中低品位磷矿湿法磷酸料浆过滤性能研究

针对中、低品位磷矿湿法磷酸料浆过滤强度较低的现状 ,根据固液分离的基本原理 ,将磷酸料浆经过沉降分级 ,再将分级后的稠浆和稀浆通过分步加料形成分层过滤。分别对分层过滤情况下的料浆浓度、料浆温度、延时加料时间及稀、稠料浆液比等参数对过滤强度的影响进行了实验研究。研究结果表明 ,分层过滤新工艺可比传统的混合过滤提高过滤强度 2 0 %。

聚乙二醇水溶液中溶解氧的测定

[目的]测定聚乙二醇(PEG)水溶液中的溶解氧。[方法]以碘量法测定水中溶解氧反应为基础,采用分光光度法测定PEG水溶液中的溶解氧,并考察了PEG分子量、浓度对测定结果的影响。[结果]在选定条件下,分光光度法和碘量法测定结果的最大相对误差为2.25%。在相同浓度下,PEG水溶液中溶解氧的质量浓度随PEG分子量的增加而下降;在相同分子量时,溶解氧质量浓度随PEG浓度的增加而下降。[结论]分光光度法测定PEG水溶液中的溶解氧是可行的。

肠膜明串珠菌CICC-21725产右旋糖酐的发酵动力学

研究肠膜明串珠菌CICC-21725发酵产右旋糖酐过程。根据菌体生长量、蔗糖浓度和右旋糖酐产率与发酵时间的关系,采用Logistic Law方程和Luedeking-Piret方程,建立肠膜明串珠菌CICC-21725菌体生长动力学模型、产物合成动力学模型和底物消耗动力学模型。运用Matlab 7.0软件对实验数据拟合,获得模型参数。用红外光谱和核磁氢谱、碳谱对菌体发酵产物进行结构表征。结果表明:所建立的动力学模型的预测值与实验值吻合较好,拟合模型的相关系数分别为0.994 2、0.996 9和0.991 2,模型能较好的预测肠膜明串珠菌CICC-21725发酵产右旋糖酐的动力学过程。肠膜明串珠菌CICC-21725发酵过程中右旋糖酐的合成属于生长偶联型。红外光谱及核磁共振光谱结果表明肠膜明串珠菌的发酵产物是由为α-(1,6)糖苷键连接的直链α型右旋糖酐。

湿法磷酸料浆絮凝沉降操作优化研究

为了改善中低品位矿湿法磷酸料浆过滤强度偏低的现状 ,针对不同浓度、不同温度的料浆 ,通过添加不同用量的絮凝剂 ,测得不同条件下的料浆絮凝沉降速度及优化操作条件 ,研究结果对中低品位矿湿法磷酸料浆的预处理及相关分离装置的设计有指导意义。

磷酸料浆强化过滤技术研究

为了提高中低品位矿磷酸料浆过滤强度,将料浆通过沉降分级、溢流浓缩、分步加料等手段形成浓差过滤。浓差过滤改变了料浆滤饼的形成机理,改善了磷酸料浆的过滤性能,降低了过滤阻力,强化了过滤操作条件,使过滤强度比传统过滤显著提高。

湿法磷酸料浆沉降分离特性研究

对湿法磷酸料浆的物性及在不同工况下的重力沉降特性进行了研究 ,研究结果对改进湿法磷酸料浆液固分离工艺过程并提高分离效率都有重要的参考意义。

新城疫病毒单克隆抗体的制备及其与不同分离株的反应性

以纯化后的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒参考株F48E8为免疫原,腹腔注射法免疫BALB/c小鼠。取免疫后小鼠血清中血凝抑制(HI)抗体滴度最高的脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,应用HI试验检测融合细胞的上清筛选阳性克隆。结果显示,获得了4株能稳定传代并分泌抗NDV血凝素(HN)单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为1G10、2H5、5B9和5E10。小鼠接种105个左右杂交瘤细胞时获得的腹水效价达到29.5～211,特异性试验表明,所制备单克隆抗体仅与NDV F48E8、La Sota和C30株发生特异性反应,而与其他常见禽类病毒不出现阳性反应。此外,所制备的单克隆抗体5E10可通过间接免疫荧光法检测Vero细胞上的NDV感染,并可通过HI试验用于区分鸡源和鸽源NDV分离株。

新型冠状病毒Beta变异株S1重组蛋白的制备及免疫效果评价

根据CHO细胞密码子偏好性进行SARS-CoV-2 Beta变异株S1基因的优化与合成,并将其克隆至pSN载体,构建重组表达质粒pSN-Beta-S1,转染CHO细胞,获得重组蛋白Beta-S1,通过SDS-PAGE和Western blot方法鉴定重组蛋白Beta-S1的表达,对培养液上清进行亲和层析纯化。将纯化后的重组蛋白Beta-S1联合氢氧化铝佐剂免疫BALB/c小鼠,检测血清中特异性IgG抗体及其亚型,评价针对SARS-CoV-2不同变异株的交叉中和抗体活性。结果显示,成功构建pSN-Beta-S1重组质粒,经CHO细胞表达系统表达了重组蛋白Beta-S1,重组蛋白条带单一,大小约为120 kDa,纯度可达85%以上,可与SARS-CoV-2 RBD蛋白多克隆抗体和Strep标签单克隆抗体特异性结合。S1重组蛋白对BALB/c小鼠具有良好的免疫原性,第3次免疫后14 d,针对RBD和S1蛋白的特异性IgG抗体效价平均可达1∶66260和1∶133120,抗体亚型偏向于IgG1,针对SARS-CoV-2野生株,Beta、Delta、Omicron BA1和Omicron BA2变异株的中和抗体分别为1∶629、1∶1720、1∶374、1∶77和1∶101。本研究利用CHO细胞表达系统成功制备了SARS-CoV-2 Beta变异株S1重组蛋白,免疫BALB/c小鼠后获得了良好的免疫原性和针对不同变异株的交叉中和抗体活性,为广谱SARS-CoV-2疫苗的研究提供了一定的借鉴意义。

