CCNE1、RIP2基因多态性与膀胱癌发病风险的关系

目的 细胞周期蛋白E1（CCNE1）基因和受体相互作用蛋白2（RIP2）基因区域分别存在多态性位点rs8102137和rs42490,探讨这2种多态性与膀胱癌的发病风险及膀胱癌的病理分级和分期之间的关系。方法 收集膀胱癌患者（膀胱癌组）176例及非肿瘤体检患者（对照组）210例血样本并提取DNA,聚合酶链反应（PCR）测序方法检测CCNE1（rs8102137）和RIP2（rs42490）的多态性。根据术后病理结果确定膀胱癌患者的分级及分期。分析膀胱癌组和对照组中等位基因和基因型的分布差异。对2组间基因型的分布情况进行比较,分析CCNE1（rs8102137）和RIP2（rs42490）各基因型与膀胱癌患者的临床资料间的关系,及与膀胱癌遗传易感性的关系。结果 对照组样本的基因型分布具有良好的群体代表性。CCNE1（rs8102137）突变型（C/T＋C/C）在膀胱癌组中频率（40.91%）高于对照组（30.95%,OR=1.54,95%CI：1.02~2.45,P〈0.05）。RIP2（rs42490）突变型（A/G＋G/G）在膀胱癌组频率（72.73%）高于对照组（62.38%,OR=1.61,95%CI：1.04~2.48,P〈0.05）。不同膀胱癌病理分级、分期患者的CCNE1（rs8102137）和RIP2（rs42490）基因多态性差异无统计学意义。结论 CCNE1（rs8102137）、RIP2（rs42490）基因型与膀胱癌易感性关系密切,携带突变型等位基因的个体患膀胱癌的风险显著高于野生型个体。

成人肾母细胞瘤的诊断及治疗(附8例报告)

目的探讨成人肾母细胞瘤的诊断和治疗方法。方法对8例成人肾母细胞瘤患者的临床表现、分期、治疗及预后作回顾性分析。结果本组表现为单纯肉眼血尿1例、腰腹痛5例(伴血尿1例)、无症状2例,术前拟诊肾肿瘤5例、肾盂肿瘤2例、输尿管肿瘤2例。均于术后病理检查确诊为肾母细胞瘤。按照美国国家肾母细胞瘤研究组(NWTS)分期标准,本组8例分别为Ⅰ期2例、Ⅱ期2例、Ⅲ期3例、Ⅳ期1例。8例均行手术治疗,术后辅以放疗和化疗。7例随访1～15a,3例存活。结论成人肾母细胞瘤是一种比较少见的恶性肿瘤,术前确诊困难。手术治疗、辅以放疗和化疗等可明显提高治愈率并改善其预后。

输尿管口囊肿微创治疗及文献复习(附31例报告)

目的总结经输尿管口囊肿腔内手术治疗的经验。方法31例患者术前由B超、静脉尿路造影(IVU)或膀胧镜确诊,均行经尿道输尿管口囊肿内切开或开窗术。结果31例手术1次成功,临床症状消失或改善,结石排出,肾脏积水减轻。25例术后随访半年～2年,未见输尿管口囊肿复发,无输尿管口狭窄,无尿液反流。结论经尿道输尿管口囊肿的腔内手术疗效显著,减少了手术创伤及术后并发症,缩短了手术及住院时间,值得推荐。

E2F3和AR在前列腺癌组织中的表达及意义

目的:检测E2F3、AR在前列腺组织中的表达水平,分析两者的表达与前列腺癌病理分级和临床分期的关系。方法:利用免疫组织化学方法检测50例前列腺癌组织、50例良性前列腺增生组织中E2F3、AR蛋白的表达;采用SPSS13.0进行统计学处理。结果:E2F3在良性前列腺增生组织、前列腺癌组织中的阳性表达率分别为20.00%(10/50)及66.00%(33/50),差异有统计学意义(P<0.05),且在前列腺癌组织中的表达与肿瘤临床分期和病理恶性程度呈正相关(rs分别为0.471和0.329,P<0.05)。前列腺癌组织中AR表达水平低于良性前列腺增生组织(P<0.05),且在前列腺癌组织中的表达与肿瘤临床分期和病理恶性程度呈负相关(rs分别为-0.403和-0.391,均P<0.01)。E2F3在前列腺癌组织中的表达与AR在前列腺癌组织中的表达无相关关系(rs=-0.017,P>0.05)。结论:E2F3在前列腺癌的发生、发展中起着重要作用。

