水飞蓟素抑制鼻咽癌模型大鼠鼻黏膜组织炎症及损伤

目的:通过建立鼻咽癌(NPC)大鼠模型,观察水飞蓟素(SIL)对NPC大鼠鼻黏膜损伤的保护作用及机制。方法:通过腋部皮下注射诱癌剂二亚硝基哌嗪(DNP)15 mg/kg和促癌剂佛波醇酯100 mg/kg构建NPC大鼠模型。建模成功后将大鼠随机分为模型组、SIL-L(50 mg/kg)、SIL-M(100 mg/kg)、SIL-H(200 mg/kg)剂量组、SIL(200 mg/kg)+AG-490(2 mg/kg)组,每组10只。另选10只大鼠作为空白对照组。各组分别给予相应药物腹腔注射,空白对照组给予生理盐水。连续治疗90 d后,ELISA法检测鼻腔灌洗液IL-6、IL-10、IL-1β水平;HE染色观察鼻腔黏膜组织病理变化,TUNEL法观察细胞凋亡;免疫组化检测UBAP1表达;Western blot检测大鼠鼻黏膜组织中IL-6、STAT3蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠鼻黏膜组织病理变化明显,癌变细胞明显增加;细胞凋亡率、鼻黏膜组织中IL-6、STAT3蛋白表达及鼻腔灌洗液中IL-6、IL-1β水平明显升高,IL-10水平显著降低,鼻黏膜组织中UBAP1表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,SIL各剂量组大鼠鼻黏膜组织病理变化明显减轻,癌变细胞减少;细胞凋亡率、鼻黏膜组织中IL-6、STAT3蛋白表达及鼻腔灌洗液中IL-6、IL-1β水平明显降低,IL-10水平显著升高,鼻黏膜组织中UBAP1表达显著回升,且呈剂量效应关系(P<0.05);SIL+AG-490组大鼠上述各观察指标均明显优于SIL各剂量组(P<0.05)。结论:SIL可减轻NPC大鼠模型鼻黏膜组织炎症及损伤,其机制可能与IL-6/STAT3信号通路抑制有关。

鼻窦内镜术辅助盐酸氨溴索治疗老年慢性鼻窦炎伴鼻息肉的疗效及对血清IL-6、IL-17、IL-23表达的影响

目的探究鼻窦内镜术辅助盐酸氨溴索治疗老年慢性鼻窦炎伴鼻息肉的疗效及对血清白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-23表达的影响。方法62例老年慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者随机分为观察组与对照组各31例。对照组接受Messerklinger术式行鼻窦内镜手术,在此基础上,观察组予以盐酸氨溴索经鼻超声雾化吸入治疗。比较两组疗效,采用Lund-Mackay评分评价鼻内镜及鼻窦CT检查结果,视觉模拟评分(VAS)评价主观症状严重程度,鼻腔鼻窦结局测试(SNOT)-20评分量表评估生活质量;同时测定鼻黏膜纤毛传输速率、鼻腔容积(NCV)、鼻腔的最小横截面积(NMCA)、鼻腔最小横截面至前鼻孔距离(DCAN)及血清IL-6、IL-17、IL-23水平。结果观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组治疗后VAS、SNOT-20、Lund-Mackay评分均明显低于对照组(P<0.001);观察组IL-6、IL-17、IL-23水平均明显低于对照组(P<0.001);观察组NCV、NMCA、鼻黏膜纤毛传输速率均明显高于对照组(P<0.001),而DCAN明显低于对照组(P<0.05)。结论鼻窦内镜术辅助盐酸氨溴索治疗老年慢性鼻窦炎伴鼻息肉疗效确切,可有效减轻相关症状体征,促进鼻腔功能恢复,加快鼻黏膜纤毛传输速率,提高日常生活质量,这可能与血清IL-6、IL-17、IL-23表达降低有关。

