双波长紫外分光光度法快速测定发酵液中纳他霉素含量

采用双波长紫外分光光度法测定发酵液中的纳他霉素的含量,选定了测定波长为303nm及参比波长为290nm,对测定方法的线性及线性范围、精密度、准确度、检测限及定量限等进行了方法学上的研究。结果表明,该法在0.5～6μg/mL之间相关系数为0.999,回收率为100.6%。实验中同时并采用高效液相色谱法平行测定同一纳他霉素真实发酵过程的产物浓度,结果表明,2种方法之间无显著差异。

一锅法合成二氢吡啶工艺的优化研究

试验旨在优化一锅法合成二氢吡啶的过程。以乌洛托品、乙酰乙酸乙酯及乙酸铵水溶液为原料,乙醇为溶剂一锅法合成二氢吡啶,通过单因素试验对物料配比、溶剂配比、反应温度、反应时间等因素进行优化。结果显示,二氢吡啶合成的优选参数为n_(乌洛托品)∶n_(乙酰乙酸乙酯)∶n_(醋酸铵)=1∶7∶0.8进行投料,乌洛托品投料量∶溶剂量=1∶3.5~1∶4.5,混合溶剂中水与乙醇占比为V_(水)∶V_(乙醇)=20∶15~30∶15,60℃下反应1.5 h,二氢吡啶含量高达98%~103%,产物收率可达90%左右,母液可循环套用。研究表明,该工艺路线具有低污染、高生产安全性、产率高的优点,是合成二氢吡啶的一种环境友好的工艺路线。

干法制粒压片制备马波沙星风味片的研究

为制备马波沙星风味片,通过颗粒一次成型率,适口性、脆碎度、溶出度、批间重复性进行质量评价,以单因素实验筛选处方,正交试验优化处方,得到马波沙星风味片最佳处方为:马波沙星10%、乳糖24%、微晶纤维素37.5%、预胶化淀粉12%、鸡肝粉7.5%、羟丙基纤维素5%、低取代羟丙基纤维素3%、硬脂酸镁1%,采用干法制粒压片工艺,避免了溶剂的使用,操作简单,产品质量稳定,处方成本低,更易推广使用,在临床应用中具有广阔前景。

Space-flight Mutation of Streptomyces gilvosporeus for Enhancing Natamycin Production

生产 natamycin 的紧张的异种， Streptomyces gilvosporeus，在空间飞行以后被获得变化。关于沙孢子和观点孢子，变化比率直到 67.6% 和 78.3% ，幸存比率分别地是 43.1% 和 3.0% 。生产 natamycin 的改进异种， S。gilvosporeus LK-45，被屏蔽，它显示出 1420mg · L 的 natamycin 生产率 ? 1。对 2-deoxy 葡萄糖抵抗的异种， S。gilvosporeus LK-119，进一步用一个合理屏蔽过程被获得。1940mg · L 的 natamycin 生产率 ? 当葡萄糖被用作碳来源时， 1 被完成。

紫外诱变和抗性筛选选育那西肽高产菌株

那西肽是活跃链霉菌(streptomyces actuosus)产生的次级代谢产物,与硫链丝菌素(thiostrepton)、盐屋霉素(siomycin)及硫肽霉素(thiopeptin)等抗生素结构相似,均属于含硫多肽类抗生素[1]。那西肽最先于20世纪60年代发现,现在作为一种畜禽专用的抗生素在多个国家允许使用。尽管我国于2019年颁布文件,禁止该抗生素长期添加于饲料中用于畜禽促生长,但是由于该类抗生素结构的特异性,对这类抗生素的工艺研究工作仍是方兴未艾[2]。

加米霉素注射液的靶动物安全性试验

为了评价加米霉素注射液对靶动物牛的安全性,选择24头健康中国荷斯坦牛犊,随机分成4组,每组6头。各组分别以对照组(生理盐水:0.2 mL/kg·bw)、推荐剂量组(6 mg/kg·bw)、3倍推荐剂量组(18 mg/kg·bw)和5倍推荐剂量组(30 mg/kg·bw)的加米霉素注射液给药。试验期间观察受试牛的临床表现和体重变化,试验结束后进行组织病理学检查,测定血液学和血清生化指标的变化。结果表明,使用推荐剂量和3倍推荐剂量的加米霉素注射液,整个试验期间受试牛精神状态、饮水、采食和粪便等均未出现异常,体温、心率、呼吸频率、增重和饲料消耗量与空白对照相比均无显著性变化。由此可以说明,加米霉素注射液按照推荐剂量应用于牛具有较好的安全性。

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱鉴别预混剂中黄霉素

利用超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间质谱对预混剂中的黄霉素5种组分进行鉴别分析。采用C18色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(含2 mmol/L乙酸铵)为流动相梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温40℃;质谱条件为电喷雾离子源,检测方式为负离子全扫描模式,通过保留时间、精确分子量和二级质谱特征碎片完成对黄霉素的5种组分的鉴别。与高效液相色谱方法比较,本方法具有判断准确、检测快速的特点,具有很好的应用价值。