4例原发性精囊腺癌临床病理特征并文献复习

目的:探讨原发性精囊腺癌的病理学特点和诊疗方法。方法:分析4例原发性精囊腺癌的临床资料和病理学特征,并行全面文献复习。结果:4例患者均行开放性前列腺根治性切除术,病理确诊为原发性精囊腺癌:1例术前行前列腺穿刺活检阴性,行开放前列腺癌根治术后确诊为精囊腺癌:1例术前经CT及经直肠超声可见盆腔巨大囊性多分隔肿物,术中冰冻病理诊断为精囊腺癌,转行开放性前列腺根治术。2例术前血清PSA水平数值分别为20.15、40.75μg/ml,余2例水平正常,4例术后血清PSA水平均正常。4例患者免疫组化结果提示PSA、PAP和CK20均阴性,而CA125和CK7阳性。4例术后恢复良好,分别随访154、41、20、12个月,未见复发转移。结论:原发性精囊腺癌极其罕见,临床发现较晚。免疫组化对鉴别诊断价值很大。目前提倡多种方法诸如根治手术、放疗、雄激素剥夺疗法和化疗的综合治疗。

E2F3基因腺相关病毒干扰载体的构建

目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表达沉默E2F3基因的RNA干扰穿梭质粒。通过Bgl Ⅱ及Mlu单酶切,BamH1和HandⅢ双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建是否成功。结果:pAAV-siE2F3线性化后,片段大小约6 300bp;以Mlu为两边酶切位点设计的引物对重组质粒进行PCR,可获得的产物大小1 700bp;应用ITR专用引物进行重组质粒的PCR后证实本研究所构建的重组质粒ITR片段存在,大小约3 500bp,上述指标均与预期设计结果相符。基因测序结果表明插入序列无基因突变,序列完整。结论:穿梭质粒载体的成功构建,为进一步包装能够表达针对E2F3基因干扰序列的腺相关病毒,进一步研究E2F3基因在肿瘤中的功能奠定基础。

E2F3及C-myc在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其相关性研究

目的:探讨E2F3及C-myc在膀胱癌组织中表达的相互关系及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3及C-myc蛋白的表达情况,应用免疫组化自动分析系统进行分析,结果以积分光密度表示。结果:膀胱移行细胞癌组织中E2F3及C-myc蛋白的表达阳性率明显高于正常膀胱黏膜,两组间有显著性差异(P<0.05),同时E2F3的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关(P<0.05;P<0.01);C-mvc的表达率与膀胱癌的分级和分期密切相关(P<0.01;P<0.01)。膀胱移行细胞癌中E2F3与C-myc的表达呈正相关。结论:E2F3及C-myc与膀胱癌的恶性程度密切相关,同时二者之间的表达密切相关,二者不仅可以作为膀胱癌的诊断与预后指标,而且为以E2F3为靶点的膀胱癌的基因治疗提供理论依据。

E2F3基因沉默载体pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo的构建及表达

【目的】构建针对E2F3基因的shRNA表达载体,通过脂质体进行膀胱癌细胞内转染,监测转染效率。【方法】通过软件设计针对E2F3基因的寡核苷酸链,化学合成一对编码短发夹RNA序列,长度为64个碱基。核苷酸链经退火,克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,构建针对E2F3基因的RNA干扰质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。通过不同浓度的Lipofectamin 2000及干扰质粒混合物进行膀胱癌细胞系5637细胞转染,通过绿色荧光的表达程度摸索出细胞最佳转染浓度及转染时间。【结果】重组构建的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。Lipofectamin 2000能够有效的进行pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo质粒的转染。【结论】载体的成功构建及膀胱癌细胞系的高效转染,为进一步研究E2F3基因在膀胱肿瘤中的功能奠定基础。