LncRNA NEAT1调控miR-331表达对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响

目的探讨长链非编码(Lnc)RNA NEAT1通过靶向调控miR-331对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响。方法选取2018年1月至2019年1月手术切除鼻咽癌组织及对应的癌旁组织的患者48例样本,qRT-PCR检测Lnc RNA NEAT1在鼻咽癌及相应的癌旁组织、不同的鼻咽癌细胞系中的表达情况;构建Lnc RNA NEAT1沉默细胞系SUNE-1-siNEAT1及阴性对照SUNE-1-siNC,并以SUNE-1作为空白对照;电离辐射后,采用MTT实验、Transwell、免疫荧光标记检测Lnc RNA NEAT1对SUNE-1细胞辐射敏感性、侵袭能力及DNA损伤修复的影响;使用生物信息学网站starBase预测NEAT1可互补结合的微小RNA(microRNA,miRNA),再经双荧光基因报告验证Lnc RNA NEAT1与miR-331的靶向关系。结果qRT-PCR结果显示,鼻咽癌组织中Lnc RNA NEAT1的表达水平高于癌旁正常组织,且差异有统计学意义(P<0.05),Lnc RNA NEAT1在SUNE-1细胞中表达量最高,与其他细胞株相比差异均具有统计学意义(P<0.05);成功构建Lnc RNA NEAT1沉默细胞系后,与SUNE-1组和SUNE-1-siNC组相比,SUNE-1-siNEAT1组细胞辐射后OD492nm值明显下降,细胞侵袭数量明显减少,γH2AX荧光强度明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05),SUNE-1组与SUNE-1-siNC组相比,差异无统计学意义(P>0.05);starBase网站预测结果显示,Lnc RNA NEAT1与miR-331存在互补结合位点,双荧光基因报告结果显示Lnc RNA NEAT1与miR-331可靶向结合。qRT-PCR证实LncRNA NEAT1负向调控miR-331的表达。结论lnc RNA NEAT1在鼻咽癌中呈高表达,沉默Lnc RNA NEAT1表达可能通过上调miR-331水平抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭能力,增加鼻咽癌细胞辐射敏感性。

草氨酸钠抑制细胞自噬对鼻咽癌放射敏感性的影响

目的探讨草氨酸钠对鼻咽癌CNE2细胞放射后自噬的影响,以及对放射的增敏作用。方法用RMPI-1640培养液培养鼻咽癌CNE2细胞,MTT法检测CNE2细胞的生长情况,Western blotting法检测自噬蛋白LC3Ⅱ的表达。结果采用0 mmol·L^-1、10 mmol·L^-1、20 mmol·L^-1、40 mmol·L^-1的草氨酸钠处理CNE2细胞48 h后,细胞生长抑制率分别为(0.37±0.04)%、(7.28±2.24)%、(16.54±4.16)%、(27.09±5.35)%,差异有统计学意义(P<0.01)。6 Gy X射线分别联合0 mmol·L^-1、10 mmol·L^-1、20 mmol·L^-1、40 mmol·L^-1草氨酸钠处理CNE2细胞48 h后,细胞生长抑制率分别为(31.62±7.24)%、(38.32±10.43)%、(50.28±11.35)%、(62.12±13.16)%,差异有统计学意义(P<0.05);细胞克隆抑制率分别为(52.16±11.34)%、(60.27±11.83)%、(77.25±13.16)%、(86.42±13.74)%,差异有统计学意义(P<0.05)。LC3Ⅱ蛋白灰度扫描分析显示对照组、照射组、照射+10 mmol·L^-1草氨酸钠组、照射+20 mmol·L^-1草氨酸钠组、照射+40 mmol·L^-1草氨酸钠组细胞LC3Ⅱ表达的相对灰度值分别为(0.104±0.013)、(0.714±0.183)、(0.562±0.126)、(0.414±0.095)和(0.253±0.052),差异有统计学意义(P<0.05)。结论草氨酸钠可抑制放射引起的CNE2细胞自噬,增强CNE2细胞对放射的敏感性。

