植物根际促生菌F13的筛选、鉴定及对豆角促生、抗病的效果

为获得具有药肥双效的多功能植物根际促生菌,从葡萄根际土壤中分离出同时具有溶磷解钾功能的菌株F13。该菌通过形态学观察、生理生化检测和16S rDNA比对,鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。经平板对峙法测定菌株F13对8种植物病原菌的抑制率为63.26%~81.53%。田间应用中发现,菌株F13发酵液灌根处理对豆角(Vigna unguiculata subsp.sesquipedalis(L.)Verdc.)生长具有显著的促进作用,其中实验组在株高、叶片数、茎粗方面分别高于对照组26.7%、24.4%、11.9%,产量高于对照组39.68%;在植株吸收磷、钾元素方面分别高于对照组11.5%、46.8%;在豆角果实中维生素C、可溶性蛋白含量方面分别高于对照组22.15%、55.55%。此外,菌株F13对豆角白粉病的相对防效达71.92%。因此,菌株F13是一株具有巨大应用潜力的药肥双效植物根际促生菌。

氯氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

目的分离得到能高效降解氯氰菊酯的菌株。方法采用选择性培养基从农药厂的污泥中进行富集和分离筛选高效菌株,并且用16S rDNA序列分析法和其生理生化特征对其进行鉴定。结果该菌株鉴定为克雷伯氏菌属(Klebsiella sp.),命名为Klebsiella sp.J-2(登录号为AY989899),菌株J-2能以氯氰菊酯为唯一碳源进行生长,降解氯氰菊酯的最适温度是35℃,最佳pH是7.0。结论菌株J-2是一株能高效降解氯氰菊酯的菌株。

一株新耐冷菌SA-8降解有机磷农药的研究

从东北地区受农药长期污染的土壤中通过富集培养、分离筛选到一株甲基对硫磷高效降解菌SA-8,根据生理生化特征,初步鉴定为邻单胞菌Plesiomonassp 。菌株降解甲基对硫磷的最适温度和pH分别为20℃和7 0,在此条件下培养24h,降解率达93%;当温度位于10℃时,降解率也有66 2%;而在35℃时降解率仅为27 3%。这些结果表明SA-8是一株耐冷有机磷农药降解菌。

亚临界R134a萃取樟树叶精油的工艺优化及抑菌研究

为研究樟树叶精油的高效提取技术,拓宽其应用范围,以1,1,1,2-四氟乙烷(R134a)为萃取溶剂,通过正交试验优化亚临界R134a萃取樟树叶精油工艺,并比较其和传统方法水蒸气提取的樟树叶精油化学成分差异和抑菌活性。研究结果表明:亚临界R134a萃取樟树叶精油最佳工艺条件为原料粒度≤2 mm,液料比为6∶1(L∶kg),萃取温度45℃,萃取时间40 min/次,萃取4次,得率为(2.87±0.08)%,GC-MS分析水蒸气提取和亚临界R134a萃取得到的2种叶精油分别鉴定出39和35种化合物,相对总峰面积分别为99.97%和99.91%。2种叶精油的化学组分均以醇类和烃类化合物为主,龙脑是2种叶精油的主要化学成分,水蒸气提取精油的龙脑相对峰面积(64.29%)大于亚临界R134a萃取精油的龙脑相对峰面积(58.09%)。2种叶精油对植物病原菌均有不同程度的抑制作用,亚临界R134a萃取樟树叶精油对病原真菌的抑菌效果优于水蒸气提取的,2种叶精油均对辣椒疫霉病菌的抑制率最高,分别为71.74%和62.87%。

复合菌剂在中草药渣堆肥中的应用研究

采用中草药渣作为有机肥堆酵原料,并添加复合菌剂进行高温好氧堆肥试验,结果表明:与未添加菌剂处理相比,添加复合菌剂能迅速使堆肥的温度超过60℃,加快中草药渣的分解速度,全氮含量增加13.2%,速效磷、速效钾含量分别增加29.1%、27.2%,促进了堆肥的腐熟、稳定,说明复合菌剂可加快中草药渣的发酵腐熟、提高堆肥肥力。

菊酯类农药降解酶Est825的降解效果及安全性评价初报

通过试验表明高密度发酵制备的菊酯类农药降解酶Est825对菊酯类农药的降解率达70%以上,其降解农药的最适活力浓度为120 U/mL,最适反应温度范围为32~37℃;测定了菊酯类农药降解酶对SD大鼠急性经口毒性,LD50>6 g/kg体重,属实际无毒;皮肤变态试验结果表明该酶制剂不引起皮肤变态反应。

