紫草素调控Hippo信号通路抑制鼻咽癌细胞株生物学功能及其机制研究

目的探讨紫草素介导Hippo信号通路对鼻咽癌(NPC)细胞株CNE2生物学功能的影响。方法于2021年1—12月使用含不同浓度紫草素培养液(0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L)培养对数生长期人鼻咽癌细胞(CNE2细胞)48 h,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率;流式细胞术、平板克隆、伤口愈合及Transwell实验分别检测CNE2细胞凋亡、集落形成、迁移及侵袭情况;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测细胞yes相关蛋白1(YAP1)、具有PDZ结合基序的转录共激活子(TAZ)mRNA相对表达情况;蛋白质印迹法检测YAP1、yes相关蛋白1(p-YAP1)、TAZ、磷酸化具有PDZ结合基序的转录共激活子(p-TAZ)、N-钙黏蛋白(N-cad)、波形蛋白(Vim)及E-钙黏蛋白(E-cad)蛋白表达情况。结果与0 mg/L浓度紫草素CNE2细胞存活率(100%)、集落形成数(514.67±25.81)个、划痕愈合率(88.58±3.40)%、侵袭细胞数(233.67±15.01)个、YAP1与TAZ mRNA及蛋白(1.01±0.02、1.00±0.01、0.68±0.04、0.51±0.03)比较,2 mg/L浓度紫草素[(92.70±5.92)%、(452.33±22.72)个、(69.91±3.03)%、(195.33±18.15)个、0.93±0.02、0.91±0.05、0.56±0.03、0.44±0.02],4 mg/L浓度紫草素[(81.75±3.83)%、(308.33±22.12)个、(53.61±3.21)%、(153.33±10.02)个、0.81±0.03、0.76±0.04、0.45±0.03、0.30±0.03],8 mg/L浓度紫草素[(54.93±3.89)%、(173.67±13.65)个、(30.32±1.68)%、(92.67±6.66)个、0.65±0.03、0.54±0.04、0.31±0.03、0.24±0.02],16 mg/L浓度紫草素[(33.89±2.14)%、(85.33±13.05)个、(18.31±1.42)%、(52.33±6.03)个、0.41±0.02、0.30±0.02、0.18±0.02、0.16±0.02]降低(P<0.05),CNE2细胞凋亡率、p-YAP1与p-TAZ及E-cad蛋白相对表达水平均随紫草素作用浓度增大而升高(P<0.05);紫草素作用效果呈剂量依赖性(P<0.05)。结论紫草素可抑制NPC细胞株CNE2细胞恶性生物学功能,其作用机制可能与抑制Hippo信号通路核心下游信号因子YAP1、TAZ蛋白激活,阻止上皮间质转化(EMT)有关。

治疗前中性粒细胞淋巴细胞比值和血小板淋巴细胞比值对结外NK/T细胞淋巴瘤的预后价值

目的:探讨治疗前中性粒细胞淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)和血小板淋巴细胞比值(platelet-lymphocyte ratio,PLR)在结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal natural killer/T-cell lymphoma,ENKTL)患者中的预后价值。方法:回顾性分析我院2012年01月至2016年12月新诊断的ENKTL患者的临床资料。根据受试者工作特征(ROC)曲线确定NLR和PLR的最佳截断值并对患者分组。采用卡方检验或Fisher确切概率法比较不同分组间的临床特征和近期疗效差异。我们使用Cox比例风险模型来确定与生存相关的单因素和多因素。生存曲线采用Kaplan-Meier法绘制,它们的差异采用log-rank检验分析。差异具有统计学意义(P<0.05)。结果:NLR和PLR的最佳截断值分别为2.62和228.8。治疗前NLR和PLR与B症状和EBV DNA拷贝数相关(P<0.05)。不同NLR、PLR分组的近期疗效差异无统计学意义(P>0.05)。单因素和多因素分析显示,NLR(P=0.009)、PLR(P=0.008)和LDH(P=0.019)是ENKTL患者OS的独立危险因素。高NLR或高PLR的患者OS率较低(P<0.001)。结论:治疗前NLR和PLR可作为结外NK/T淋巴瘤患者的独立预后因素,高NLR、高NLR提示患者预后不良。