草氨酸钠抑制细胞自噬对鼻咽癌放射敏感性的影响

目的草氨酸钠对鼻咽癌CNE2细胞放射后自噬的影响,以及对放射的增敏作用。方法鼻咽癌CNE2细胞培养于RMPI-1640培养液,MTT法检测CNE2细胞生长抑制。Western blot检测自噬蛋白LC3Ⅱ表达。结果0、10、20、40 mmol/L草氨酸钠处理CNE2细胞48小时后,细胞生长抑制率分别为(0.37±0.04)%、(7.28±2.24)%、(6.54±4.161)%、(27.09±5.35)%,各组间具有显著性差异(P均<0.01)。60 Gy X线照射联合0、10、20、40 mmol/L草氨酸钠处理CNE2细胞48小时后,细胞生长抑制率分别为(31.62±7.24)%、(38.32±10.43)%、(50.28±11.35)%、(62.12±13.16)%,各组间具有显著性差异(P均<0.05),细胞克隆抑制率分别为(52.16±11.34)%、(60.27±11.83)%、(77.25±13.16)%、(86.42±13.74)%,各组间具有显著性差异(P均<0.05)。LC3Ⅱ蛋白灰度扫描分析显示对照细胞、射线处理细胞、射线+10 mmol/L草氨酸钠处理细胞、射线+20 mmol/L草氨酸钠处理细胞、射线+40 mmol/L草氨酸钠处理细胞LC3Ⅱ表达的相对灰度值分别0.104±0.013、0.714±0.183、0.562±0.126、0.414±0.095和0.253±0.052,各组间具有显著性差异(P均<0.05)。结论草氨酸钠抑制了放射引起的CNE2细胞自噬,增强了CNE2细胞对放射的敏感性。

黄连解毒汤对急性鼻窦炎模型大鼠鼻窦黏膜MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨黄连解毒汤对急性鼻窦炎模型大鼠鼻窦黏膜丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:69只SD大鼠随机取10只作为空白对照组,其余59只SD大鼠采用肺炎链球菌混合膨胀海绵鼻腔填塞方法建立急性鼻窦炎模型,造模成功后,将50只SD大鼠随机分为模型组、黄连解毒汤低剂量组、黄连解毒汤中剂量组、黄连解毒汤高剂量组和阳性对照组,每组10只。各给药组大鼠采用鼻腔灌洗的方式给予相应药物,模型组和空白对照组大鼠给予等体积生理盐水鼻腔灌洗,连续给药7 d。给药结束后,观察大鼠体征并进行鼻窦炎症状评分;鼻腔灌洗液培养观察肺炎链球菌生长情况;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠鼻窦黏膜病理损伤;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中炎症因子(TNF-α、IL-6)含量;qRT-PCR检测鼻窦黏膜TNF-αmRNA、IL-6 mRNA水平;Western bloting检测鼻窦黏膜TNF-α、IL-6及C-Jun N末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p38、NF-κB p65水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠鼻分泌物的细菌CFU值明显升高,鼻窦黏膜有明显的炎症反应,血清IL-6和TNF-α水平明显升高,鼻窦黏膜中JNK、ERK1/2、p38、NF-κB p65磷酸化水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,黄连解毒汤高、中、低剂量组和阳性对照组大鼠鼻分泌物的细菌CFU值明显降低,鼻窦黏膜的炎症反应明显改善,血清IL-6和TNF-α水平明显降低,鼻窦黏膜中JNK、ERK1/2、p38、NF-κB p65磷酸化水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:黄连解毒汤对大鼠鼻窦黏膜具有剂量依赖的保护作用,其可能与抑制MAPK/NF-κB信号通路的激活,以剂量依赖的方式下调炎症因子的基因转录,从而减少炎症因子的产生有关。