中枢及外周M胆碱受体在溃疡性结肠炎中对胆碱能抗炎通路的影响

目的:从组织与器官水平探讨中枢及外周的M胆碱受体的激动剂与抑制剂引发的迷走神经传出的增加和减少,对胆碱能抗炎通路在溃疡性结肠炎抗炎作用的影响。方法:通过直肠插管灌注乙酸造成大鼠溃疡性结肠炎模型,分别从侧脑室微注射和腹腔注射毛果芸香碱、阿托品,观察其通过胆碱能抗炎通路对疾病活动指数(DAI)、组织学损伤(HI)、组织病理改变的影响。结果:脑室注射毛果芸香碱组大鼠DAI明显减小、结肠HI明显减轻(与模型组比P<0.05),病理观察可见结肠黏膜完好,炎症细胞浸润明显较模型组少;脑室注射阿托品组大鼠各指标则有加重的趋势,其它各组与模型组比较则无明显差异。结论:提示侧脑室注射M受体激动剂毛果芸香碱具有显著的治疗溃疡性结肠炎的作用,而侧脑室注射阿托品则具有一定促进炎症发展的作用,而对于外周给予M受体的激动剂和抑制剂均未表现出对外周组织炎症减轻或加重的明显影响。

通心活脉灵对大鼠实验性心肌缺血的保护作用

目的观察通心活脉灵(TXHML)抗心肌缺血的药理学作用。方法通过大鼠冠脉结扎致心肌缺血模型,观察通心活脉灵对大鼠心电图、心肌酶及梗死面积的影响。结果受试药物通心活脉灵能显著降低急性心肌缺血大鼠心电图缺血范围和缺血程度,明显降低血清乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)等酶的活性,明显减小心肌缺血梗死范围和梗死程度。结论通心活脉灵对大鼠心肌缺血有明显的保护作用。

四种制取铸造桩核的方法临床对比观察

目的 探讨四种方法制取铸造桩核的临床效果。方法 对 4 2 7颗经完善根管治疗的患牙 ,其中 98颗、118颗、10 1颗、110颗依次分别用自凝树脂、嵌体蜡、红色打样膏、琼脂印模材制取桩核 ,并随访观察 1～ 3年。结果 4 10颗桩核固位良好 ,边缘密合 ,未发生继发龋及牙周组织病变。自凝树脂、嵌体蜡、红色打样膏、琼脂印模材制取桩核的成功率分别为 93 87%、94 91%、95 0 5 %、94 5 4 %。四组的临床效果无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 四种方法都能取得良好的疗效 ,但临床必须注意各种方法的适应证选择。

参茯白术木糖汤对小鼠肠道菌群功能影响的研究

本实验研究参茯白术木糖汤对小鼠肠道菌群的影响。实验小鼠灌胃不同剂量的参茯白术木糖汤，观察双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌、拟杆菌和枯草芽孢杆菌等7种肠道菌群的变化。结果表明，参茯白术木糖汤具有调节小鼠肠道菌群及促进双歧杆菌增殖功能。

四逆汤对阿霉素性心衰大鼠心肌线粒体功能的影响

目的探讨四逆汤对阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体的保护机制。方法SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75g生药/kg/d),3周后测定大鼠心功能,线粒体丙二醛(MDA)含量,MnSOD活性,肿胀程度及Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活力,RTPCR法检测MnSODmRNA表达。结果四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,提高MnSOD的活性及其mRNA表达,减少心肌细胞线粒体MDA的含量及肿胀程度,提高ATP酶活力。结论阿霉素性心力衰竭心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以通过减轻氧化损伤,改善线粒体功能,保护心肌组织。

四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤作用

目的 考察四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤的作用。方法 实验动物随机分为正常组、模型组、四逆汤组、四逆汤有效部位组。大鼠心脏进行Langendorff灌流，通过控制灌流液流量建立心肌缺血-再灌注损伤模型，用药组在灌流液中加入相应药液，测定再灌注后50rain的冠脉流量、心肌收缩力和再灌注1min内心律失常发生率。小鼠ig给药3d后ip垂体后叶素（20U／kg）造模，记录0～8min的心电图，并取心肌测SOD活性、MDA及LA水平。结果 四逆汤和四逆汤有效部位均可不同程度地提高大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌收缩力恢复率、降低再灌注1min心律失常发生率，四逆汤有效部位对心肌收缩力的恢复作用较好，四逆汤对心律失常发生的抑制较好；四逆汤和四逆汤有效部位均可明显地降低小鼠心肌缺血-再灌注损伤过程中的心电图J点抬高，明显提高心肌组织SOD活性，降低MDA和LA水平，四逆汤和四逆汤有效部位作用无明显差异。结论 四逆汤有效部位可以显著地改善心肌缺血-再灌注损伤过程中的氧化损伤和抑制无氧酵解，改善心肌收缩功能和心律失常。

