新型鸭呼肠孤病毒σB蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

为制备新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX株σB蛋白的多克隆抗体,试验经RT-PCR扩增NDRV XX株σB基因编码序列,构建原核表达质粒pET-32a(+)-σB,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导获得His-σB重组蛋白。SDS-PAGE显示成功表达出约55ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,其表达时的最佳诱导时间、IPTG诱导浓度分别为3h和0.25mmol/L。经Ni 2+柱亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,将蛋白经Western blotting和蛋白质谱鉴定为高纯度的σB重组蛋白,将纯化后σB重组蛋白按合理免疫程序免疫家兔,获得多抗隆抗体经Western blotting分析显示出特异性的反应。本试验结果为NDRVσB蛋白功能的深入研究及基因工程疫苗的研发奠定了基础。

新型鸭呼肠孤病毒DRV-XX株全基因组序列测定及分析

本研究自广东省新兴地区疑似新型鸭呼肠孤病料样品中分离出一株病毒,命名为DRV-XX株。利用RT-PCR方法对DRV-XX株进行全基因组序列扩增,拼接获得其全基因组(23 419 bp),对其10个基因节段进行分析显示,该分离株与禽呼肠孤病毒(ARV)及番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的相似性较低,而与国内新型鸭呼肠孤病毒(New-type duck reovirus,NDRV)相似性较高(99%),表明该分离株为NDRV。对其10个RNA节段分别进行测序及遗传进化分析,其中S3基因序列分析显示,DRV-XX与MDRV共同构成一主干支,与其S1、S2、S4、M1、M3、L1基因的一致;而M2基因进化树显示,DRV-XX与ARV处于同一主干支;由L2、L3组基因分析显示,DRV-XX与ARV在同一主干支,并有MDRV参与其中,而另一主干支为MDRV。因此,推测DRV-XX株的不同基因组节段来源不同,可能是ARV和MDRV发生同义突变,也可能是基因重组的结果。该研究丰富了NDRV的基因库相关信息,也为广东地区NDRV的防制提供一定参考依据。

广东新型鸭呼肠孤病毒σB蛋白基因克隆及序列分析

为研究广东新型呼肠孤病毒(NDRV)的基因变异及遗传演化情况,本试验从广东不同鸭场病死鸭肝脏、脾脏等组织脏器中分离到8株流行毒株,用RT-PCR方法进行σB蛋白基因扩增、克隆与序列分析,并与其他毒株σB蛋白的氨基酸特性、蛋白抗原和蛋白基因进行系统进化比对分析。结果表明,广东省鸭群中感染的NDRV与国内其他地区报道的DRV核苷酸序列同源性很高,达96.6%~99.5%,而与禽呼肠孤病毒(ARV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的同源性则较低,分别为64.6%~66.5%和66.2%~67.1%;8株NDRV之间的核苷酸序列同源性高达97.7%~99.7%。与其他毒株比较结果显示,本试验分离的NDRV毒株磷酸化位点均比参考毒株ARV和MDRV少,且大多数区域的抗原指数都较高,抗原性与MDRV较为接近,遗传进化分析结果表明,NDRV和国内其他DRV处于独立的进化分支,ARV和MDRV则处于不同分支。结果表明,广东省流行的NDRV毒株σB蛋白基因序列高度保守,且广东地区分离的NDRV与国内其他地区分离的DRV没有明显的地域差异。

4株NDV流行株的分离鉴定、生物学特性及遗传学特性的研究

为研究近年国内的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)流行株与传统疫苗株(Mukteswar、La Sota及Clone 30)的亲缘关系和遗传演化情况,试验从广东、广西和海南地区患病的免疫鸡群病料中分离鉴定得到4株NDV流行株。通过RT-PCR技术对各毒株的F和HN基因进行扩增、克隆与序列分析,然后与GenBank上发表的NDV序列进行同源性比对、遗传进化树分析,并测定各毒株致病指数。结果显示,本试验中HN-08株的鸡胚半数感染量(EID50)、平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)和静脉致病指数(IVPI)分别为10-8.37/0.2mL、58.5h、1.78和2.45,XX-08株分别为10-6.50/0.2 mL、75.0h、1.61和2.41,YS-09株分别为10-7.75/0.2mL、64.5h、1.71和2.38,LF-09株分别为10-7.60/0.2mL、63.8h、1.84和2.38。4株鸡源NDV流行株彼此间F和HN基因推导的氨基酸序列同源性在95.8%以上,与鸡源流行株GX11/03、GM株的同源性为96.8%~98.6%,而疫苗株Mukteswar、La Sota及Clone 30株的同源性为86.7%~90.6%,与标准强毒株F48E9的同源性为88.4%~91.3%。表明4株NDV流行株均为强毒株,与近年来国内流行的GX11/03、GM株有较近的亲缘关系,而与传统疫苗株的关系相对较远。

麻黄鸡禽白血病的诊断及病理组织学观察

通过对广东某麻黄种鸡场抽取的130份样品进行禽白血病抗原ELISA检测和病理组织学观察,结果显示:该鸡场感染禽白血病的阳性率为10%;从病理组织切片中观察到肝脏、脾脏、胰腺、大脑、肺脏和气管等器官组织中有数量不等的髓细胞样瘤细胞呈局灶性或散在增生。根据ELISA检测和病理组织学观察的结果,说明该麻黄祖代鸡群感染了禽白血病。

