靶向沉默Ku80对T-ALL细胞系Jurkat化疗敏感性影响的初步研究

目的:探讨靶向沉默Ku80对T-ALL细胞系Jurkat化疗敏感性的影响以及潜在机制。方法:通过RT-qPCR及Western blot技术检测6种不同血液肿瘤细胞系中Ku80基因的转录与表达水平;设计并构建Ku80特异性shRNA干扰质粒并转染T-ALL细胞系Jurkat后检测Ku80蛋白表达;CCK-8技术检测Ku80沉默后Jurkat细胞的增殖能力;软琼脂克隆形成技术、流式细胞术及Western blot技术分别检测Ku80沉默协同化疗药物依托泊苷(VP16)处理细胞4 h后Jurkat细胞的克隆形成能力、凋亡水平及DNA损伤蛋白γH2AX的表达水平。结果:在选取的6种不同血液肿瘤细胞系中,T-ALL细胞系Jurkat中Ku80的mRNA及蛋白水平均最高。构建的shRNA质粒成功靶向沉默了Jurkat细胞中Ku80的表达。Ku80靶向沉默后Jurkat细胞增殖能力明显下降(P<0.05);VP16孵育前后,Ku80靶向沉默均可显著降低Jurkat细胞克隆形成能力(P<0.01)、提高Jurkat细胞凋亡水平(P<0.01),并且γH2AX的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:靶向沉默Ku80表达可增强T-ALL细胞系Jurkat对化疗药物VP16的敏感性,这或与其造成的DNA损伤积累水平增加有关。

以骨质破坏为主的儿童恶性淋巴瘤临床及影像学特点

为初步探讨表现为骨质破坏的儿童恶性淋巴瘤临床及影像学特点、方案选择、疗效和预后,对6例表现为骨质破坏的儿童恶性淋巴瘤进行影像学检查、免疫组化检查、病理分型及选择方案化疗和放疗并长期随访。结果显示6例患儿CT和MRI检查均有不同骨质破坏,免疫分型为B型;采用MCP方案化疗后1例死亡。5例长期无病生存。提示表现为骨质破坏的恶性淋巴瘤临床少见报道,应通过影像学和病理检查及早确诊,可采用常规化疗方案结合放疗治疗,预后与临床分期相关。

儿童间变型大细胞非霍奇金淋巴瘤临床特点及疗效分析

为探讨儿童间变型大细胞非霍奇金淋巴瘤(CALCL)临床特点、方案选择及疗效分析,对4例儿童间变型大细胞性非霍奇金淋巴瘤患儿进行临床诊断、免疫分型、治疗、随访及疗效总结。结果:4例CALCL患儿中,CD30^+3例,T细胞型3例,B细胞型1例;部分缓解1例。完全缓解3例,其中1例CR 7月后脑膜复发。结论:间变型大细胞淋巴瘤(ALCL)为非霍奇金淋巴瘤的一种特殊类型,临床表现多样,与其他恶性淋巴瘤相比恶性程度稍低,较少累及骨髓,预后较好,但与免疫分型及临床分期密切相关。

汉族人巯基嘌呤甲基转移酶基因候选单核苷酸多态性筛选

目的 对中国汉族人巯基嘌呤甲基转移酶 (TPMT)单核苷酸多态性 (SNPs)频率出现较高的热点区域进行筛选 ,以期发现新的候选SNPs ,为汉族人TPMT基因型检测提供完整的位点和理论依据。方法 采用ABI荧光标记自动测序仪检测TPMT 4个外显子及其周围部分内含子序列 ,确定候选SNPs位置和类型。结果 初步发现 3 0人份汉族人DNA样本中存在未见报导的 3个候选SNPs。结论 汉族人群中存在多种TPMT基因遗传多态性 。

滋养层细胞与原代白血病细胞共培养体系的建立及其意义

目的：建立一套体外培养前B急性淋巴细胞白血病（ALL）原代细胞的方法，并尝试进行难治性白血病克隆的鉴定。方法：采用来源于骨髓的基质细胞HS-5作为滋养层细胞与原代白血病细胞进行双相培养。并通过药敏和凋亡检测进行双相培养体系生物动力学评估。结果：双相滋养层培养体系能够耐受细胞毒药物的毒性；8例前B急淋白血病原代细胞标本在基质滋养层支持下离体72h存活率20．4％～68．3％不等。与无滋养层支持或基质细胞上清液支持的标本相比存活率有显著性提高；其中1例标本的体外生长与有否滋养层支持无关，怀疑为难治性白血病克隆。结论：骨髓基质细胞来源的滋养层具有一定的体外支持白血病细胞存活的能力，但存在个体差异，与肿瘤细胞本身生物学特征有关；利用双相培养体系可以在体外早期初步鉴别出难治性白血病克隆并早期制定干预措施。