益生菌制剂加工技术的研究概况

对目前益生菌制剂的加工技术,包括:喷雾干燥技术、冷冻干燥技术、包埋技术的研究概况进行了综述。喷雾干燥技术中优化工艺参数、热应激蛋白、细胞损伤位置和机理研究,提高益生菌制品的质量;冷冻干燥技术中保护剂、冷应激蛋白对益生菌保护作用研究;包埋技术中重点介绍了微胶囊包埋技术的包囊材料、包埋方法的研究对益生菌制剂的改良。

不同化学型樟树精油的化学成分和抑菌效果研究

采用水蒸气蒸馏法提取芳樟和龙脑樟2种不同化学型的樟树叶精油。利用GC-MS法对比分析2种精油化学成分,并采用平板对峙法测试500 mg/L浓度下精油对10种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明,芳樟和龙脑樟2种精油共分析鉴定出52种化合物,精油成分组成以单萜类和倍半萜类为主。芳樟精油分析鉴定出39种化合物,其中醇类化合物9种、烯类化合物24种,主要成分为芳樟醇(53.73%)。龙脑樟精油分析鉴定出28种化合物,其中醇类化合物10种、烯类化合物12种,主要成分为龙脑(80.69%)。2种樟树叶精油对甘蔗赤腐病菌等8种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,对苹果轮纹病菌和小麦赤霉病菌无抑制作用。2种樟树精油对不同植物病原真菌的抑菌率相差较大,芳樟精油对8种植物病原真菌抑制率在11.51%~71.51%,而龙脑樟精油的抑制率在10.89%~63.54%。芳樟精油抑菌效果总体优于龙脑樟精油。

不同溶剂亚临界萃取樟树叶精油化学成分分析及抑菌效果

研究采用丙烷、四氟乙烷、正丁烷、正丁烷与乙醇(9:1)混合物为溶剂,分别对樟树Cinnamomum camphora叶进行亚临界提取。提取得到的叶精油用GC/MS 法进行成分分析,并开展植物病原菌的抑制作用研究,以比较不同提取溶剂获得的产物在化学组成成分和抑菌效果上的差异。结果表明:(1)以正丁烷与乙醇(9:1)混合物为溶剂的亚临界萃取精油得率(3.67%)高于其他3种溶剂;(2)在4种樟树叶精油样品中鉴定出的化合物分别为29、33、34和22种,以醇类和烯烃类化合物为主,其中共同鉴定出的化合物为18种;所有样品均以龙脑为主要成分,其相对含量分别为44.91%、43.85%、45.41%和50.44%;(3)4种樟树叶精油对真菌病原菌水稻纹枯病原菌Rhizoctonia solani、辣椒疫霉病原菌Phytophthora capsici和细菌病原菌青枯菌Ralstonia salanacearum、胡萝卜软腐果胶杆菌Pectobacterium carotovorum均有不同程度的抑制作用,四氟乙烷萃取得到的樟树叶精油抑菌效果最优。

酶定向进化文库的筛选方法

酶工程作为生物技术的主体之一,对农产品加工等的发展具有广泛作用。自然界中的酶往往不能满足实际生产,因此需要通过模拟自然界中的蛋白质进化,对酶进行改造和突变文库筛选,最终得到符合实际生产的酶。目前,改造酶的途径主要有定点突变和定向突变两种。突变体文库的建立方法较为成熟,并且建立起的文库库容也能够达到研究者的要求,但是突变体文库的筛选受现有技术等所局限,成为了定向进化技术的瓶颈。介绍了几种常用的突变体文库的筛选方法,对它们的原理及特点进行阐述,并对未来的发展方向及趋势进行了总结。

环介导等温扩增技术的应用及研究进展

环介导等温扩增(LAMP)技术自2000年被发明以来以其快速、灵敏、低耗等特点,引起众多研究者的关注。该技术在人、动物、植物、环境等相关微生物的检测、监控等领域得到了广泛研究与应用,其检测灵敏度普遍高于传统PCR 。但是传统LAMP技术对于产物检测存在耗时、易造成污染等问题,以及在野外或医疗点检测时存在判读不便的弊端。就LAMP技术与其他多种产物检测技术结合后的方法如目视LAMP、实时LAMP、微流控LAMP、横向流LAMP及电化学LAMP进行了总结、举例及讨论。目视LAMP具有费用低、适合多环境下使用的特点;实时LAMP、微流控及电化学LAMP法能够有效提高样品检测的准确度,且可减少检测时间;横向流LAMP具有可操作性强、便于判读等特点。根据目前LAMP技术的研究进展及各技术优劣势的分析,预测 LAMP技术未来发展的方向和重点可能为研发手持便携式检测仪。

