住院心力衰竭患者GDF-15的改变及相关研究

目的研究住院心力衰竭患者血清生长分化因子15（growth differentiation factor 15,GDF-15）的改变及其相关临床因素,评价其在心力衰竭患者中的临床意义。方法入选住院心力衰竭患者272例,对照组为43例无心力衰竭患者。收集上述患者临床资料,并运用酶联免疫吸附法测定血清生物标志物GDF-15。结果与对照组相比,心力衰竭组GDF-15水平升高（P〈0.05）;射血分数下降组与射血分数保留组心力衰竭患者GDF-15水平差异无显著性（P〉0.05）。根据GDF-15检测值的中位数,将心力衰竭患者分为两组,与GDF-15低水平组相比,GDF-15高水平组年龄更大,合并高尿酸血症、慢性肾功能不全比例更高;N-末端B型利钠肽、D-二聚体、CA125更高,白蛋白、血红蛋白更低（P〈0.05）。纽约心功能分级Ⅲ级和Ⅳ级患者较Ⅱ级患者GDF-15明显升高（P〈0.05）。GDF-15诊断心力衰竭的AUCROC为0.835（95%CI 0.778~0.892）,敏感度为76.2%,特异度为63.1%。结论 GDF-15在心力衰竭患者的血清中显著升高,与心力衰竭的严重程度相关,可用于辅助心力衰竭的诊断。

重症医学科住院医师规范化培训教学模式探讨

随着我国医学水平的发展,青年临床医师想要在医学方面取得更大的进步,进行住院医师规范化培训是必不可少的环节。近年来,住院医师规范化培训取得了可喜成绩,重症医学作为规范化培训的重要组成部分,具有一定的特殊性。本文通过对重症医学科住院医师规范化培训的现有的情况进行分析,并针对教学模式提出了改进方法,期望能够使重症医学科住院医师培训教学的水平得到更好的提升。

利用CRISPR/Cas9技术建立敲除JAK2基因K562细胞系

目的:利用CRISPR/Cas9技术对K562细胞系JAK2基因进行编辑,构建JAK2基因敲除的K562细胞系。方法:使用CRISPR在线设计工具,针对JAK2基因设计sgRNA,构建Cas9-sgRNA共表达质粒。使用第二代慢病毒包装系统包装慢病毒并感染K562细胞,提取细胞基因组DNA,Sanger测序和TA克隆检测基因编辑活性。无限稀释法将编辑阳性的细胞接种于96孔板并扩培得到单克隆细胞株,提取基因组DNA,Sanger测序和TA克隆分析敲除JAK2单克隆细胞的基因型。结果:成功构建靶向敲除JAK2基因的lentiCRISPRv2-sgRNA3-1质粒。优化方案得到低细胞毒性高转染效率的感染K562细胞慢病毒量。CRISPR/Cas9系统成功在JAK2基因sgRNA3-1识别位点发挥基因组编辑活性,获得纯合敲除JAK2基因细胞株K562-JAK2-/-(两个等位分别发生移码突变,预期编码没有功能的JAK2蛋白)。结论:CRIAPR/Cas9系统通过慢病毒感染方式获得JAK2基因纯合敲除的K562细胞株,该细胞模型可用于研究在慢性髓系白血病中JAK2基因的作用,为构建K562敲除其他基因细胞系提供实验依据,为探究造血分化机制的研究奠定实验基础。