表达新型冠状病毒奥密克戎BA.1变异株S1基因重组DNA疫苗的构建及免疫原性

旨在构建以S1蛋白为基础的新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)奥密克戎BA.1变异株(Omicron-BA.1)DNA疫苗并研究其免疫原性。首先,以真核表达载体pSN为骨架,使用PCR和无缝克隆方法构建含Omicron-BA.1变异株S1基因的pSN-S1重组质粒。使用无内毒素质粒大提试剂盒大量提取pSN-S1重组质粒,通过Western blot方法验证S1蛋白的表达。用pSN-S1重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,使用ELISA方法检测小鼠血清针对S1蛋白的特异性IgG抗体效价及亚型。结果显示,pSN-S1重组质粒构建成功,S1蛋白表达良好,条带单一、大小正确。实验室制备的pSN-S1重组质粒的质量浓度(2168.2 mg/L)和纯度(D_(260)/D_(280)=1.92)较高,可用于后续小鼠免疫试验。pSN-S1重组质粒在C57BL/6小鼠中具有良好的免疫原性,第3次免疫后21 d,针对S1蛋白的特异性IgG抗体效价平均可达1∶1200,主要偏向于IgG2a亚型。本研究成功构建了以S1蛋白为基础的SARS-CoV-2 Omicron-BA.1变异株DNA候选疫苗,为针对SARS-CoV-2 Omicron变异株DNA疫苗的进一步研究奠定了基础。

荧光素酶报告基因法测定生物制品活性研究进展

生物学活性是反映生物制品药物有效性的关键质量属性,荧光素酶报告基因法利用报告基因的表达量反映药物的生物学活性,具有高效简便的优势,得到药品监管机构的认可。该文综述了荧光素酶报告基因法的技术原理、关键要素、分类及特征,归纳总结了其在生长因子、激素以及抗体等生物药活性测定方面的应用,可为生物药研发领域的科研人员提供参考。

长效人凝血因子Ⅶ的研究进展

人凝血因子Ⅶa(human factor Ⅶa,hFⅦa)是外源性凝血途径的起始酶,已被广泛用于血友病患者的出血及非血友病患者的创伤性大出血等治疗,具有令人满意的止血效果。但是,同其他蛋白质类药物一样,其存在体内循环半衰期短、易被酶水解等问题,极大限制了临床应用。由于长效蛋白质药物能延长药物在体内的滞留时间,增加患者用药的顺应性,降低用药相关的医护成本,因而开发长效的hFⅦa成为了研究热点。本文就长效hFⅦa药物的国内外研究进展做一综述。

发酵法制备右旋糖酐菌种培养

选择中国工业微生物菌种保藏中心的肠膜明串珠菌20074,通过直接发酵法制备右旋糖酐,以培养液浊度和pH值作为考察指标,对基础培养基的各组分含量进行优化,得到最优组成为:蔗糖10%、蛋白胨0.2%、磷酸氢二钠0.2%、磷酸二氢钾0.03%、酵母浸膏0.5%。实验所选的范围内,金属离子中Mn2+对菌体生长的影响较大。肠膜明串珠菌20074的生长曲线表明,0～8h是生长延迟期,8～24h为对数期,24～30h为稳定期,30h之后为衰亡期。

重组人凝血因子Ⅷ产品中CHO细胞DNA残留量的检测

目的建立特异的重组人凝血因子Ⅷ产品中CHO细胞DNA残留量的检测方法,并进行验证及初步应用。方法采用磁珠分离法提取样品中残留的CHO细胞DNA,再利用Taqman探针法对样品和标准DNA进行Q-PCR检测,根据标准曲线进行DNA残留量分析。对建立的方法进行专属性、准确性、重复性及中间精密度验证,并对重组人凝血因子Ⅷ原液的CHO细胞DNA残留量进行检测。结果该方法 DNA浓度在0.003~300 pg/μL范围内,线性关系良好,R2为0.999,灵敏度可达0.003 pg/μL;对大肠埃希菌DNA无特异性扩增曲线,专属性良好;检测高、中、低浓度DNA加标量样品的回收率分别为82.68%、71.75%和72.67%,准确性良好;重复性检测的RSD为7.02%,中间精密度检测的RSD为9.31%,重复性及精密度良好。用该方法检测的3批重组人凝血因子Ⅷ原液的DNA残留量均远低于100 pg/剂量。结论成功建立了特异的CHO细胞DNA残留量的检测方法,该方法专属性好,准确性及精密度高,可作为CHO宿主细胞DNA残留量的常规检测方法。