单增李斯特菌反转录环介导等温扩增检测方法的建立

本研究针对单增李斯特菌的快速检测方法进行开发,首先根据单增李斯特菌hly A基因序列保守区设计2对引物,在同一体系中对单增李斯特菌的RNA进行反转录及环介导等温扩增,同时使用羟基萘酚蓝(终浓度200μM)作为反转录环介导等温扩增产物的指示剂,在不开盖进行凝胶电泳检测的情况下,可直接根据体系颜色变化判读结果,能够在20 h内(包括增菌时间)检测出样本中是否存在单增李斯特菌的RNA。本研究建立的RT-LAMP-HNB检测方法对单增李斯特菌RNA的检出限为5.8×10^-3μg/m L,起始接种浓度检出限为10 CFU/10 mL,灵敏度是RT-PCR的10倍,且能够检测出是牛奶中否存在的单增李斯特活菌,具有实际应用价值。本研究开发的检测方法具有快速、准确、便捷、灵敏度高等特点,适用于在基层或不便利地区推广使用。

荔枝内生乳酸菌的筛选、鉴定及发酵效果分析

【目的】筛选用于果汁发酵的荔枝内生乳酸菌,为解决发酵果汁专用乳酸菌少的问题提供新思路。【方法】以荔枝果肉为试验材料,通过MRS-溴甲酚紫平板法分离筛选荔枝内生乳酸菌,测定初筛菌株的发酵产酸和生长能力,筛选出发酵性能最优菌株,并进行形态学观察、生理生化试验和16S rDNA鉴定;以常用果蔬汁发酵菌种植物乳杆菌为对照菌株,进行荔枝内生菌发酵荔枝果汁的感官评价、微生物、理化指标和营养物质含量研究。【结果】从荔枝果肉中筛选出1株发酵性能优良的荔枝内生菌(编号LZ1),该菌菌落呈乳白色圆形凸起,边缘整齐,革兰氏阳性细菌,菌体细胞呈球形或卵圆形,单个、成对或链状排列;厌氧生长,能发酵纤维二糖、葡萄糖、果糖等8种碳水化合物;16S rDNA鉴定结果表明该菌与肠膜明串珠菌葡聚糖亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum)的同源性达99%以上,结合形态特征及生理生化试验结果,鉴定该菌株为肠膜明串珠菌葡聚糖亚种。该荔枝内生肠膜明串珠菌能在荔枝果汁中生长良好,发酵果汁无分层现象,有浓郁的荔枝清香味,感官评分显著高于对照菌植物乳杆菌(P<0.05,下同),活菌数达4.85×109CFU/mL,高于植物乳杆菌,但差异不显著(P>0.05);肠膜明串珠菌和植物乳杆菌发酵果汁的乳酸含量(9.63和13.83 g/kg)显著高于不接菌果汁(0.44 g/kg),pH(3.73和3.54)显著低于不接菌果汁(4.68);荔枝内生肠膜明串珠菌发酵果汁中的维生素(Vc)含量高于植物乳杆菌和不接菌果汁,对果汁中果糖和葡萄糖的利用能力也强于植物乳杆菌,两株菌发酵果汁的葡萄糖含量分别较不接菌果汁下降31.4%和26.7%,果糖含量降幅分别为43.4%和21.7%;荔枝内生肠膜明串珠菌发酵果汁中游离氨基酸保留率为87.3%,略高于植物乳杆菌(84.4%),两株菌在发酵过程中各种氨基酸的种类和含量变化有所不同。【结论】筛选的荔枝内生肠膜明串珠菌在荔枝果汁中生长良好,发酵的荔枝果汁既保存和优化果汁的营养和口感,又增添益生菌的保健功能。