应用基因表达谱芯片观察小鼠心肌缺血后基因表达的变化以及四逆汤对其影响

目的 :应用基因表达谱芯片观察小鼠心肌缺血后基因表达的变化以及四逆汤对其影响。方法 :昆明种小鼠 ,随机分为对照组、缺血组、缺血加四逆汤组。提取各组心肌组织总RNA ,纯化mRNA ,与含有 2 30 4条小鼠基因的cDNA表达谱芯片进行杂交。结果 :小鼠缺血后有 33条基因表达下调 ,70条基因表达上调 ;服用四逆汤后 ,相对单纯缺血组而言 ,有 2 3条基因表达下调 ,52条基因表达上调。结论 :运用基因芯片技术能快速地检测出缺血心肌及四逆汤治疗后心肌基因表达谱的改变 ,对差异表达基因的研究将有助于进一步了解心肌缺血及四逆汤治疗的分子机制。

复方血栓通胶囊对实验性犬缺血心肌的保护作用

目的 复方血栓通胶囊的功效为活血化淤、益气养阴，既往多用于眼科疾患，但临床也有扩大运用于心血管系统疾病的报道。为了证实其药理作用，我们观察了该药对实验性犬缺血心肌的保护作用。方法 采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型。全程检测血压，实验结束时取左室缺血区心肌检测超氧物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、糖原、乳酸、乳酸脱氢酶(LDH) 等生化指标。结果 复方血栓通高、低剂量组血压和SOD活性均显著高于缺血组，与对照组和地奥组比较无显著差异，其MDA、LDH含量均显著低于缺血组，与对照组和地奥组比较无显著差异。结论 复方血栓通胶囊对实验性犬缺血心肌具有保护作用。

热休克反应对缺血-再灌心肌保护作用的机制探讨

目的：探讨热休克反应对大鼠缺血-再灌心肌保护作用的可能机制。方法：SD大鼠，随机分为对照组及热休克组，动物经热休克处理恢复2或24h后复制缺血再灌模型并进行各项检测。结果：①热休克处理后心肌组织内SOD活性显著高于对照组，MDA含量则显著低于对照组。②热休克组心肌组织内乳酸及ATP含量均显著高于对照组，糖原含量则显著低于对照组。③热休克反应能诱导HSP70i的转录。结论：热休克反应对缺血-再灌心肌的保护作用与心肌能量代谢的改善、抗氧化能力的增强以及HSP70i的转录合成增强有关。

四逆汤抗阿霉素性心力衰竭的超氧化物歧化酶机制探讨

目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)在阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭中的作用以及四逆汤的可能的保护机制。方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(含生药3.75 g·kg-1·d-1),实验结束时测定各组大鼠心功能,留取心肌组织并提取心肌细胞线粒体,以TBA法测定丙二醛(MDA)含量,邻苯三酚法测定SOD活性,RT-PCR法检测铜-锌SOD和锰SOD mRNA表达情况。结果:与对照组相比,心衰组大鼠心脏左室内压及左室内压变化速率明显降低,左室舒张末期压力明显增高,心肌组织铜.锌SOD和锰SOD活性及其mRNA表达明显降低,心肌组织和心肌细胞线粒体MDA含量明显增多;而四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,并提高铜-锌SOD和锰SOD的活性,增加其mRNA表达,并明显减少心肌组织和心肌细胞线粒体MDA的含量。结论:阿霉素性心力衰竭中心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以改善心功能,减轻此氧化应激反应,其机制可能与提高SOD活性密切相关。