深吸气屏气在乳腺癌放射治疗中应用的研究进展

放射治疗是乳腺癌综合治疗的重要环节,但其心肺剂量则易导致放射性心脏病等并发症的发生。因此,如何减少心脏剂量、降低放疗并发症成为乳腺癌精准放疗的研究重点。深吸气屏气是一类呼吸控制方法,其应用于放疗可减少心肺等危及器官的受照剂量,以期减少放射性心脏损伤、改善患者远期预后。本文旨在概述乳腺癌放疗引起的心脏毒性及保护方法,深吸气屏气技术的剂量优势及应用,为临床和科研工作提供思路及方向。

保乳手术与乳腺癌改良根治术治疗早期乳腺癌的临床对照研究

目的 探讨保乳手术与乳腺癌改良根治术治疗早期乳腺癌的临床效果。方法 随机将120例早期乳腺癌患者分为对照组(改良根治术)与观察组(保乳手术),每组60例,观察2组的手术相关指标、乳房外观、心理弹性、生活质量和并发症发生情况。结果 观察组手术时间、住院时间较对照组更短,术中出血量、术后引流量较对照组更少(P<0.05)。观察组乳房外观优良率(95.00%)明显高于对照组(68.33%)(P<0.05)。术后观察组的坚韧性、自强性、乐观性评分明显高于对照组(P<0.05);观察组术后生理状况、社会状况、情感状况、功能状况、附件关注和生命质量总分均比对照组高(P<0.05)。并发症发生率比较,观察组(3.33%)明显低于对照组(15.00%)(P<0.05)。观察组与对照组生存率(98.33%vs.93.33%)、复发率(1.67%vs.5.00%)、远处转移率(1.67%vs.3.33%)比较,无统计学差异(P>0.05)。结论 保乳手术与改良根治术在早期乳腺癌治疗中均具有一定价值,但保乳手术安全性较高,患者术后的心理压力更轻,有利于加快患者的术后恢复,提升患者的生活质量。

治疗前纤维蛋白原联合中性粒细胞淋巴细胞比值对鼻咽癌调强放疗患者预后的预测价值

目的:探讨治疗前纤维蛋白原(Fib)与中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)的联合指标(F-NLR评分)在接受调强放射治疗(IMRT)的鼻咽癌(NPC)患者中的预后价值。方法:回顾性分析我院放疗科2016年1月至2018年12月收治的接受IMRT的NPC患者的临床资料。根据受试者工作特征曲线计算Fib及NLR的最佳截断值,并对患者进行分组。采用χ^(2)检验或Fisher确切概率法比较不同分组间临床特征和近期疗效的差异。运用Cox比例风险模型进行单因素和多因素生存分析,探讨影响预后的风险因素。通过Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Log-rank法比较各组生存曲线的差异。P<0.05为差异具有统计学意义。结果:Fib和NLR的最佳截断值分别为3.455 g/L和2.99。不同F-NLR分组的饮酒和T分期存在显著差异。不同Fib、NLR和F-NLR分组的近期疗效存在显著差异。多因素分析显示F-NLR评分、TNM分期和EBV DNA拷贝数是影响NPC患者OS的独立危险因素。不同F-NLR分组的OS和PFS生存曲线两两之间存在显著差异(P<0.001)。结论:治疗前高F-NLR评分是接受IMRT的NPC患者的独立预后不良因素,联合TNM分期和EBV DNA拷贝数可更加准确预测鼻咽癌患者预后。