亲水作用液相色谱法测定注射液中泰地罗新含量

采用XBridge-BEH Amide(150 mm×4. 6 mm,5μm)亲水作用色谱柱,建立了泰地罗新的检测方法。确定了检测波长,考察了流动相pH、流动相盐体系、流动相洗脱方式对保留时间、对称因子和理论塔板数的影响。结果表明,采用亲水作用色谱柱分离,以乙腈(含10 mmol/L甲酸铵、0. 125%甲酸、5%水)-0. 125%甲酸水溶液(含10 mmol/L甲酸铵)为流动相梯度洗脱,流速为1. 0 m L/min,柱温为30℃,紫外检测波长为280 nm,在此条件下泰地罗新可以获得良好的分离效果。泰地罗新药物质量浓度与峰面积在6. 25～100μg/m L范围内线性关系良好,相关系数R=0. 999 9,检出限为0. 05μg/m L,定量限为0. 14μg/m L,批内添加回收率在97. 8%～102. 1%之间,批内变异系数为1. 69%～3. 12%;批间添加回收率在96. 9%～104. 3%之间,批间变异系数为3. 39%～4. 05%。该方法能够快速、准确地检测泰地罗新含量,且成本低廉,可应用于药物生产中泰地罗新的质量控制。

饲用木聚糖酶的应用研究进展

从木聚糖酶作为饲料添加剂的角度出发,综述了木聚糖酶在家禽饲料、家畜饲料以及水产养殖饲料中的应用进展,并对其应用前景进行了展望。

高效液相色谱法同时测定尼卡巴嗪中4,4’-二硝基均苯二脲和2-羟基-4,6-二甲基嘧啶的含量

建立了同时测定尼卡巴嗪中4,4’-二硝基均苯二脲(DNC)和2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)双组分的高效液相色谱法。实验采用安捷伦Poroshell 120 Bonus-RP色谱柱(4. 6mm×150mm,2.7μm),水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速为0.8mL/min,柱温为40℃,HDP和DNC的检测波长均选择300 nm。试验结果表明HDP和DNC分别在23.3~34.9μg/m L和56.7~85.1μg/m L范围内线性关系良好,相关系数(r)分别为0.999 8和0.999 6。HDP平均回收率为100.4%,RSD为0.9%(n=9);DNC的平均回收率为99.2%,RSD为0.8%(n=9)。建立的方法简便、准确、可靠,可更好地控制尼卡巴嗪的质量。

高效液相色谱法测定加米霉素注射液中抗氧化剂硫代甘油

加米霉素为氮杂类的第二代大环内酯类抗生素,加米霉素注射液能够控制由溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、睡眠嗜组织菌导致的牛呼吸道疾病的高风险性[1-4],且具有吸收快、体内残留量低、体内分部广、安全高效等优点,暂无不良反应报道[5-7]。为了注射剂的稳定性,加米霉素注射液中添加硫代甘油抗氧化剂[8-9]。硫代甘油在药物制剂中主要作为抗氧剂和防腐剂,常以0.02~0.1%(质量分数,下同)的浓度,用于滴鼻剂、洗剂、乳膏剂等,该产品安全,对皮肤无刺激性,已收录于美国药典中,收载于非活性组分指南(FDA)。肌肉注射最大用量为1%,静脉注射最大用量为1%,该产品在加米霉素注射剂中的最终用量为0.1%,在安全用量范围内。

博落回提取工艺研究

试验旨在优化博落回提取工艺。博落回果荚粉经过酸水提取、碱沉析晶得初提物,经溶剂提取、脱色、浓缩、结晶得博落回提取物。结果显示:博落回最佳提取条件为粉碎博落回果荚,使用0.5%硫酸溶液70℃搅拌提取4次,浸提1.5 h,一次浸提液料比为20 mL/g,其他3次浸提液料比为10 mL/g;初提物在90%乙醇中加热回流提取两次,两次浸提液料比为5 mL/g,浸提时间为1 h,一次提取液使用0.1%(质量体积比)活性炭进行脱色,浓缩,pH值调至2~3,低温析晶1.5 h,过滤、干燥后可获得博落回提取物。研究表明,最佳工艺条件下,博落回提取物含量高于60%,溶剂可回收,工艺简单,易于工业化生产。

利用玉米浸泡水生产酵母及其在赖氨酸下游工艺中的应用

利用玉米浸泡水生产酵母,将培养基pH调至4.0后在未灭菌的情况下接入酵母培养,摇瓶培养酵母菌,湿菌体量可达约10g/100mL,发酵罐培养可达20～30g/100mL。将培养好的酵母添加到已调至pH4.0的赖氨酸发酵液中,非无菌条件下再发酵约6h,降低了赖氨酸发酵液残糖,降低了发酵液黏度。该工艺不仅解决了玉米浸泡水的污染问题,同时也极大地改善了赖氨酸下游工艺,取得了良好的经济效益和社会效益。