儿童非霍奇金淋巴瘤临床特点及疗效

目的 :分析儿童非霍奇金淋巴瘤 (NHL)早期临床症状的多样性及远期临床疗效。方法 :35例NHL中 12例为Ⅲ期NHL ,2 3例为Ⅳ期NHL。初发病例 2 7例 ,复发 8例。Ⅳ期和Ⅲ期NHL(T细胞型 )患者予MCP 841方案 ,Ⅲ期B组细胞型患者予MCP 842方案。化疗前后采用综合措施防治各种并发症。结果 :所有病例经MCP 841和MCP 842方案序贯化疗后持续完全缓解 (CCR) 2 4例 (6 8.6 % )。CCR >5年 10例 ,CCR中位时间 2 9个月。序贯方案中的强化疗方案应用后骨髓抑制明显 ,但无感染相关死亡 ,无严重出血 ,无明显肝、肾和心脏等重要脏器损伤。结论 :儿童NHL早期临床表现具多样性且不典型 ,容易误诊 ,必须予以足够重视。确诊病例经MCP 841和MCP 842方案序贯治疗后 ,临床疗效较好 ,毒副反应小且较易恢复 。

血液肿瘤儿童及其家长心理状况

目的 :了解住院血液肿瘤儿童及其家长的心理状况。方法 :采用艾森克人格问卷 (儿童 )(EPQ)、Achenbach儿童行为评定量表 (CBCL) ,对 5 7例住院血液肿瘤儿童进行个性、行为心理测试 ;采用90项症状自评量表 (SCL -90 )对其家长进行心理卫生状况调查。结果 :血液肿瘤患儿E质个性低于对照组(P <0 0 5 )。行为问题发生率为 2 1 1% ,男孩多有交往不良、躯体诉述、违纪 ,女孩表现为抑郁、社会退缩。血液肿瘤组家长各项因子分均高于对照组 (P <0 0 1)。患儿的行为问题与家长的心理卫生状况有显著的相关性。结论 :血液肿瘤儿童及家长 -这一特殊群体的心理状况应引起高度重视 ,制订综合的治疗方案是提高生命质量的关键。

DICE方案治疗难治和复发性非霍奇金淋巴瘤的疗效分析

背景与目的:目前对于难治性和复发性非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin)slymphoma,NHL)尚无标准解救化疗方案,本文旨在探讨DICE方案(地塞米松,异环磷酰胺,顺铂及VP-16)治疗难治和复发性NHL的疗效和不良反应。方法:80例难治和复发性NHL患者,其中T细胞NHL25例,B细胞NHL55例,既往均接受过6个周期的CHOP化疗方案无缓解。现采用DICE方案对患者进行解救治疗,并对毒副反应加以评估、预防及治疗。结果:80例患者接受6个周期DICE方案化疗后,总体有效率为56.3%,完全缓解率为27.5%;T、B细胞NHL有效率分别为48.0%、60.0%,完全缓解率为16.0%、32.7%(P>0.05);经DICE方案治疗的患者出现骨髓抑制、消化系统反应、脱发以及电解质紊乱发生率增高,经过治疗均恢复,无治疗相关死亡。结论:DICE方案治疗难治和复发性NHL有效。

上海地区粒细胞缺乏伴肺部感染血液病患者呼吸道分离细菌及耐药性多中心回顾性研究

目的了解上海地区中性粒细胞缺乏(粒缺)伴肺部感染血液病患者呼吸道分泌物检出病原菌的分布及耐药情况。方法回顾性收集2012年1月-2014年12月上海市12所医院血液科粒缺伴肺部感染住院患者呼吸道分泌物分离菌株的临床资料、药敏结果,分析病原菌分布及其药敏数据,比较不同原发疾病病原菌分布之间的差异。结果共分离病原菌623株,其中革兰阳性菌138株(22.2%),革兰阴性菌485株(77.8%),非发酵菌占革兰阴性菌的60.2%(292株)。淋巴瘤患者标本中分离革兰阳性菌构成比(35.0%)高于急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病患者。居前5位的细菌分别是嗜麦芽窄食单胞菌(104株,16.7%)、肺炎克雷伯菌(88株,14.1%)、鲍曼不动杆菌(62株,10.0%)、铜绿假单胞菌(56株,9.0%)、金黄色葡萄球菌(48株,7.7%)。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素敏感率>98%,铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为24.3%、8.9%,嗜麦芽窄食单胞菌对左氧氟沙星、米诺环素、复方磺胺甲口恶唑敏感率>90%,鲍曼不动杆菌对阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率低于10%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为71.4%,未发现耐万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的金黄色葡萄球菌。结论粒缺伴肺部感染患者呼吸道分泌物分离菌株以革兰阴性菌占多数,其中非发酵菌占50%以上,细菌耐药率整体低于CHINET全国医院大样本监测结果。