治疗前淋巴细胞/单核细胞比值、中性粒细胞/淋巴细胞比值对结外NK/T细胞淋巴瘤患者预后的影响

目的:探讨淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)对结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)患者预后的影响。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院2011年1月至2020年1月收治的203例初诊ENKTL患者的临床资料,ROC曲线确定LMR和NLR的界限值;分类变量采用卡方检验进行比较,以频率和百分比(n,%)表示。连续变量表示为中位数和极差,并用Mann-Whitney U检验进行比较;采用Kaplan-Meier曲线分析不同分组的LMR和NLR患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS),并用log-rank检验进行比较;采用COX比例风险回归模型对PFS和OS进行单因素和多因素分析。结果:通过ROC曲线确定LMR、NLR的最佳临界值,分别为2.60和3.40。LMR≤2.60更倾向于发生在有骨髓侵犯(P=0.029)、较高的LDH(P=0.036)的患者中,而NLR≥3.40更易于发生在ECOG评分较高(P=0.002)、LDH较高(P=0.008)、血糖较高(P=0.024)而PLT较低(P=0.010)的患者中。Kaplan-Meier生存分析显示,高LMR组患者的PFS及OS均明显优于低LMR组,相反,低NLR组患者的PFS及OS均明显优于高NLR组。多因素COX分析结果显示,EBV-DNA阳性(P=0.047)、LMR≤2.60(P=0.014)、NLR≥3.40(P=0.023)是影响ENKTL患者PFS的独立危险因素;LMR≤2.60(P<0.001)、NLR≥3.40(P=0.048)、高β_(2)-MG(P=0.013)是影响ENKTL患者OS的独立危险因素。结论:治疗前低LMR和高NLR是ENKTL患者预后差的主要危险因素,可用来作为临床上一种易测、廉价、实用的预后指标。

lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR-519d-3p的靶基因,受其负调控。过表达MMP2可部分逆转沉默TTN-AS1和过表达miR-519d-3p对A549细胞侵袭的抑制作用。结论:肺腺癌组织中lncRNA TTN-AS1呈现高表达情况,它可能通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭能力。

放疗加热疗治疗食管癌的临床有效性与优势

目的探讨放疗加热疗治疗中晚期食管癌的临床有效性和治疗优势,为临床提供参考依据。方法选择郑州大学第一附属医院2014年4月至2015年4月收治的100例中晚期食管癌患者作为研究对象,通过信封抽取的方法平均分成实验组和对照组。实验组采取放疗+热疗,对照组采用单纯放疗。在治疗结束后对比分析两组患者的近期疗效、不良反应,以及1年生存率、复发率。结果实验组的病灶完全消退率和病灶部分消退率为50%和46%,对照组为30%和32%(P<0.05);实验组的1年生存率和复发率为80%和8%,对照组的1年生存率和复发率为58%和18%(P<0.05);实验组的不良反应率(2%)低于对照组(14%)(P<0.05)。结论放疗+热疗治疗食管癌的疗效显著,可有效消除病灶,提高患者近期生存率,且治疗安全性较高。

含门冬酰胺酶联合CHOP治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的疗效比较

目的 比较含门冬酰胺酶联合CHOP治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床疗效.方法 运用随机抽样的方法选取我院2005年1月至2012年9月收治的80例结外NK/T细胞淋巴瘤患者,依据治疗方法分为研究组（n=40）和对照组（n=40）.对照组患者单纯CHOP方案化疗,研究组患者采用门冬酰胺酶联合CHOP方案化疗,对两组患者的近期疗效、2年生存情况及不良反应发生情况进行统计分析.结果 研究组患者治疗总有效率为90.0％（36/40）,显著高于对照组的60.0％（24/40）（P＜0.05）,2年无进展生存率均显著高于对照组（80.0％ vs.45.0％,P＜0.05）,Ⅰ～Ⅱ级过敏性皮疹、低纤维蛋白元血症发生率为25.0％（10/40）、60.0％（24/40）,均显著高于对照组的5.0％（2/40）、5.0％ （2/40） （P＜0.05）.结论 含门冬酰胺酶联合CHOP治疗结外NK/T细胞淋巴瘤的临床疗效显著.

