环境微生物学实验教学模式改革

以"融会贯通,学以致用,探索创新"为课程培养目标,构建环境微生物学实验教学新模式,将现有实验分为操作性实验、示范性实验、参观性实验、多媒体演示实验和自主性实验5个模块,旨在突出课程专业地位,优化实验教学方式,完善人才培育理念。经过探索与实践,取得较好的效果。

一株能转化β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的菌株G20的分离与鉴定

从浙江杭州地区的土壤分离、筛选到1株能转化β-氨基丙腈生产β-氨基丙酸的苗株G20。对该菌进行形态特征观察、生理生化测定、Biolog GP2鉴定以及16S rDNA序列相似性和系统发育分析,确定G20为红串红球菌(Rhodococcus erythropolis)。其特征:培养48h后菌落呈桔黄色,干燥。隆起,圆形;电镜观察.为长杆菌,大小(0.3～0.8)μm×(2～5)μm;革兰氏阳性菌;能较强利用Biolog系统95种碳源中的25种,与红串红球菌的相似性100%,相似性指数为0.58;以16S rDNA序列为基础构建包括15株邻近种属细菌在内的系统发育树,其中与红串红球菌的相似性最高.

水体生态系统对不同浓度水平苯酚污染的急性毒性响应

针对浙江某地苯酚泄漏事件,结合实地监测和实验室研究,探索苯酚的水体污染化学行为对水体生态系统的影响和急性毒性效应.本研究选取水生生态系统中明亮发光杆菌T3、优势藻四尾栅藻Scenedesmus quadricauda以及模式鱼斑马鱼Brachydanio rerio为研究对象,探索水体中生产者、消费者及分解者等整个生态系统对不同苯酚浓度胁迫下的生态响应.结果表明,水生生物对苯酚污染浓度的生态响应差异显著,虽然苯酚对发光细菌、四尾栅藻及鱼体都具有一定的毒性影响,但四尾栅藻抑制率与苯酚浓度之间并没有良好的线性关系.发光细菌的相对发光率与苯酚浓度的关系表明,0.2—25 mg.L-1苯酚浓度对水体会产生低毒作用,而30—100 mg.L-1苯酚浓度对水体会产生中毒作用.苯酚对四尾栅藻的影响主要表现为光合作用的暗反应破坏,高浓度苯酚处理组中四尾栅藻会将残余苯酚浓度作为自身碳源而短暂地促进其生长.斑马鱼在苯酚浓度高于15 mg.L-1时,会发生体重下降、死亡率上升、呼吸急促、游动迅速以及导致水质变坏等现象,并且在100 mg.L-1苯酚浓度处理下,鱼体内富集大量苯酚,通过食物链进而对人类健康产生影响.

多氯联苯污染土壤好氧降解菌群的分离与鉴定

从浙江温岭和萧山长期受多氯联苯污染的土壤中,以联苯为唯一碳源和能源进行菌类的富集筛选共得到35株纯菌,其中革兰氏阴性菌占细菌总数的60%。对得到的35株菌株进行16SrRNA基因序列分析,结果显示温岭和萧山土壤中的优势菌属分别为寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)和潘多拉菌属(Pandoraea sp.)。挑选的4株细菌棒状杆菌(Corynebacterium sp.)WL8、芽孢杆菌(Bacillus sp.)WL10、微杆菌属(Microbacterium sp.)XS4和柠檬酸杆菌(Citrobacter sp.)XS7均可在联苯存在情况下共代谢降解2,3,4,5-四氯代多氯联苯(PCB61),其中从温岭土壤中筛选到的Corynebacteriumsp.WL8对PCB61的5d去除率达到了50%。

湿地水质与水系浮游细菌多样性关联研究

城市湿地水质受人类活动影响,其水系浮游细菌群落多样性也因水质状况不同而变化.以杭州西溪湿地国家公园为研究区,分析人类活动特征差异对河道水质及浮游细菌群落多样性的影响,测定溶解氧、氨氮、硝氮、总氮、总磷等主要理化指标,运用聚合酶链式反应与变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术,分析各水样中浮游细菌群落多样性,通过主成分分析与典型对应分析等统计手段,比较各项理化指标与细菌群落结构的相关性.研究结果表明:湿地河道水质受人类活动影响显著,呈中度~重度富营养化;河道水域内细菌群落总体多样性较高,且多样性指数与硝态氮、总氮、TSI()指数、电导率呈极显著负相关(r<-0.7,p<0.01),与水温呈极显著正相关(r>0.8,p<0.01),相较于硝态氮、总氮等单项指标,综合营养状态指数与细菌多样性指数间具有最高负相关性(r=-0.90,p<0.01).浮游细菌群落结构变化受多种理化指标共同影响,其中限制性营养元素氨氮为主要调控因子.