四逆汤有效部位抗心肌缺血/再灌注损伤神经酰胺机制的研究

目的:探讨四逆汤有效部位对心肌缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡及神经酰胺含量的影响。方法:昆明种小鼠,随机分为对照组,模型组,四逆汤有效部位组,用垂体后叶素造模,取小鼠心肌测定SOD活性及MDA含量,通过DNALadder和Dap i荧光染色考察心肌细胞凋亡情况,通过高效薄层层析及薄层层析扫描,用随引标准曲线计算心肌组织中神经酰胺的含量。结果:模型组心肌细胞有凋亡特有的DNA ladder,凋亡指数和神经酰胺含量及MDA含量均比正常组显著升高(P<0.01),SOD活性比正常组显著降低(P<0.01);与模型组相比,四逆汤有效部位组的凋亡指数和神经酰胺含量均显著降低(P<0.01),SOD活性比模型组显著升高(P<0.01);模型组神经酰胺含量与凋亡指数和MDA含量均呈明显正相关(r=0.970,P<0.01;r=0.974,P<0.001)。结论:四逆汤有效部位可在一定程度上降低心肌缺血再灌注时增高的心肌神经酰胺的含量,减少心肌细胞凋亡,从而达到保护心肌的作用。

多重耐药铜绿假单胞菌同源性分析及Ⅰ型整合子研究

目的研究临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌的同源性,分析整合子在多重耐药铜绿假单胞菌中的分布情况及所携带耐药基因盒的信息。方法收集广东省3家三甲医院临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌,采用ERIC-PCR法分析菌株的同源性;PCR扩增整合子及其可变区并测序分析。结果 80株多重耐药铜绿假单胞菌分为19个型别,主要的型别为S型(n=24)、P型(n=18)和R型(n=6);I类整合子的检出率为43.75%(35/80),所检出的整合子可变区有8种类型,分别为aac A4、aad A4a、aac(6')-IIaad A13-cml A8-oxa-10a、aad B-PSE-1、aad B-cml A1、aac A4-aad A2、aad A6-orf D和aac A4-cat B8-aad A1。结论某医院存在两个克隆群的多重耐药铜绿假单胞菌的院内传播和扩散。I类整合子是介导铜绿假单胞菌多重耐药性的因素之一。

四逆汤对缺血心肌谷胱甘肽S转移酶基因表达的影响

目的 :探讨四逆汤对缺血心肌谷胱甘肽S转移酶 (GST)基因表达的影响。方法 :昆明种小鼠 ,随机分为对照组、缺血组、缺血加四逆汤组。提取各组心肌组织总RNA通过RT -PCR ,以 β -actin为内参照对GST基因的表达水平进行检测。结果 :缺血加四逆汤组GST基因表达显著强于对照组及缺血组。结论 :四逆汤能诱导GST基因的表达 ,GST能催化谷胱甘肽与亲电子物质发生结合反应。

浅谈康复治疗专业实验室的建设与管理

康复治疗学是一门培养适应医院康复治疗的应用型专门技术人才的学科,实验教学对专业技能的培养具有重要的意义。在康复治疗专业的建设和发展中,不仅要建立实现教学目标的专业实验室,而且要对实验室进行现代化、规范化的科学管理,持续加强实验室的硬件设施和内涵建设,提高实验教学质量和水平;同时要加大实验室开放的力度,有效提高专业实验室利用率,提升学生自主创新精神,实现培养符合国内专业人才需求标准的、高素质的康复治疗高级专门技术人才。

丹参酮脂质体的稳定性及包封率研究

目的 :研究丹参酮脂质体的稳定性及包封率。方法 :以卵磷脂、胆固醇、丹参酮等为原料用薄膜 超声法制成丹参酮脂质体 ,在电镜下观察丹参酮脂质体的形态和粒径 ,用高效液相色谱法测定其包封率。结果 :保存于2 5℃、4℃的脂质体混悬液经过 2 4h后发生分层 ,沉淀 ;保存于 - 18℃、- 80℃者电镜下可观察到呈圆球型的脂质体 ;冷冻干燥者脂质体基本破坏。贮存 8个月的丹参酮脂质体包封率高于贮存 9个月者。结果 :不同贮存条件丹参酮脂质体形态差异较大 ,以 - 18℃、- 80℃低温保存者形态较稳定 ;丹参酮脂质体包封率随贮存时间延长而下降。