人参皂苷对Luminal型乳腺癌中Fas、FasL表达水平的影响

目的探讨人参皂苷对Luminal型乳腺癌中自杀相关因子(Fas)、Fas配体(FasL)表达水平的影响。方法选取SPF级健康雌性SD大鼠72只,随机分为对照组10只及造模组62只。造模组采用二羟甲基丁酸灌胃建立Luminal型乳腺癌模型,对照组予以等量食用油。将造模成功的大鼠随机分为模型组、人参皂苷低、中、高剂量组及他莫昔芬组,各11只。模型组及对照组给予无菌生理盐水5 mL·kg^-1,qd,灌胃;人参皂苷低、中、高剂量组分别给予0.1 mg·mL^-1、0.2 mg·mL^-1、0.4 mg·mL^-1的人参皂苷溶液5 mL·kg^-1,qd,灌胃;他莫昔芬组予以0.6 mg·mL^-1的他莫昔芬溶液5 mL·kg^-1,qd,灌胃。各组大鼠均给药4周。检测比较各组肿瘤体积和瘤重、抑瘤率,肿瘤组织细胞凋亡指数(AI),血清可溶性Fas(sFas)、可溶性FasL(sFasL)含量,以及肿瘤组织Fas、FasL蛋白表达水平。结果与模型组比较,各组大鼠抑瘤率、肿瘤组织AI、血清sFas含量及肿瘤组织Fas蛋白表达水平较高,较高且人参皂苷低剂量组<人参皂苷中剂量组<人参皂苷高剂量组和他莫昔芬组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,各组大鼠肿瘤体积和瘤重、血清sFasL含量、肿瘤组织FasL蛋白表达水平较低,且人参皂苷低剂量组>人参皂苷中剂量组>人参皂苷高剂量组和他莫昔芬组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人参皂苷能有效抑制Luminal型乳腺癌大鼠肿瘤生长,加速肿瘤细胞凋亡,且药物剂量越高作用效果越好,其作用可能与上调Fas蛋白表达、下调FasL蛋白表达有关。

1例肺原发性结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床分析

根据WHO的分类,NK/T细胞淋巴瘤分为两类:结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal nasal typel NK/T-cell lymphoma,ENKTCL)和侵袭性NK细胞白血病。ENKTCL是血液系统中具有高度恶性的肿瘤,仅占非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinlymphoma,NHL)的0.5%[1],其发病常与慢性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)持续感染相关联[2]。

口腔癌放疗患者心理韧性及影响因素分析

目的探讨口腔癌放疗患者心理韧性状况及影响因素,为临床防治提供依据。方法对100例口腔癌放疗患者采用心理弹性量表评定心理韧性,并进行单因素分析及多因素Logistic回归分析探讨其影响因素。结果本组82.0%的患者心理韧性良好,18.0%的患者心理韧性较差;患者心理弹性量表的坚韧性维度分为(35.23±2.61)分,力量性维度分为(18.34±1.69)分,乐观性维度分为(5.99±2.19)分。Logistic回归分析显示,年龄≥60岁、女性、家庭月收入≤5000元、口腔癌知识了解程度较差、主要照顾者为子女、无医疗保险、家庭功能较差、放疗时间>3个周期为口腔癌放疗患者心理韧性较差的危险因素(P<0.01)。结论部分口腔癌放疗患者心理韧性较差,其影响因素众多,应对其予以有针对性的干预提高心理韧性水平。

鼻前颅底NUT中线癌1例

患者女性,59岁。2018年8月因右眼肿胀8天就诊于郑州大学第一附属医院。MRI示:双侧筛窦、蝶窦、前颅底占位,大小约23 mm×29 mm×13 mm(图1)。2018年9月行鼻内镜下颅底肿物切除,免疫组织化学示:NUT(+),见图2。病理诊断为NUT中线癌(NUT midline carcinoma,NMC)。患者术后出现恶心呕吐、头痛,双眼视力下降至失明,术后1.5个月复查MRI示:肿瘤大小约35 mm×45 mm×42 mm(图3)。

热疗联合放疗对鼻咽癌病人Th1/Th2平衡及口腔黏膜反应的影响

目的:探讨热疗联合放疗治疗鼻咽癌的效果。方法:选取2018-03~2020-03我院收治的160例鼻咽癌病人,通过随机数字表法分为放疗组(n=80)与联合组(n=80)。放疗组采用放疗,联合组采用放疗联合热疗。对比两组治疗效果、治疗前后外周血Th1、Th2细胞占CD3+T细胞比例变化及口腔黏膜反应。结果:联合组总有效率82.50%(66/80)高于放疗组67.50%(54/80,P<0.05);治疗后联合组Th1细胞、Th1/Th2水平高于放疗组,Th2细胞水平低于放疗组(P<0.05);两组口腔黏膜反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:鼻咽癌病人采用热疗联合放疗治疗效果显著,能改善Th1/Th2平衡,缓解口腔黏膜反应。