黑皮冬瓜空气能热泵干燥工艺参数优化

该研究优化黑皮冬瓜空气能热泵干燥工艺参数,先通过单因素试验研究瓜片厚度、烘干温度及风速等参数对冬瓜干燥过程及瓜干明度指数、复水比和维生素C保留率等瓜干品质指标的影响,确定各参数的最适取值范围,采用正交试验及综合加权评分法优化确定冬瓜热泵干燥工艺参数最佳值分别为:温度60℃,风速1.5 m/s,切片厚度6 mm。在该工艺条件下制得的瓜干明度指数值为86.2,复水比为6.82,维生素C保留率为84.37%,综合评分为92.91分。研究结果为空气能热泵干燥技术应用于冬瓜干的规模化生产提供参考。

气相色谱-电子捕获检测器检测白菜中有机磷、苯基吡唑、烟碱类农药残留

建立了白菜中10种属于有机磷、苯基吡唑和烟碱等不同类别的农药残留的气相色谱-电子捕获检测器检测方法。样品用乙腈提取,经石墨化碳黑-氨基固相萃取柱净化,旋转蒸发浓缩定容后,用基质标准溶液进行外标法校正定量。10种农药在0.01～1.0μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系;本方法回收率为88.6%～115.3%,变异系数在1.2%～6.4%之间;方法检出限为0.00007～0.001 mg/kg。此方法准确、可靠、灵敏度高,可以满足日常蔬菜农残检测的要求,同时可为农药残留检测提供一种新思路。

GC-ECD定量检测榴莲、山竹中20种有机氯类、菊酯类农药残留

建立了一种利用气相色谱仪-电子捕获检测器检测榴莲、山竹中20种有机氯类、菊酯类农药残留的方法.榴莲和山竹都因其独特口感受到大家喜爱,消费市场巨大.但目前国内外对这两种水果中有机氯类、菊酯类农药残留的检测仍处于空白.建立快速方便、简单准确地检测出两种热带水果中20种有机氯类、菊酯类的农药残留的方法,该方法检出限在0.001～0.149 mg/kg之间,RSD值为3.2％～11.6％,添加回收率在70.66％～126.37％之间.

气相色谱法快速检测韭菜中15种有机磷农药残留

建立了一种用气相色谱仪快速检测韭菜中15种农药残留的方法,韭菜样品经乙腈提取、稀释,浓缩定容后,用GC-FPD测定15种农药残留。方法最低检出限：0.0033-0.0085 mg/kg;回收率：68.73%-106.56%;RSD：1.55%-8.82%。结果表明,此方法简单快速、准确、新颖且去干扰效果显著。

气相色谱-火焰光度法测定黑木耳中16种有机磷农药残留

建立了一种利用气相色谱仪检测黑木耳中16种有机磷农药残留的方法,用乙腈萃取、氮气浓缩、丙酮定容、基质标准曲线校准等简单的操作手段快速检测黑木耳中有机磷的农药残留。结果表明,该方法检出限在0.00254-0.01628 mg/kg之间,RSD值为3.1%-11.5%,添加回收率在70.79%-114.47%之间。该方法快速方便、简单准确,适用于黑木耳中有机磷农药残留的日常检测与监控。

4种植物精油对荔枝主要病害抑制作用研究

采用琼脂扩散法、PDA平板对峙法初步测试丁香酚、香芹酚、柠檬醛和肉桂醛在0.5%浓度下对两种荔枝炭疽病菌和霜疫霉病菌的抑菌效果,含毒培养基生长速率法测定4种精油在不同浓度下的抑制率及最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,4种植物精油对荔枝炭疽病菌和霜疫霉病菌均有明显的抑制作用。对炭疽病菌的抑制能力从大到小依次为香芹酚>丁香酚>肉桂醛>柠檬醛,对霜疫霉病菌的抑制能力从大到小依次为肉桂醛>丁香酚>香芹酚>柠檬醛。

定向释放型乳酸菌微胶囊的制备

以副干酪乳杆菌R8为研究对象,筛选了冻干保护剂、益生元等包埋助剂,优化了微胶囊的包封方法,并采用喷雾法将包埋液喷入固化液覆膜固化,制备出耐胃液、可定向释放的乳酸菌微胶囊,为规模化生产乳酸菌微胶囊制剂提供了新方法.筛选出的最佳冻干保护剂为全蛋液,最佳益生元为菊粉;喷雾法制备微胶囊的条件为：喷雾压力0.2～0.3 MPa,包埋液流量30 mL/min;最佳的包埋液配方为：菌泥5％,菊粉2％,全蛋液20％,海藻酸钠1％;最佳的固化液配方为：壳聚糖0.5％,CaCl2 2.5％,乙酸1％.