泰拉霉素的研究进展

泰拉霉素是一种动物专用的大环内酯类抗生素,主要应用于防治猪和牛的呼吸系统疾病。泰拉霉素具有抗菌活性强、抗菌谱广、吸收迅速、生物利用度高、消除半衰期超长、药效持久、单次给药即可完成整个治疗过程等优点。为了促进泰拉霉素的合理应用、研制和开发,通过对其合成方法、作用机理、抗菌活性、检测方法、药代动力学、药效学、生物安全性和残留等相关研究进展进行综述。

氟苯尼考主要杂质确定以及合成研究

设计了全新的工艺,制备了广谱抗菌药氟苯尼考合成工艺中,存在的2个主要杂质,并以1H NMR谱, HRMS谱确证其结构为甲砜霉素和3-氟-3-(4-甲砜基苯基)-2-(N-二氯乙酰基)氨基-1-丙醇。为氟苯尼考原药合成及工艺优化、提高产品质量全组分分析,以及顺利注册打下必要的基础。

干法制备阿苯达唑风味片的研究

为制备阿苯达唑风味片,采用干法制粒压片,以单因素试验筛选处方,正交试验优化处方;通过片剂外观、片重差异、硬度、脆碎度、溶出度进行质量评价。得到阿苯达唑风味片最佳处方为:阿苯达唑33.4%、乳糖45.7%、鸡肝粉11.4%、蔗糖粉9%、硬脂酸镁0.5%,阿苯达唑溶出度在85%以上。研究表明阿苯达唑风味片采用干法制粒压片,避免了溶剂的使用、工艺重复性好、工业化需要的设备少、更易推广使用。

紫外诱变富集培养获得那西肽高产菌株的研究

目的:利用紫外诱变和富集培养相结合,筛选出那西肽高产菌株。方法:采用常规的物理诱变剂-紫外线(UV)对那西肽生产菌进行诱变处理,然后进行多种氨基酸富集培养,筛选出发酵单位较高的菌株。结果:那西肽生产菌经过不同剂量UV照射,诱变处理后,菌株的致死率、菌株的突变率均随着UV照射时间的增加而提高,其中90s为最适的诱变处理时间;菌株经过UV诱变处理后,用富集培养法处理,可以提高筛选目标突变体效率。结论:两种方法的结合有效提高了那西肽生产菌的产量。

尼卡巴嗪的合成工艺改进

以对硝基苯胺和三光气为原料,合成了4,4?-二硝基二苯基脲(DNC),副产物氯化氢气体用冷甲醇吸收。以尿素和乙酰丙酮为原料,在氯化氢甲醇溶液中合成了2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(HDP)。以DNC和HDP的甲醇溶液反应合成了抗球虫药尼卡巴嗪,并用1HNMR对其结构进行了表征。对溶剂种类、反应温度和投料比等影响因素进行了优化。结果表明,以二甲苯为溶剂,n(对硝基苯胺)∶n(三光气)=6∶1时,在130℃下反应15 h,DNC的收率可达94%;以氯化氢甲醇溶液为溶剂,n(乙酰丙酮)∶n(尿素)=1.0∶1.1,回流下反应5 h,HDP的收率达93%以上;以甲醇为溶剂,n(DNC)∶n(HDP)=1.0∶1.1,室温反应5 h,尼卡巴嗪的总收率可达93%。通过并联反应,缩短了生产周期,提高了产品质量的稳定性。

截短侧耳素发酵条件的研究

目的通过优化截短侧耳素发酵培养基和培养条件来提高其产量。方法对基础培养基初始pH、培养温度和溶氧条件等进行优化,利用截短侧耳素的产量作为标准来评价。结果当培养基培养基初始pH为7、培养温度为25℃,摇床转速为220rpm时,截短侧耳素的发酵水平较高,最高达到13 g/L。结论通过优化培养基和培养条件可显著提高截短侧耳素的产量。

阿维拉霉素提取工艺的研究

本试验旨在优选阿维拉霉素提取工艺条件,为阿维拉霉素的提取提供依据。本研究用4-甲基-2-戊酮做溶剂,将阿维拉霉素菌丝体中的有效成分提取出来,经过浓缩、除油和结晶提取出阿维拉霉素产品。研究浸提温度、浸提时间、浸提料液比、浓缩液体积和正己烷用量对提取工艺的影响,优选出阿维拉霉素最佳提取工艺条件并进行工艺验证。结果:阿维拉霉素最佳提取工艺条件为:浸提温度80℃,浸提时间1h,一次浸提料液比为1:7,浓缩液体积为浸提液体积的1/3,正己烷体积为浓缩液体积的2倍。结论:确定了阿维拉霉素提取的最佳工艺条件,该工艺具有耗时短、提取率高、能量消耗少且工艺稳定等优点,可为阿维拉霉素的工业化生产提供指导。