放化疗联合程序性死亡受体1抗体治疗中晚期NK/T细胞淋巴瘤的疗效分析

目的对比分析放化疗联合程序性死亡受体1(PD-1)抗体治疗中晚期NK/T细胞淋巴瘤的疗效及对预后的影响。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月经郑州大学第一附属医院诊治的53例Ⅲ~Ⅳ期NK/T细胞淋巴瘤患者的资料,其中19例接受放化疗联合PD-1抗体治疗者为观察组,34例接受放化疗治疗者为对照组,评价治疗疗效,并统计治疗期间不良反应的发生情况。结果观察组完全缓解(CR)率(52.63%)、总生存率(1、2 a OS率分别为84.73%、37.90%)较对照组(17.65%、70.02%、34.46%)均有所提高(P均<0.05)。2组不良反应发生率比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论放化疗联合PD-1抗体治疗中晚期NK/T淋巴瘤疗能提高CR率和总生存率,且不增加不良反应。

程序性死亡受体1抑制剂治疗远处转移鼻咽癌疗效观察

目的探讨程序性死亡受体1(PD-1)抑制剂治疗远处转移鼻咽癌患者的疗效。方法收集2019年06月到2020年11月在郑州大学第一附属医院应用PD-1抑制剂的7例远处转移鼻咽癌患者的临床资料,根据用药前后病灶变化、疾病转归情况以及相关不良反应进行描述,得到应用药物后客观缓解率及疾病控制率等数据。结果7例患者中,3例达到部分缓解,3例病情稳定,1例病情进展。客观缓解率为42.9%,疾病控制率为85.7%。结论PD-1抑制剂治疗远处转移鼻咽癌效果明显,可进一步在临床上推广应用。

鼻咽癌放化疗联合靶向治疗的临床效果观察

本文旨在探索两种鼻咽癌疗。方法 放化疗与放化疗+靶向疗的临床效果。方法 50名病人作为研究对象进行随机分组,一组接受放化疗,一组接受连接疗法。结果 实际效果与此开始时预期无太大出入,然而综合疗法在治愈指数上展现出了明显领先(187.29±25.67比对210.64±30.58,数值上相差显著,P=0.0080)。放之效果与靶疗结合后,有效率也有了显眼提高(分析组的有力回应:68.00%比36.00%,此差异不能忽视,P=0.0280)。照射与化疗合并有针对性的治疗,不仅大幅提升了病患自身的生活素质——从精神状态、身体健康、感情体验、社会角色以至于人际交往等各方面去看(P=0.0080),而且能有效控制病情的扩散或复发(P分别为0.0080和0.0180)。结论 对鼻咽癌运用的照射与化疗并配有靶向治疗的方法极具实效,将巨大改善患者的生活品质,也有效加强对抗疾病的能力。对于临床来说,这便是高度推崇的一种治疗鼻咽癌的方案。

解郁丸同步放疗对高级别脑胶质瘤术后化疗患者生命质量影响的临床探究

本次研究的目的在于探索放疗联合解郁丸治疗高级别脑胶质瘤术后化疗患者的安全性及疗效。方法 本次研究共计收集2019年10月至2022年3月共82例高级别脑胶质瘤术后化疗或拟化疗患者。收集患者资料及治疗情况病例记录,后期随访分为放疗组、解郁丸联合放疗组、对照组(即单独手术并化疗组)高级别脑胶质瘤患者手术治疗后不良反应的发生比率及有效率。结果:联合解郁丸联合治疗组的近期及6个月的有效率、生存质量改善情况优于单用放疗组和手术化疗组(P<0.05),放疗组和联合治疗组未见不良反应增加,与对照组比较不良反应、肝损害、肾损害比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 解郁丸同步放疗可以提高术后脑胶质瘤患者的生命质量,不良反应轻。解郁丸联合放疗的方案在术后脑胶质瘤患者中具有相应的疗效及安全性。