30岁以下青少年膀胱尿路上皮细胞癌的临床分析

目的：探讨青少年膀胱癌临床、病理、治疗与预后的特点。方法：回顾性分析20例30岁及以下青少年膀胱细胞癌患者的临床资料。结果：临床表现间断全程无痛肉眼血尿11例,终末无痛肉眼血尿6例,尿路刺激症状1例,查体发现2例。术前均经B超、KUB、CT、膀胱镜、脱落细胞检查确诊。20例患者均行手术治疗,17例行经尿道膀胱肿瘤电切术（TURBT）,1例行扩大膀胱部分切除术,2例行全膀胱切除术＋回肠原位新膀胱术。17例术后随访6-107个月,平均43个月,3例复发,1例死亡。结论：30岁以下青少年膀胱尿路上皮癌具有分化好、分期早、复发率低及预后好等特点,经尿道电切术及术后定期复查可获得良好的治疗效果及预后。

术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值评估高级别 T1期膀胱癌预后的临床价值

目的：探讨术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（ neutrophil-lymphocyte ratio，NLR）作为高级别T1期膀胱癌患者术后预后评价方法的临床价值。方法回顾性分析2004年1月至2014年12月行经尿道膀胱肿瘤切除术（ TURBT），且术后病理诊断为高级别T1期膀胱癌的307例患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤数量和大小、肾积水情况、NLR、术后灌注化疗、围手术期输血等指标。根据患者术前外周血NLR分为低NLR组（NLR≤2．42，197例）和高NLR组（NLR＞2．42，110例）。所有患者均为首发尿路上皮癌。采用Kaplan-Meier法单因素分析各临床病理特点对患者无复发生存期（ recurrence-free survival，RFS）和无进展生存期（ progression-free survival，PFS）的影响，并用Log-rank检验比较两组的生存曲线，采用Cox回归模型多因素分析影响高级别T1期膀胱癌预后的因素。结果本组307例随访1～123个月，平均71个月。 RFS为2～123个月，平均61．3个月；PFS为26～117个月，平均75．2个月。低NLR组和高NLR组的肿瘤复发率分别为19．2％（38／197）和34．5％（38／110），平均RFS分别为73．0个月（2～123个月）和67．5个月（1～122个月），肿瘤进展率分别为4.1％（8／197）和10．9％（12／110），两组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。 Cox多因素生存分析结果显示NLR＞2．42（HR＝1．912，P＝0．007）、肾积水（HR＝2．485，P＜0．01）与肿瘤的复发和进展相关。结论术前NLR是影响高级别T1期膀胱癌患者术后生存时间的独立危险因素，可作为判断患者预后的指标。高NLR的膀胱癌患者术后的复发率和进展率更高。

膀胱尿路上皮癌细胞株E2F3基因与miR-17—5p和miR-20a的相互作用

目的研究E2F3基因、miR-17—5p和miR-20a在膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达及相互影响，探讨E2F3基因与miR-17—5p和miR-20a在膀胱癌发生中的作用。方法用pcDNA3．1-HA—E2F3和pAAV—siRNA—E2F3质粒在膀胱癌细胞株5637中分别过表达和敲低E2F3基因，用miR-17-5p和miR-20a的模拟物和反义寡核苷分别过表达和敲低miR-17—5p和miR-20a后，实时荧光定量PCR法检测miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的变化，蛋白质印迹法检测E2F3蛋白水平的变化。结果E2F3基因过表达后，miR-17-5p和miR-20a的2值分别为2．26±0．30和4．044-0．51，与对照组（1．00±0．00）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；敲低E2F3后，miR-17—5p和miR-20a的2值分别为0．49±0．02和0．65±0．04，与对照组（1．00±0．00）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；同时过表达miR．17．5p和miR-20a，E2F3的mRNA水平明显下调，蛋白质平均灰度值为55．31±7．89，对照组为103．67±13．61，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；同时敲低miR17—5P和miR-20a后，E2F3的mRNA比对照显著上调，蛋白质平均灰度值为295．68±19．25，与对照组平均灰度值为103．67±13．61比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论E2F3基因可上调miR-17—5p和miR-20a的表达，miR-17—5p和miR-20a可以下调E2F3基因的表达。E2F3基因、miR-17—5p和miR．20a在膀胱尿路上皮癌中形成调节环路，协调膀胱肿瘤细胞的生长。

