番茄红素对玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和黄曲霉毒素B_1联合暴露小鼠回肠损伤的保护作用

本试验旨在探究番茄红素(LYC)对玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)和黄曲霉毒素B1(AFB1)联合暴露小鼠回肠损伤的保护作用及机制。选用80只6周龄无特异病原体(SPF)的ICR雄性小鼠[体重为(31.01±0.29) g],随机分为4组(每组20只),分别为:对照组、LYC组、霉菌毒素组和LYC+霉菌毒素组。将小鼠适应性饲养10 d后,连续灌胃10 mg/kg LYC或等量其溶剂14 d,随后腹腔注射10 mg/kg ZEN+1 mg/kg DON+0.5 mg/kg AFB1或等量溶剂。在处理结束时,小鼠禁食24 h后称重并处死,立即收集回肠样本待测。结果表明:1)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠隐窝深度极显著提高(P<0.01),回肠绒毛高度/隐窝深度值显著降低(P<0.05);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠绒毛高度有提高趋势(P>0.05),回肠隐窝深度有降低趋势(P>0.05)。2)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠封闭蛋白-1(claudin-1)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和闭合蛋白(occludin)的分布减少;与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠claudin-1、ZO-1和occludin的分布增加。3)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠上皮细胞紧密连接模糊化,线粒体膜溶解,嵴断裂,且线粒体肿胀、空泡化严重;与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠上皮细胞紧密连接完整清晰,线粒体出现轻微的肿胀、空泡化。4)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠受体相互作用蛋白3 (RIP3)和混合系列蛋白激酶结构域样蛋白(MLKL)蛋白表达量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠RIP3蛋白表达量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,霉菌毒素组小鼠回肠受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3和MLKL的mRNA表达量极显著提高(P<0.01);与霉菌毒素组相比,LYC+霉菌毒素组回肠RIP1和RIP3的mRNA表达量极显著降低(P<0.01)。综上所述,LYC可通过维持肠道黏膜屏障及线粒体结构的完整性,抑制回肠程序性坏死信号通路,以减轻ZEN、DON和AFB1联合暴露引起的小鼠回肠损伤。

香菇多糖对脂多糖刺激的仔猪空肠细胞死亡信号通路相关基因表达的影响

本试验旨在探讨香菇多糖对脂多糖(LPS)刺激的仔猪空肠细胞死亡信号通路相关基因表达的影响。选取24头健康的28日龄“杜×长×大”断奶仔猪,平均体重为(8.12±0.19)kg,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪。试验采用2×2因子设计,主因子分别为饲粮处理(基础饲粮或基础饲粮中添加0.02%的香菇多糖)和免疫应激处理(注射生理盐水或LPS)。试验第28天,免疫应激组仔猪腹膜注射100μg/kg体重(BW)的LPS或生理盐水。注射LPS或生理盐水4 h后,仔猪麻醉屠宰,取空肠样品待测。试验期为28 d。结果表明:1)LPS刺激导致仔猪空肠绒毛萎缩,肠上皮脱落,肠道形态受损;饲粮添加香菇多糖缓解了LPS刺激所导致的肠道形态结构损伤。2)LPS刺激显著提高了空肠程序性坏死信号通路关键基因受体互作蛋白激酶3(RIP3)mRNA的相对表达量(P<0.05),显著降低了动力相关蛋白1(Drp1)和混合系列蛋白激酶结构域样蛋白(MLKL)mRNA的相对表达量(P<0.05)。饲粮添加香菇多糖显著降低了空肠程序性坏死信号通路关键基因受体互作蛋白激酶1(RIP1)、Fas死亡结构域相关蛋白(FADD)mRNA的相对表达量(P<0.05)。3)LPS刺激显著降低了空肠焦亡信号通路关键基因凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶(Caspase)⁃1、白细胞介素-18(IL⁃18)以及凋亡信号通路关键基因Caspase⁃9、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)mRNA的相对表达量(P<0.05),显著提高了空肠焦亡信号通路关键基因核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)及凋亡信号通路关键基因Caspase⁃8 mRNA的相对表达量(P<0.05)。饲粮添加香菇多糖显著降低了空肠焦亡信号通路关键基因NLRP3 mRNA的相对表达量(P<0.05)及凋亡信号通路关键基因Caspase⁃9和原癌基因蛋白xl(Bcl⁃xl)mRNA的相对表达量(P<0.05)。4)LPS刺激显著降低了空肠自噬信号通路关键基因自噬相关基因12(Atg12)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Unc⁃51样激酶1(ULK1)mRNA的相对表达量(P<0.05)。饲粮添加香菇多糖显著降低了空肠自噬信号通路关键基因Atg12、LC3和ULK1 mRNA的相对表达量(P<0.05)。由此可见,饲粮添加香菇多糖是通过调控程序性坏死、焦亡和自噬信号通路关键基因,从而维持肠道完整性。

