动物废弃物中病原体的污染及其控制

本文概述了畜牧业废弃物中的病原体种类、数量及其污染与控制措施。

猪附红细胞体病的诊断与治疗

2001年5月,广东某猪场售出的50日龄猪在进入农户家1周后,发生了以排稀便为主要表现症状的疾病,并造成猪死亡.经诊断确诊为附红细胞体病.

鱼鸭系统中鸭病控制的生态学思考

用生态学原理分析了鱼鸭养殖系统中生物与环境变迁、相互作用及其对鱼鸭养殖系统健康发展的影响 ,提出了鸭病的生态学控制思路。

仔猪大肠杆菌性腹泻的病原分离鉴定及免疫效果观察

仔猪大肠杆菌性腹泻的病原分离鉴定及免疫效果观察余志东，李乃津，黄引贤，黄毓茂，李柠，袁少华，梁昭平，施均喻，陈连忠，蒋远云（华南农业大学广州５１０６４２）广东Ｊ、Ｙ两个猪场的哺乳仔猪发生严重的腹泻。７日龄内的仔猪拉黄色稀粪，仔猪迅速脱水消瘦和死亡；７...

石蜡切片研究H9N2亚型禽流感病毒的免疫原性

目的 用石蜡切片评估禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/SS/ 94 (H9N2 )株的免疫原性 ,以获得免疫原性良好的疫苗候选株。方法 以A/Chicken/Guangdong/SS/ 94 (H9N2 )株为抗原制备油乳剂灭活疫苗免疫 10d龄SPF鸡 ,免疫 2 1d后 ,以该毒株静脉注射免疫组与非免疫对照组 ,定期剖杀试验鸡并取脑、心肌、肺、胰腺、肝、肾、脾、气管和法氏囊等组织用石蜡切片进行病理组织学检查。结果 两组试验鸡的的病理组织学变化有明显差异 ,免疫组试验鸡获得保护 ,而对照组病变明显。结论 A/Chicken/Guangdong/SS/ 94 (H9N2 )株的免疫原性良好 ,可作为制备油乳剂灭活疫苗的候选株。

高铜日粮对肉鸡肾氧化损伤和Nrf2信号通路相关基因表达的影响

为了研究高铜日粮对肉鸡肾氧化损伤和Nrf2信号通路相关基因表达的影响,选用48只1日龄健康白羽肉鸡,随机分为4组,每组12只,分别喂以基础日粮(Cu 11 mg·kg^-1,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg·kg^-1,高铜Ⅰ组;Cu 220 mg·kg^-1,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg·kg^-1,高铜Ⅲ组),并于49日龄采集肾组织作为样品,制作组织切片观察肾病理变化,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GR)和总抗氧化能力(T-AOC)等指标的变化,并通过实时荧光定量PCR检测核转录相关因子2(Nrf2)、谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、谷氨酰半胱氨酸合成酶修饰亚基(GCLM)、血红素氧化酶(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)的mRNA相对转录量。结果显示,高铜组肉鸡的肾间质变宽,肾小管上皮细胞出现脱落;高铜Ⅲ组肾的T-AOC、SOD和GR活性与对照组相比显著下降;MDA含量无显著变化;高铜Ⅱ组和高铜Ⅲ组Nrf2和GCLC mRNA相对转录量与对照组相比显著升高,高铜组GCLM和HO-1 mRNA相对转录量与对照组相比显著上调,而NQO1 mRNA的相对转录量则无显著变化。结果表明,高铜日粮可诱导肉鸡肾发生氧化损伤和Nrf2信号通路相关基因的表达。

鸽新城疫灭活疫苗的研制及免疫效果研究

利用近年来分离到的鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株进行鸽新城疫油乳剂灭活疫苗的研制,并对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验,结果表明制备疫苗的各项指标均符合生物制品通则的要求,对疫苗的最小免疫剂量、抗体产生及免疫持续期、与同类产品的交叉攻毒保护对比效果进行了进一步试验,结果表明疫苗的最小免疫剂量为0.15mL/只,疫苗以0.3mL/只免疫剂量进行一次免疫,免疫持续期为3个月,以0.3mL/只免疫剂量进行二次免疫,免疫持续期可达6个月。交叉攻毒保护对比试验结果表明所制备的鸽新城疫灭活疫苗对鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株和鸡新城疫病毒北京株(CVCCAV1611)的攻毒保护效果均优于鸡新城疫(LaSota株)灭活疫苗。

H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株灭活疫苗的研制

利用H7N9亚型重组禽流感病毒rGD76株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽H7N9亚型流感的防控提供科学数据及手段。将AIV-rGD76株用灭菌生理盐水作104倍稀释后,接种11日龄非免疫鸡胚,37℃孵育72h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加矿物油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株)均为油包水型,黏度均在50cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000r/min离心15min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.3mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中rGD76株的HI抗体平均效价可达8log2以上,使用H7N9亚型高致病性禽流感病毒GD16株滴鼻接种0.2mL/只(含100LD50)对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。在实验室条件下研制出重组禽流感病毒灭活疫苗(H7N9亚型,rGD76株),疫苗的各项指标均符合标准。