耐盐自养铁基反硝化菌的分离鉴定及特性研究

针对高盐、低C/N比废水脱氮难题,从实验室稳定运行的高效铁盐脱氮反应器中分离获得了一株耐盐自养反硝化菌株,命名为NF-5。形态观察表明,菌株NF-5个体呈杆状,大小(0.80~1.2)μm×(1.7~2.3)μm,革兰氏阳性;经生理生化试验和16S rRNA测序测定分析,菌株NF-5可归入Isoptericola属。菌株NF-5能够利用亚铁作为电子供体,利用硝酸盐作为电子受体。当起始硝氮浓度为50 mg·L^(-1)(铁氮比为5:1),菌株接种量OD_(600)为0.52(稀释18倍)时,7 d后反应体系中硝氮去除率为82%,硝氮去除速率高达0.31 mg N·(L·h)^(-1)。菌株NF-5耐盐性能良好,可耐受范围为10~50 g·NaCl·L^(-1),最适盐度为20 g·NaCl·L^(-1)。当盐浓度为50 g·NaCl·L^(-1)时,菌悬液中活细胞比例为54%,反应体系中反硝化活性仅下降47%。

表皮短杆菌ZJB-07021产R-酰胺酶培养条件的优化

采用响应面分析法(RSM)对R-酰胺酶产生菌Brevibacterium epidermidis ZJB-07021的发酵培养基进行了优化。首先运用了单因子试验筛选出了发酵培养的最佳pH与温度,在此基础上采用Plackett-Burman(PB)设计法,对8种影响产酶的因素进行评价,实验结果表明,葡萄糖、酵母粉与乙酰胺含量对菌株产酰胺酶的活力具有显著的影响。通过旋转中心组合实验考察了葡萄糖、酵母粉和乙酰胺这三个主要因素对菌株所产酰胺酶活力的影响。发酵培养基优化结果为葡萄糖17.00g/L,酵母粉15.74g/L,乙酰胺7.05g/L,采用优化后的发酵培养条件进行摇瓶发酵培养,酰胺酶的酶活达到72.14U/L,比优化前的初始发酵培养条件下的酶活提高了73.3%。

晚期妊娠合并子宫肌瘤63例治疗体会

目的探讨晚期妊娠合并子宫肌瘤在的合理治疗方法。方法回顾性分析2008年10月-2012年10月我院收治的63例晚期妊娠合并子宫肌瘤的处理方法以及产科结局作为观察组,并随机选取52例行单纯剖宫产患者为对照组,评价比较两组预后。结果 63例中经阴道分娩11例,剖宫产52例,其中同时行肌瘤剔除术49例,同时并子宫次全切除术1例,因肌瘤生长部位特殊行单纯剖宫产术3例。观察组与对照组在出血量、术后血红蛋白值、切口感染率、住院时间等方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论晚期妊娠并子宫肌瘤,可根据肌瘤大小、生长部位等条件选择相应的分娩方式,对符合条件者在行剖宫产术的同时行子宫肌瘤剔除术是安全可行的。

左氧氟沙星对子宫次全切除术患者感染中的有效性和安全性评价

目的：评价左氧氟沙星对子宫次全切除术患者感染的有效性和安全性。方法：收集2012年8月—2013年12月间妇产科在腹腔镜下子宫次全切除术患者病例资料112例,根据患者预防感染用药情况分为观察组（n=58）和对照组（n=54）;观察组患者予左氧氟沙星,静脉滴注预防感染,对照组患者予复方阿莫西林静脉滴注预防感染,观察并比较两组患者预防腹腔镜下子宫次全切除术围手术期感染的有效性和不良反应。结果：观察组患者预防感染有效率为96.55%,对照组患者预防感染有效率为94.44%,两组预防感染有效率经比较其差异无统计学意义（P〉0.05）;观察组患者不良反应发生率为3.45%明显低于对照组9.26%（P〈0.05）。结论：左氧氟沙星静脉滴注预防术后感染的疗效与对照组类同,安全性优于对照组。

环境微生物学课程内容体系和理论教学模式的探索与实践

环境微生物学是专业基础课,它是开启环境类专业科学大门的一把钥匙,也是破解环境类专业工程难题的一件利器。结合国家精品/资源共享课和学校专业核心课建设,课程组对环境微生物学的课程理论教学模式进行了积极的改革探索,构建了以解答微生物"是什么"、"有何用"和"怎么用"为主线的课程内容体系,提出了以"学生兼课"、"课堂讨论"、"专题讲座"、"课程论文"和"综合评价"为标志的课程理论教学模式。经过实践,成效显著。