超低剂量地西他滨和环孢素对低危及中危-1型骨髓增生异常综合征的临床疗效比较

目的:比较地西他滨与环孢素治疗低危及中危-1型骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效和不良反应的差别。方法:回顾性分析上海市同济医院血液内科在近3年中收治的27例中低危MDS患者临床资料;患者分为两组:地西他滨组(11例)和环孢素组(16例),分别采用超低剂量地西他滨和环孢素治疗对其临床疗效和不良反应进行了评估。结果:接受超低剂量地西他滨(DAC)治疗的11例中、低危MDS患者中,血液学改善4例(36.4%);无效7例(63.6%),总有效率36.4%,无效者包括未缓解6例(54.5%),死亡1例(9.1%);1年内死亡3例,总生存(overall survival,OS)率为72.7%,其死亡的主要原因为骨髓抑制及感染。接受环孢素(CsA)治疗的16例患者中,获得血液学改善10例(62.5%),无效6例(37.5%),总有效率62.5%,无效者全部为未缓解病例;1年内死亡患者0例,1年的OS值为100%。两组患者治疗期间中性粒细胞、血红蛋白、血小板的变化无统计学差异。结论:地西他滨治疗中低危MDS临床疗效未表明优于环孢素(P=0.252),且感染及骨髓抑制副作用明显,1年总生存率低于环孢素(P=0.027),但本研究病例数少,随访时间短,仍需扩大病例长期随访观察。

血液肿瘤患儿及其家长心理特点的对照研究

为了解血液肿瘤患儿及其家长的心理特点 ,制定综合治疗方案和提高生活质量提供依据 ,采用艾森克人格问卷 (儿童 ) (EPQ )、Achenbach儿童行为评定量表 (CBCL)对57例年龄6岁～11岁的血液肿瘤患儿进行个性、行为的心理测试 ,采用90项症状自评量表 (SCL—90)对57例患儿家长进行心理卫生状况调查。结果表明 ,血液肿瘤患儿E质个性低于对照组 (P<0.05) ;行为问题发生率为21.1 % ,男孩多有交往不良、躯体诉述、违纪 ,女孩表现为抑郁、社会退缩 ;血液肿瘤组患儿家长各项因子分均高于对照组 ,两组比较差异有极显著意义 (P<0.01) ;患儿的行为问题与家长的心理卫生状况有显著的相关性。认为血液肿瘤患儿的个性、行为问题以及家长心理状况应引起医护人员的关注 ,适当的心理干预是必要的。

阿柔比星联合中剂量阿糖胞苷诱导治疗难治和复发性急性髓样白血病的疗效

目的:探讨阿柔比星(aclacinomycin,Acla)联合中剂量阿糖胞苷(intermediate-dose cytarabine,IDAra-C)治疗难治和复发性急性髓样白血病(acute myeloid leukemia,AML)的疗效和不良反应。方法:26例难治和复发性AML患者接受Acla联合IDAra-C方案进行解救治疗,评估不良反应和疗效。结果:26例患者接受2个周期Acla联合IDAra-C方案的化疗后,12例完全缓解,7例部分缓解,7例无缓解,1例因治疗过程中发生严重感染而死亡。结论:Acla联合IDAra-C方案可作为难治和复发性AML再诱导治疗的一种选择,患者大多耐受良好。

利用siRNA靶向沉默Jeko-1细胞survivin mRNA基因的实验研究

本研究旨在探讨Survivin基因在淋巴瘤细胞中的生物学作用,为将来以Survivin为靶点治疗套细胞淋巴瘤提供实验室证据。体外化学合成针对survivin mRNA基因的siRNA片段,通过DMRIE-C转染Jeko-1细胞,以无关siRNA、未转染的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用CCK-8法检测转染24、48、72 h对细胞增殖的影响。结果表明,与未转染的空白组相比,siRNA转染Jeko-1细胞后24、48、72 h survivin mRNA的相对表达量分别为0.49±0.03、0.38±0.02和0.17±0.02;细胞增殖抑制率分别为(31.2±2.1)%、(43.3±3.4)%和(52.6±2.5)%;细胞凋亡率分别为(6.3±0.5)%、(13.5±1.1)%和(23.6±1.6)%;survivin蛋白表达水平逐步减低。结论:靶向survivin的siRNA能在体外特异性下调目的基因survivin mRNA和蛋白的表达,表现出抑制Jeko-1细胞增殖和促使其凋亡的生物学效应,survivin基因有望成为淋巴瘤治疗的一个药物靶点。