新型鹅星状病毒的分离鉴定与全基因序列分析

为了解近年鹅星状病毒的流行情况,通过鹅胚接种、鹅胚半数致死量测定(ELD_(50))、RT-PCR检测和基因组序列测定等方法,从2019年山东某养鹅场雏鹅疑似星状病毒引起鹅内脏痛风病的病料中分离出1株新型鹅星状病毒,命名为AstV/Goose/SD776/2019。该分离株能引起鹅胚典型的临床症状,病毒无血凝活性,ELD_(50)为10^(-4.0)/0.2 mL,动物回归试验中死亡的雏鹅可以复制出与临床自然感染相似的病变。用RT-PCR对分离株全基因组序列分析结果显示,分离株的3个ORF和与新型鹅星状病毒毒株(JSHA、SD01、SDPY、GD)的核苷酸和氨基酸同源性较高(99.2%以上);与能导致雏鹅肠炎的鹅星状病毒(FLX)及其他种属禽源星状病毒同源性相对较低,遗传进化分析结果显示,分离株在进化树上与4株新型鹅星状病毒的亲缘关系接近,表明分离毒株为新型鹅星状病毒。

鸡肾病的病因分析及防治措施

鸡肾病的病因分析及防治措施陈忠谭丽屏蔡福玲黄锦江（广州市畜牧兽医总站５１０５００）梁昭平（华南农业大学动物医学系）鸡肾病在养鸡生产中极为常见，其发病率及死亡率均较高，若处理不当会造成严重的经济损失。引起鸡肾病的病因多种多样，症状及病理剖检变化也不尽相...

2013～2018年中国部分地区HH9N2亚型禽流感流行病毒HA基因序列分析

研究旨在了解2013～2018年中国部分地区分离的69株H9N2 AIV的HA基因遗传特点和变异情况。通过对HA基因片段进行扩增、克隆、序列测定及遗传进化分析。结果显示:69株病毒的裂解位点氨基酸序列分别为PSRSSR↓GLF、PSKSSR↓GLF两种形式,均是非连续碱性氨基酸,符合低致病性AIV的特征;毒株属于h9.4.2.5分支,核苷酸相似性为83.7%～99.9%,推导的氨基酸相似性为85.8%～99.9%,与现有疫苗毒株核苷酸同源性存在较大的差异;毒株受体结合位点的7个氨基酸中第198位氨基酸的变化较大,存在V、T、K、A 4种情况;同时发现69株病毒存在6～8个不同位置的潜在糖基化位点,第218位糖基化位点的大量突变与第313位糖基化位点的增加已经成为H9N2 AIV的变异特征。提示应关注流行毒株与现有疫苗毒株的抗原匹配性和基因变化等问题。

不同佐剂制备的H9N2亚型禽流感(SS株)灭活疫苗的免疫效果和安全性评价

利用8种不同佐剂制备了16种H9N2亚型禽流感(SS株)灭活疫苗,对疫苗的物理性状、安全性、免疫效力及疫苗吸收情况进行检验,结果表明:疫苗外观、剂型、黏度均符合国家标准,物理性状稳定;接种SPF鸡后3周,16种疫苗HI抗体效价均超过11log2;剖检显示,大多数疫苗残留较少。

Ⅰ群禽腺病毒多种血清型的Hexon、Fiber基因遗传进化分析

为了进一步丰富和完善广东地区禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)的分子流行病学,试验采用PCR及基因克隆测序技术对2014—2020年期间瑞普(天津)生物药业有限公司分离保存的9株Ⅰ群FAdV分离株进行分子生物学鉴定,并通过MEGA 5.1软件对各分离株的Hexon与Fiber进行遗传演化分析。结果表明:9株Ⅰ群FAdV分离株中有5株4型分离株,分别为GDDL-4、GDHQY-4、GDLHX-4、GDZMY-4、GDZYQ-4;2株8型分离株,分别为GDB3-8a和GDT08-8b;2株11型分离株,分别为GDWYT-11和GDZWJ-11。分离株GDDL-4、GDHQY-4、GDLHX-4、GDZMY-4、GDZYQ-4与FAdV-4型国内参考株GDMZ(GenBank登录号MG856954.1)的同源性为99.9%~100%;分离株GDB3-8a、GDT08-8b与FAdV-8a英国参考株764(GenBank登录号KT862811.1)的同源性为97.1%~97.7%;分离株GDB3-8a、GDT08-8b与FAdV-8b日本参考株TR59(GenBank登录号KT862810.1)的同源性为97.0%~97.5%;分离株GDWYT-11、GDZWJ-11与FAdV-11型英国参考株380(GenBank登录号为KT862812.1)的同源性为97.4%~97.9%。各分离株均包含多个氨基酸位点突变。分离株GDDL-4、GDHQY-4、GDLHX-4、GDZMY-4、GDZYQ-4的Hexon、Fiber与国内部分参考株同源性较高、亲缘性更近;分离株GDB3-8a、GDT08-8b、GDWYT-11、GDZWJ-11的Hexon、Fiber与国外部分参考株同源性较高,遗传距离更近。说明分离株GDDL-4、GDHQY-4、GDLHX-4、GDZMY-4、GDZYQ-4由国内毒株演变而来,分离株GDB3-8a、GDT08-8b、GDWYT-11、GDZWJ-11则由国外毒株演变而来。