沉默lncRNA HCP5上调miR-508-3p表达增加胶质瘤细胞的辐射敏感性

目的探讨长链非编码(lnc)RNA HCP5对胶质瘤细胞的辐射敏感性的影响及其机制。方法分别用0、2、4、6、8 Gy射线照射胶质瘤细胞U251和U87,作为不同剂量辐射组;将si-con、si-HCP5、pcDNA、pcDNA-HCP5转染至细胞U251和U87中,分别记为si-con组、si-HCP5组、pcDNA组、pcDNA-HCP5组;将si-con、si-HCP5转染至细胞U251和U87后再用4 Gy射线照射,分别记为IR+si-con组、IR+si-HCP5组,仅用4 Gy射线照射的细胞记为IR组;将si-HCP5分别与anti-miR-con、anti-miR-508-3p共转染至细胞U251和U87后再用4 Gy射线照射,分别记为IR+si-HCP5+anti-miR-con组、IR+si-HCP5+anti-miR-508-3p组,转染均用脂质体法。采用RT-qPCR检测miR-508-3p和HCP5的表达;细胞克隆形成实验检测胶质瘤细胞的放射敏感性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测磷酸化H2AX(γ-H2AX)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果放射处理的胶质瘤细胞HCP5高表达,miR-508-3p低表达;沉默HCP5后细胞U251和U87放射敏感性增强,细胞凋亡率升高[U251:(16.67±1.68)%,(3.58±0.62)%,t=21.929,P<0.05;U251:(12.32±1.08)%,(4.48±0.71)%,t=18.198,P<0.05],γ-H2AX[U251:(0.45±0.04),(0.23±0.05),t=10.307,P<0.05;U87:(0.38±0.04),(0.24±0.03),t=8.400,P<0.05]、Cleaved caspase-3[U251:(0.37±0.04),(0.16±0.03),t=12.600,P<0.05;U87:(0.38±0.04),(0.22±0.03),t=9.600,P<0.05]表达水平升高。相比单独沉默HCP5或辐射处理,沉默HCP5同时辐射处理U251细胞,细胞凋亡率[(25.34±1.54)%,(16.67±1.68)%,t=11.413,P<0.05;(25.34±1.54),(11.13±1.06),t=22.802,P<0.05]显著升高,γ-H2AX[(0.69±0.05),(0.45±0.04),t=11.245,P<0.05;(0.69±0.05),(0.31±0.04),t=17.804,P<0.05]、Cleaved caspase-3[(0.52±0.06),(0.37±0.04),t=6.240,P<0.05;(0.52±0.06),(0.34±0.04),t=7.488,P<0.05]表达水平升高。辐射处理后且沉默HCP5后U251和U87细胞中p-PI3K[(0.21±0.02),(0.52±0.04),t=20.795,P<0.05;(0.26±0.23),(0.67±0.07),t=5.116,P<0.05]、p-AKT[(0.22±0.03),(0.66±0.07),t=17.332,P<0.05;(0.23±0.04),(0.71±0.03),t=28.800,P<0.05]表达水平降低。HCP5可靶向调节miR-508-3p表达;干扰miR-508-3p逆转了沉默HCP5和辐射对U251和U87细胞放射的增敏和促进细胞凋亡的作用,降低了γ-H2AX、Cleaved caspase-3表达水平,提高了p-PI3K、p-AKT表达水平。结论沉默lncRNA HCP5可增强胶质瘤细胞的辐射敏感性,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-508-3p及PI3K/Akt信号通路有关,可为胶质瘤治疗提供新靶点和新思路。

沉默lncRNA GIHCG通过上调miR-146a-3p增加胶质瘤细胞放射敏感性

目的探讨lncRNA GIHCG对胶质瘤细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法qRT-PCR实验检测人脑正常胶质细胞HEB和胶质瘤细胞系U251、A172、SHG139、U87中GIHCG和miR-146a-3p表达水平。以U251和SHG139细胞为研究对象,沉默GIHCG表达或过表达miR-146a-3p后,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞放射敏感性,蛋白印迹法检测CDK1、CyclinD1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。生物信息学软件预测GIHCG与miR-146a-3p存在结合位点,双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR实验验证GIHCG与miR-146a-3p的靶向关系。结果与HEB细胞比较,胶质瘤U87、U251、A172和SHG139细胞中GIHCG表达升高(P<0.05),miR-146a-3p表达降低(P<0.05)。沉默GIHCG表达或过表达miR-146a-3p,U251和SHG139细胞存活率、存活分数、CDK1、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白表达升高(P<0.05)。GIHCG在U251和SHG139细胞中靶向负调控miR-146a-3p表达,抑制miR-146a-3p表达逆转了沉默GIHCG对胶质瘤细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。结论沉默GIHCG表达可促进miR-146a-3p表达,从而增强胶质瘤细胞的放射敏感性。