原发性颅内低压综合征的诊断与治疗

本文分析２８例原发性颅内低压综合征的诊断和治疗。全部病例症状典型，均有坐立体位性头痛、项强等。腰穿压力≤０．６８６ｋＰａ，其中３例负压；脑脊液含少许红细胞，蛋白含量增高。经头低脚高位卧床休息，并补给大量低渗液体后，一般３周左右恢复，预后良好。文中讨论了头痛的原因和颅内低压的发病机理。

1例由原发性骨髓纤维化转化为急性巨核细胞白血病患者骨髓MRI及相关基因的表达变化

目的报告1例我院诊治的由原发性骨髓纤维化转变为急性巨核细胞白血病的病例,并讨论原发性骨髓纤维化与急性巨核细胞白血病在MRI骨髓表现的改变及部分相关基因表达。方法对我院1例由原发性骨髓纤维化转化为急性巨核细胞白血病(AML-M7)的患者在转化前后进行骨髓细胞形态学、遗传学、相关基因检测和髂骨骨髓的MRI检查,并予以化疗。结果患者染色体核型在转化前后均为正常核型;GFI1/GFI1B、VEGF及其受体表达在缓解前后均有明显改变;处于原发性骨髓纤维化阶段时髂骨骨髓在MRI上表现为T1WI及T2WI上的片状低信号,转化为AML-M7后T2WI上表现为散在高信号;患者经IDA+HAE两疗程后缓解。结论原发性骨髓纤维化与AML-M7的骨髓MRI表现有明显的改变,引起该改变的原因与构成骨髓的细胞成分及局部微血管环境的改变有关;转化后的AML-M7生物学特征发生明显改变,经HAE治疗仍可能达到完全缓解。

壳聚糖及其衍生物与碘的络合物的抑菌性质研究

利用壳聚糖(CTS)、水杨醛改性壳聚糖(S-CTS)和还原水杨醛改性壳聚糖(RS-CTS)与碘以不同质量比制备络合物,通过碘量法测络合物的摩尔比,UV光谱和IR光谱对络合物进行了表征。考察了CTS和RS-CTS与碘络合物的抑菌性质。结果表明,壳聚糖及其衍生物与碘络合物摩尔比(壳聚糖及其衍生物结构单元与碘之比)分别为:n(CTS)∶n(I2)=1∶0.38,n(S-CTS)∶n(I2)=1∶0.85,n(RS-CTS)∶n(I2)=1∶0.73。CTS和RS-CTS与碘的络合物对金黄色葡萄球菌抑菌敏感度为高度敏感。

2种CCK-8试剂最佳实验条件比较

在细胞学实验中，MTT（噻唑蓝）比色法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点，而被广泛使用，但其操作较繁琐，需加入二甲基亚砜（DMSO）溶解甲腆颗粒，且往往因溶解不全而对实验结果造成影响，为克服MTT法的不足，近年来出现了另外一些检测试剂，如XTr试剂、MTS试剂，国外研发出了1种新型的检测方法CCK-8（cellcountingkit-8），其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性，

地西他滨联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病疗效观察

目的比较地西他滨联合CAG方案与标准IA方案治疗老年急性髓系白血病患者的临床疗效及安全性。方法回顾性分析20例接受地西他滨联合CAG方案、23例接受IA方案治疗的初发老年AML患者的临床资料,分别比较两组患者的总反应率（ORR）、总生存率（OS）及不良反应发生率。结果 43例患者的ORR为58.14%,地西他滨联合CAG组及IA组的ORR分别为65%、52.2%,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。截至2015年8月31日,16例存活,25例死亡,2例失访,中位随访时间10（1-34）个月,2年OS率为11.63%,两组1年OS率分别为50%、39.13%,差异无统计学意义（P〉0.05）。39例患者出现感染,25例有出血,两组患者在感染发生率、出血发生率差异无统计学意义。两组的红细胞输注量分别为5.35 U、8.30 U,单采血小板输注量分别为1.85 U、3.48 U,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论地西他滨联合CAG方案和IA方案治疗老年AML患者均有较好的疗效,地西他滨联合CAG方案CR率及OR率相对较高。两组治疗副反应相当,但地西他滨联合CAG组骨髓造血恢复较快。

血液肿瘤患儿个性、行为问题的调查研究

为研究血液肿瘤患儿的行为、个性特点 ,采用艾森克个性问卷(儿童)手册(EPQ)、Achenbach儿童行为评定量表(CBCL) ,对57例病程1年～5年 ,年龄6岁～11岁的血液肿瘤患儿进行个性、行为的心理测试。结果显示 :血液肿瘤患儿E质个性低于对照组(P<0.05) ;行为问题发生率为21.1 % ,男孩多有交往不良、躯体诉述、违纪 ,女孩表现为抑郁、社交退缩 ;患儿的个性与行为之间存在相关关系。提示血液肿瘤患儿表现为内向个性特点 。