我国部分地区新型鹅星状病毒ORF2基因序列及遗传变异分析

为掌握我国新型鹅星状病毒(goose astroviruses,GoAstV)的遗传变异方向,对2019年从我国不同地区发病鹅病料中分离到的10株新型GoAstV,采用PT-PCR技术扩增其ORF2基因,然后进行测序和遗传进化分析。结果显示:分离毒株ORF2基因全长2115 bp,编码705个氨基酸;毒株间核苷酸和氨基酸同源性分别为96.2%~99.9%和96.3%~99.9%;分离毒株与参考毒株Goose/SDPY/1116/17亲缘关系最近,处于同一分支。将分离毒株ORF2氨基酸序列与参考毒株进行比较后发现,该基因编码的衣壳蛋白氨基酸序列有多处位点存在差异,表明当前我国GoAstV流行毒株已发生变异。本研究为后续新型GoAstV的分子生物学特性研究及其疫苗研制提供了参考。

2019年我国部分地区鸭圆环病毒基因序列测定与分析研究

为了解近年鸭圆环病毒流行毒株的基因遗传特点和变异情况,通过采用PCR的方法对我国部分地区的30份鸭圆环病毒阳性样品进行全基因组扩增与克隆、序列测定及遗传进化分析。结果显示:30株DuCV流行毒株之间的全基因序列同源性为85.8%~99.9%,其中26株DuCV的全基因序列长为1993~1995 bp,与德国代表株处于同一进化分支,属于基因1型,4株DuCV的全基因序列仅有1988 bp,与中国台湾代表株属于同一进化分支,属于基因2型;Cap蛋白和Rep蛋白的氨基酸序列的变异分析表明Cap蛋白的变异程度要显著高于Rep蛋白。

水禽圆环病毒巢式PCR检测方法的建立与应用

为了建立一种快速、灵敏、特异的水禽圆环病毒检测方法,试验根据GenBank中已公布的鸭圆环病毒(DuCV)和鹅圆环病毒(GoCV)的Rep基因序列设计3条特异性引物,对扩增条件进行优化,并检验优化后方法的特异性和灵敏性,最后用建立的水禽圆环病毒巢式PCR检测方法对40份疑似水禽圆环病毒感染的病料进行检测。结果表明:水禽圆环病毒巢式PCR方法可成功扩增出719 bp和543 bp的目的片段;优化后的一轮、二轮PCR中退火温度分别为50,56℃,引物加入量均为0.6μL,二轮PCR的模板稀释倍数为1×10^(3)倍。优化后的方法对水禽圆环病毒的检测具有较好的特异性,与鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、H5N6亚型禽流感病毒(AIV)、H9N2 AIV、新城疫病毒(NDV)、鸭瘟病毒(DEV)、鹅细小病毒(GPV)及鹅星状病毒(GoAstV)均无交叉反应;该方法的最低检出限达4.04×10^(2)拷贝/μL,分别是一轮、二轮PCR最低检出限的1×10^(4),1×10^(3)倍;利用该方法对肝脏病料进行检测,GoCV的阳性率为60%(12/20),DuCV的阳性率为40%(8/20)。说明试验建立的巢式PCR检测方法可用于水禽圆环病毒的检测。

一例肾病变型鸡传染性支气管炎的诊断

传染性支气管炎（IB）是一种鸡的急性、高度接触性、病毒性呼吸道和泌尿生殖道疾病，其特征是咳嗽、喷嚏、气管哕音和呼吸道黏膜呈浆液性卡他性炎症。本病流行呈世界性分布，根据病毒对器官的亲嗜性不同分为不同的嗜脏器型、呼吸道型、肾型、嗜肠型等，已被世界公认。发生肾病变型传染性支气管炎时，病鸡会出现肾脏肿大、肾小管和输尿管内有尿酸盐沉积等病理变化。传染性支气管炎病毒（IBV）可感染所有日龄的鸡，导致病鸡生长迟缓、死亡，增重和饲料报酬降低，