四逆汤对局部脑缺血大鼠的保护作用及其神经酰胺机制

目的 :研究四逆汤对大鼠局部脑缺血后脑组织神经酰胺含量的影响。方法 :采用大鼠大脑中动脉局部阻塞模型 (MCAO) ,观察四逆汤对脑缺血大鼠丙二醛 (MDA)和神经酰胺含量、以及超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果 :与正常组比较 ,缺血模型组MDA含量和脑组织神经酰胺含量均显著升高 ;与缺血模型组比较 ,四逆汤组能提高SOD的活性 ,减少MDA的产生 (P <0 0 5 ) ,降低神经酰胺含量 (P <0 0 0 1)。结论 :四逆汤能对局部脑缺血大鼠产生保护作用 ,其可能机制是减轻氧化损伤 。

四逆汤对实验性小鼠心肌I/R时心肌组织HO-1-CO体系的影响

目的从血红素氧合酶-1-CO系统的角度探讨中药复方四逆汤抗心肌缺血再灌注损伤(IRI)的机制。方法48只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注模型组、四逆汤处理组,垂体后叶素联合硝酸甘油复制心肌缺血再灌注模型,采用双波长分光光度法间接测定血浆及心肌组织一氧化碳(CO)浓度、Western blot分析心肌组织血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达。结果IR模型组血浆和心肌组织CO浓度明显高于对照组,而四逆汤处理组较模型组又明显增加。Western blot显示模型组、四逆汤组在造模30min后,出现少量HO-1蛋白表达,2～4h达到高峰,至24h仍有少量表达;图像扫描灰度值比较,四逆汤组HO-1蛋白相对表达量在不同的时间点位均高于模型组,约为模型组的1～2.5倍。结论四逆汤能增加HO-1蛋白的表达,促进血红素分解,升高内源性CO浓度,调节血红素氧合酶-1-CO系统,发挥全面的细胞保护作用可能是四逆汤抗心肌IRI的重要机制之一。

MHC基因反义RNA导入造血干/祖细胞的研究

目的：将ＨＬＡＤＲＢ１基因ｃＤＮＡ片段反向插入逆转录病毒质粒ＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）ＢａｍＨＩ位点中，构建了ＨＬＡＤＲＢ１基因的逆转录病毒反义ＲＮＡ重组表达载体，用脂质体法导入ＰＡ３１７细胞。方法：用免疫磁珠法分离，富集ＣＤ３４＋脐血造血干／祖细胞。含编码人ＨＬＡＤＲＢ１基因的ｐｃＤＶ１质粒，用ＢａｍＨＩ酶解，回收ＨＬＡＤＲＢ１ｃＤＮＡ片段，将ｃＤＮＡ片段反向插入ｐＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）逆转录病毒载体，经扩增、抽提、酶切鉴定，用脂质体将反义ＲＮＡ重组体导入到ＰＡ３１７细胞，用含Ｇ４１８３００μｇ／ｍｌ培养液筛选，获抗性克隆，流式细胞仪检测ＨＬＡＤＲ抗原阳性细胞数。结果：重组质粒转染ＰＡ３１７细胞后，其病毒滴度达１×１０５ＣＦＵ／ｍｌ，脐血造血干／祖细胞经免疫磁珠富集后，ＣＤ３４＋细胞高达８５．０％～９０．０％，导入反义ＲＮＡ的脐血干细胞，其ＨＬＡＤＲ抗原表达从导入前的４５．０％降至２８．０％，抑制率达３８２％，而导入空载体后从５６．０％降至４５．０％，差异不显著。结论：ＨＬＡＤＲ的反义ＲＮＡ能导入脐血干细胞。

小鼠血管内皮损伤/再生伴内膜增生模型的建立

目的:探讨如何建立稳定的小鼠血管内皮损伤/再生及内膜增生模型。方法:用改良的空气干燥法造成小鼠颈总动脉内皮剥脱损伤模型。术后活体灌注Evans蓝染料以评估受损内皮再生情况,并取受损部分动脉作纵向切片,行CD31内皮细胞标志抗原检测。术后4周常规组织学检测内膜增生肥厚情况。结果:内皮损伤术后内皮完全剥脱,Evans蓝染色完全,未见CD31抗原表达,随着术后时间延长,Evans蓝染色部分从损伤边缘开始,逐渐向中心区缩小,CD31抗原表达逐渐增多。术后7 d仍可见部分损伤血管未再内皮化。术后4周可见明显新生内膜增生。结论:用改良的空气干燥法可以建立稳定的小鼠动脉内皮损伤/再生模型,并且伴有明显的新生内膜增生。