生物信息学分析。结果分析治疗组与对照组患者全血筛选出的91个差异蛋白,以差异倍数大于1.2倍作为显著上调、小于0.83作为显著下调,确认有31个蛋白表达显著上调,60个蛋白表达显著下调。对所有差异蛋白进行GO功能注释分析,发现上调的差异蛋白主要位于细胞质内,而有22%的下调蛋白在细胞外,有1个细胞骨架蛋白。差异蛋白参与的主要细胞活动为单一生物过程、细胞代谢过程等,分子功能主要为催化活性、分子功能调节剂和结构分子活动等。结论LC-MS法能有效筛选出强骨饮治疗的PMOP患者和未经治疗的PMOP患者全血中的差异蛋白,强骨饮治疗PMOP的作用机制是一个由多种蛋白质分子参与的结果,其关键的靶标和具体的调控机制尚需进一步的研究探讨。

基于蛋白质组学方法分析绝经后骨质疏松症全血差异蛋白

目的:基于蛋白质组学方法筛选绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)全血差异蛋白。方法:选择7例PMOP患者(骨质疏松组)和7例绝经后骨量正常女性(骨量正常组)作为研究对象。空腹抽取静脉血,采用高效液相色谱-串联质谱技术筛选PMOP全血差异蛋白,选取其中发生显著变化的差异蛋白进行生物信息学分析。结果:①差异蛋白鉴定及筛选结果。应用高效液相色谱-串联质谱技术共定量检测到102个PMOP差异蛋白质,其中25个蛋白质位点表达上调、77个蛋白质位点表达下调。68个蛋白质两组差异倍数超过2.0,其中39个蛋白质两组差异倍数有统计学意义( P <0.01)。②生物信息学分析结果。基因功能注释发现,差异蛋白主要参与的细胞活动为单一生物过程、细胞代谢过程、细胞生物调节、对刺激和代谢过程的反应,主要的分子功能为催化活性和结构分子活动。亚细胞定位分析发现,102个差异蛋白质中,位点表达上调的25个差异蛋白全部位于细胞内,位点表达下调的77个差异蛋白中,19个在细胞外,其他均在细胞内。39个目标差异蛋白相互作用网络图显示,蛋白酶体亚基α型-7(proteasome subunit alpha type-7,PSMA7)、蛋白酶体亚基β型-7(proteasome subunit beta type-7,PSMB7)、蛋白酶体亚基β型-3(proteasome subunit beta type-3,PSMB3)、蛋白酶体亚基α型-1(proteasome subunit alpha type-1,PSMA1)、神经前体细胞表达发育下调因子8(neural precursor cell-expressed developmentally downregulated 8,NEDD8)、DNA损伤结合蛋白1(DNA damage-binding protein 1,DDB1)、RAD23A、UBA52等蛋白位于相互作用网络节点的中心。结论:以全血作为样本采用蛋白质组学方法可筛选出数量丰富的PMOP差异蛋白,其中PSMA7、PSMB7、PSMB3、PSMA1、NEDD8、DDB1、RAD23A、UBA52可能是PMOP的潜在有效血液标志物。

右归丸抗骨质疏松症的中药化合物及靶点网络药理学作用机制

目的:基于中药网络药理学分析右归丸抗骨质疏松症的中药化合物、靶点及其作用机制。方法:通过中药综合数据库(traditional Chinese medicine integrated database,TCMID)检索右归丸中已知有效化合物;使用中医药分子机制生物信息学分析工具(bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional Chinese medicine,BATMAN-TCM)预测各中药化合物的作用靶点;使用DisGeNET和人工文献阅读的方式获取骨质疏松症和骨重建相关靶点;采用Cytoscape 3.7.1软件及其插件BiNGO和ClueGO对相关靶点进行GO基因注释和信号通路的富集分析;并采用课题组基于血清蛋白质组学建立的绝经后骨质疏松症疾病模型中的87个差异表达蛋白对右归丸所有预测靶点进行验证。结果:在右归丸10味中药中,共检索到392个化合物,分别是君药(附子、肉桂和鹿角胶)83个,臣药(熟地黄、山茱萸、枸杞和山药)127个,佐药(菟丝子、杜仲和当归)182个。其中君药与臣药含有4个相同化合物,君药与佐药含有1个相同化合物,臣药与佐药14个含有相同化合物;共鉴定到2112个可信靶点,其中君药775个,臣药共1483个,佐药共1491个;共筛选出右归丸抗骨质疏松症的靶点227个,主要参与代谢过程、细胞分化和生物学过程调控等20种生物学过程,数据挖掘发现涉及骨重建、骨矿化等的生物学行为;细胞作用位点分布主要包含9种细胞组成;主要具有13种分子功能;KEGG代谢通路富集分析显示,共137个信号通路被显著富集,其中,经典破骨细胞分化信号通路和与绝经后骨质疏松症的密切相关的雌激素调控信号通路在27个信号通路功能组中广泛分布;靶点验证,共筛选出FGA、AGT、P4HB、RAB7A、APOE和DKK3共6个靶点。结论:(1)初步阐释和明确了右归丸多靶点、多系统相互协同治疗骨质疏松症的特点。(2)右归丸中附子、肉桂、山茱萸、山药、枸杞子、杜仲和当归所含36种化合物靶向FGA、AGT、APOE、DKK3、P4HB和RAB7A共6个靶点发挥抗绝经后骨质疏松症作用。

基于中药系统药理学研究达原饮防治新型冠状病毒肺炎的科学内涵

目的 基于中药系统药理学探讨达原饮治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19,新冠肺炎)的药效成分、靶点及其作用,并阐释其科学内涵。方法 通过中药综合数据库(TCMID)检索达原饮中已知化合物(药效成分);使用中医药分子机制生物信息学分析工具预测药效成分作用靶点;使用DrugBank数据库等获取COVID-19相关靶点;采用Cytoscape 3.7.2软件及其插件对相关靶点进行富集分析,并绘制达原饮-化合物-靶点网络关系图。结果 在达原饮7味中药中检索已知结构和可信靶点的药效成分,共197个化合物;共鉴定到1602个可信靶点;达原饮靶点涵盖COVID-19的新冠状病毒进入细胞的关键基因ACE2,参与3061种生物学过程,经MCODE聚类后归为20种主要生物学过程,涵盖以与共生体、宿主相互作用、初始病毒感染等与COVID-19高度相关的生物学过程;234种细胞作用位点,经MCODE聚类主要位于顶端膜、细胞内小管、DNA聚合酶引物酶复合物、细胞质囊;具有648种分子功能,MCODE聚类显示主要为乙酰胆碱受体的活性、细胞内配体门控离子通道活性和钙释放通道活性三类;KEGG代谢通路富集分析显示,共132个信号通路被显著富集,其中,与COVID-19密切相关的疟疾和人T细胞白血病1型病毒感染信号通路被显著富集,且各个信号通路间相互联系;达原饮中黄芩可靶向ACE2,与西药及靶点对比,达原饮中7味草药通过其化合物靶向多个靶点抗病毒。结论 (1)初步明确了达原饮多靶点、多系统相互协同治疗COVID-19的基础和数据,分析了达原饮君臣佐使配伍组方特点及开达膜原,辟秽化浊的分子机制,为后期深入的基础实验和临床抗病毒药物研究提供了明确的研究方向。(2)达原饮多组分协同,驱邪扶正,标本兼治。