燃煤电厂飞灰PM2.5中Cu、Zn等重金属物质

选取国内四个焚烧不同煤种的发电厂机组中的飞灰作为研究对象,通过粒度分析仪筛选出了粒径低于2.5、2.5~10、10~30μm共三种粒径下的灰样,对4个电厂飞灰迚行了质量分布频率的分析以及痕量元素富集规律的研究,结果表明:PM2.5的质量频率均在10%以下,2.5μm <dp<10μm的质量频率占比在40%~50%、dp>10μm颗粒的质量频率占比在50%左右;燃煤电厂所产生颗粒的真密度与粒径大小密切有关,颗粒真密度随粒径增大而减小,随粒径减小而增大;燃煤电厂所产生的痕量元素(重金属物质)存在形态较为稳定,其存在形式与燃烧方式和煤的种类无关;燃煤电厂所产生的飞灰中各元素的富集系数大致均为随粒径增大而减小,尤其以Cu表现最为明显。

吸收塔塔壁防冲刷装置概述

为防止烟气沿吸收塔塔壁逃逸导致脱硫效率降低,在一般喷淋空塔设计中,喷嘴所喷出的浆液都会直接冲刷到塔壁,封堵烟气沿塔壁逃逸的线路,长期的浆液冲刷容易造成吸收塔壁磨损穿孔。提出了吸收塔塔壁防冲刷装置的设计理念,分析了其可行性,并提供了实际应用案例,可为其他脱硫工程设计提供一定的参考,达到优化设计的目的。

煤与超临界水煤气一体化的高效发电系统

为进一步优化现有集成超临界水煤气(SCWG)发电系统的热效率,文中提出了一种新型的煤与超临界水煤气一体化高效率发电系统设计。在该设计中,气化产物直接进入超临界涡轮机发电,并在减压之后与未反应的水分离的合成气转移到联合循环中。在不同水煤浆浓度(CWSC)和蒸汽机出口压力(Ph)对发电系统热效率的影响的实验结果表明,所设计的发电系统热效率高于参考发电系统,并在CWSC为25wt%和Ph为1bar情形下达到了54.68%的最佳热效率。

新型鸭呼肠孤病毒可视化检测方法的建立与应用

为了快速检测新型鸭呼肠孤病毒(NDRV),试验针对NDRV保守序列设计特异性引物,将RT-LAMP技术与荧光染料钙黄绿素结合,建立NDRV钙黄绿素可视化RT-LAMP快速检测方法,并对该方法的反应温度、时间及体系进行优化,检测该方法的特异性和敏感性,同时采集12份临床疑似NDRV感染的病料分别用钙黄绿素可视化RT-LAMP方法和常规RT-PCR方法进行检测,比较两者的阳性检出率。结果表明:成功构建NDRV钙黄绿素可视化RT-LAMP快速检测方法;优化后的反应温度为66℃,反应时间为50 min,反应体系中Mg^(2+)浓度为3.0 mmol/L,甜菜碱浓度为0.5 mmol/L,dNTPs浓度为0.3 mmol/L,Bst DNA聚合酶的浓度为0.32 U/μL,AMV反转录酶的浓度为0.14 U/μL,内外引物浓度比为10∶1,环外引物浓度比为4∶1。该方法可特异性检测出NDRV;对NDRV的最低检测量约为200 fg;用该方法对临床疑似NDRV感染的病料进行检测,阳性率为91.67%,而常规RT-PCR方法阳性率为83.33%,并且钙黄绿素可视化RT-LAMP方法能通过颜色变化观察反应结果。说明试验建立的RT-LAMP检测方法特异性好,敏感性强,读取结果更方便直观。

脱硫系统高压头氧化风机选型分析及应用实例

本文以茂名热电厂7号机组（600MW）脱硫系统氧化风机为实例，对脱硫系统高压头氧化风机的选型方向和应用实例进行分析，探讨未来脱硫氧化风机发展主流方向。此工程实例可为其他脱硫工程设计提供一定的参考，达到优化选型的目的。

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及药敏试验

该研究从广东中山某猪场疑似患有副猪嗜血杆菌(HPS)病的病死猪心脏和肺脏中分离到一株细菌。经形态学观察、培养特性鉴定、生化试验、PCR检测和致病性试验,显示该菌为HPS。药敏试验结果表明该菌株对恩诺沙星、诺氟沙星、红霉素、庆大霉素和新霉素等表现高敏感性;对阿米卡星、土霉素、青霉素、强力霉素和四环素等则耐药。

浅谈居住区景观设计——以南平万达广场销售物业居住区景观工程为例

笔者结合多年景观设计经验,简要介绍了我国城市综合体居住区环境景观设计中存在的问题,以及提出景观设计中应考虑的因素,最后以南平万达广场销售物业居住区景观工程为例对城市商业综合体居住区景观设计做出分析,以供参考。