玉米赤霉烯酮、呕吐毒素及黄曲霉毒素B1联合作用对小鼠肝脏的影响

试验旨在探讨玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)、黄曲霉毒素B1(AFB1)3种霉菌毒素联合作用对小鼠肝脏的影响。选用48只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为4组,每组12个重复,适应性饲喂10d后,以玉米油作为溶剂进行腹腔注射,分别为溶剂对照组(CON组,腹腔注射等量玉米油)、低剂量霉菌毒素联合作用组(LD组,10 mg/kg bw ZEN+1 mg/kg bw DON+0.5 mg/kg bw AFB1)、中剂量霉菌毒素联合作用组(MD组,20 mg/kg bw ZEN+1.5 mg/kg bw DON+1 mg/kg bw AFB1);高剂量霉菌毒素联合作用组(HD组,30 mg/kg bw ZEN+2 mg/kg bw DON+2 mg/kg bw AFB1)。处理结束24 h后处死小鼠并收集样本。结果表明:与CON组相比,LD组、MD组及HD组的白细胞数量显著降低,LD组的血小板数量显著升高;与CON组相比,LD组、MD组、HD组的血浆谷丙转氨酶(ALT)水平均显著升高,MD组的肝组织碱性磷酸酶(ALP)水平显著升高。LD组、MD组和HD组肝脏组织出现肝细胞肿大和炎性细胞浸润。与CON组相比,LD组IL-6显著性升高;MD、HD组IL-1β、IL-6和TNF-α显著升高。综上所述,霉菌毒素联合作用使肝脏中促炎因子过量表达,造成肝脏组织炎性细胞浸润和肝细胞肿胀,损伤肝脏功能。

玉米赤霉烯酮、呕吐毒素及黄曲霉毒素B1联合染毒对小鼠睾丸的影响

试验旨在探究玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)和黄曲霉毒素B1(AFB1)联合染毒对小鼠睾丸的毒性作用。选用60只8周龄SPF ICR小鼠,适应性饲养10 d后,将体重相近(38.88±0.29)g的48只小鼠随机分为4组,每组12只,低剂量霉菌毒素联合染毒组(LD组)腹腔注射10mg/kgBWZEN+1 mg/kg BW DON+0.5 mg/kg BW AFB1,中剂量霉菌毒素联合染毒组(MD组)腹腔注射20 mg/kg BW ZEN+1.5 mg/kg BW DON+1 mg/kg BW AFB1,高剂量霉菌毒素联合染毒组(HD组)腹腔注射30 mg/kg BW ZEN+2 mg/kg BW DON+2 mg/kg BW AFB1,对照组(CON组)腹腔注射等量玉米油。腹腔注射24 h后处死小鼠,采集附睾精子及睾丸组织样本。结果表明:与CON组相比,LD组(P<0.05)、MD组(P<0.001)、HD组(P<0.001)精子活性均降低;与CON组相比,霉菌毒素联合染毒组睾丸脏器系数均降低(P>0.05);与CON组相比,LD组、MD组中睾丸生精小管上皮细胞出现空泡化,HD组空泡化更加严重;与CON组相比,MD组、HD组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量降低(P>0.05),而MD组、HD组白介素-1β(IL-1β)的mRNA相对表达量均升高(P<0.05,P<0.01),白介素-6(IL-6)的mRNA相对表达量也升高(P<0.01,P<0.05)。由此可见,ZEN、DON和AFB1联合染毒降低了精子活性,导致睾丸生精小管上皮细胞出现空泡化,使炎性细胞因子IL-1β和IL-6过量表达,损伤睾丸功能。