以鼻转移为首发症状的肾透明细胞癌一例报告

患者，男，68岁。左侧鼻腔间堵塞、脓涕1年并反复出血2个月于2008年8月入外院。CT检查示左侧鼻腔软组织密度影，鼻寞未见异常。行左侧鼻腔肿物切除术，术后恢复顺利。病理诊断：肾透明细胞癌转移。超声检查发现左肾中极内侧接近肾门处7．1cm×5．6cm×1．2cm低回声肿物，内部回声不均匀，可见强回声光点，周边可见环绕血管。

肌层润性膀胱癌中B7-H3的表达及临床意义

目的 探讨肌层浸润性膀胱癌组织中B7-H3的表达及其临床意义.方法 回顾性分析115例接受膀胱癌根治手术治疗的肌肉浸润性膀胱移行细胞癌患者的临床病理资料.采用免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织和对应的癌旁组织中B7-H3的表达,分析其与临床病理学特征的关系.结果 B7-H3的阳性表达主要在细胞浆内,呈棕黄色颗粒.B7-H3在所有膀胱癌组织中均有一定的阳性表达,而在癌旁组织中无表达.B7-H3在膀胱癌组织中的阳性高表达率为68.7％.B7-H3的异常表达与远处转移和脉管内瘤栓均相关（均P＜0.05）,而与患者的性别、年龄、肿瘤分期和分级、淋巴结转移和复发无关（均P＞0.05）.生存分析提示,在膀胱癌组织中B7-H3高表达的患者生存时间明显低于B7-H3低表达患者,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 肌层浸润性膀胱癌组织中存在B7-H3表达水平上调,且与膀胱癌远处转移和脉管内瘤栓正相关;B7-H3的表达可能提示膀胱癌患者不良预后.

前列腺癌中腺苷酸激酶4的表达及临床意义

目的 探讨腺苷酸激酶4（AK4）在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。 方法 回顾性分析85例接受根治手术治疗的前列腺癌患者的临床资料。使用免疫组织化学法检测前列腺癌组织和相应癌旁组织中的AK4表达，分析其与临床病理学特征的关系。 结果 AK4在前列腺癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为85.9%和38.8%，差异具有统计学意义（P〈0.05）。AK4的异常表达和癌症复发及远处转移相关（均P〈0.05）。AK4高表达的前列腺癌患者生存时间明显低于低表达的患者，差异具有统计学意义（Ｐ＜0．05）。 结论 前列腺癌组织中，AK4的表达上调，与癌远处转移和脉管内瘤栓有关，AK4的表达可能提示前列腺癌患者预后不良。

脱细胞异体真皮在男性泌尿生殖疾病手术治疗中的应用

组织工程是涉及材料学、生命科学和生物工程学的交叉学科,旨在恢复组织或器官部分或全部功能。近年来,脱细胞异体真皮(Human acellular dermal mantrix,HADM)更多地运用在泌尿外科、男科生殖系统疾病中,脱细胞异体真皮的兴起及其技术在实验及临床领域的成功应用,已经为许多泌尿外科、男科疾病的治疗提供新的方法与途径。本文就HADM在泌尿男科生殖系疾病中的应用及研究进展予以综述。

去泛素化酶OTUB1与肿瘤相关性的研究现状

卵巢肿瘤相关蛋白酶B1(OTUB1)属于去泛素化酶家族成员之一,对于多聚泛素化链的高度特异性识别切割功能引起广泛关注,可调控多种重要的信号通路,如上皮-间质转化通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路和p53相关信号通路等。近年来已经逐渐成为肿瘤学研究的新方向,越来越多的研究证明,OTUB1与肝细胞癌、结直肠癌、乳腺癌等多种肿瘤的关系密切,调控肿瘤的发生、发展以及预后,靶向OTUB1可能成为肿瘤的潜在治疗方法。泌尿系肿瘤主要包括前列腺癌、膀胱癌以及肾细胞癌。主要对OTUB1与泌尿系肿瘤相关性的研究进展进行综述,表明OTUB1在泌尿系肿瘤的发生、发展中发挥重要作用,并进一步探索靶向OTUB1治疗泌尿系统肿瘤的可能性。