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广州腹泻与健康非腹泻人群产气荚膜梭菌检出率及MLST分型
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作者 姚淑雯 邹洁 +3 位作者 钟华敏 杨敏 龙燕 梁秉绍 《检验医学与临床》 2024年第3期289-293,共5页
目的比较广州地区腹泻和健康非腹泻人群粪便中产气荚膜梭菌的检出率和序列分型的差异。方法此项前瞻性研究共收集了广州医科大学附属妇女儿童医疗中心2021年10—12月诊断为腹泻和健康非腹泻人群的粪便标本和腹泻患者大便肛管保存液标本... 目的比较广州地区腹泻和健康非腹泻人群粪便中产气荚膜梭菌的检出率和序列分型的差异。方法此项前瞻性研究共收集了广州医科大学附属妇女儿童医疗中心2021年10—12月诊断为腹泻和健康非腹泻人群的粪便标本和腹泻患者大便肛管保存液标本296例,按照标本类型与人群的不同,分为腹泻儿童粪便组(104例)、腹泻儿童肛管组(68例)、非腹泻儿童粪便组(30例)和非腹泻成人粪便组(94例)。采用疱肉培养基增菌并转血平板厌氧培养,分离并鉴定产气荚膜梭菌。从各组中随机选取部分产气荚膜梭菌进行多位点序列分型(MLST)。结果腹泻儿童粪便组产气荚膜梭菌检出率为36.5%(38/104);腹泻儿童肛管组产气荚膜梭菌检出率为16.2%(11/68);非腹泻儿童粪便组产气荚膜梭菌检出率为46.7%(14/30);非腹泻成人粪便组产气荚膜梭菌检出率为53.2%(50/94)。非腹泻人群(包括成人和儿童)产气荚膜梭菌检出率[51.6%(64/124)]比腹泻人群高[23.8%(41/172)],差异有统计学意义(P=0.02)。34株产气荚膜梭菌共分为31种序列(ST)型,以ST210最多,占8.82%,共发现18种新ST型,占52.92%。结论广州地区产气荚膜梭菌在腹泻和非腹泻人群粪便的检出率较高,且检测出不溶血型菌株。MLST分型为产气荚膜梭菌病原学溯源提供可靠依据。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 腹泻 食物中毒 检出率 多位点序列分型 全基因组测序
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金黄色葡萄球菌肠毒素B基因在大肠杆菌中的克隆及表达 被引量:5
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作者 李飞 周帅 +8 位作者 董慧 黄艳梅 梁秉绍 李娟 龙燕 王洁琳 谢永强 杨镒宇 周珍文 《检验医学与临床》 CAS 2016年第18期2553-2555,共3页
目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩... 目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增后,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,并与做相应酶切的pET-28α(+)连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序,用IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot印迹鉴定表达产物。结果成功扩增出SEB基因,基因大小为801bp,重组PET-28α(+)-SEB双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEB在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99%。经IPTG诱导后,pET-28α(+)-SEB/BL21在相应的相对分子质量(35×103)可见融合蛋白以包涵体形式表达,免疫印迹在相应分子量检测到目的蛋白。结论克隆了SEB基因,并成功在大肠杆菌BL21中以包涵体形式表达,为肠毒素B应用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素B 克隆 表达
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广州地区儿童分离株青霉素耐药肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因分型 被引量:6
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作者 黄艳梅 林晓敏 +5 位作者 麦嘉良 梁秉绍 谢永强 钟华敏 邓秋莲 周珍文 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第7期873-875,879,共4页
目的了解广州地区儿童分离株青霉素耐药肺炎链球菌(PNSP)的分子流行病学,为肺炎链球菌感染性疾病防控提供实验依据。方法设计特异性引物,PCR扩增PNSP青霉素结合蛋白基因PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP2B、PBP2X、PBP3,进行测序分析。并使用Hi... 目的了解广州地区儿童分离株青霉素耐药肺炎链球菌(PNSP)的分子流行病学,为肺炎链球菌感染性疾病防控提供实验依据。方法设计特异性引物,PCR扩增PNSP青霉素结合蛋白基因PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP2B、PBP2X、PBP3,进行测序分析。并使用Hinf I对PCR产物进行酶切,分析其限制性片段性长度多态性(RFLP)。结果成功提取PNSP的DNA、PCR结果显示:50株耐青霉素肺炎链球菌中:含PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP2B、PBP2X及PBP3的菌株阳性率分别为48.9%、64.4%、71.1%、31.1%、40.0%、31.1%。测序显示,它们与GenBank已知序列的同源性分别为99%、98%、100%、97%、95%、100%。使用Hinf I的RFLP分析显示:PBP1A、PBP1B、PBP2A、PBP3仅有一种基因型;PBP2B、PBP2X有两种基因型的,阳性率分别为71.4%、28.6%、66.7%、33.3%。结论广州肺炎链球菌儿童分离株耐青霉素基因的分布以PBP2A、PBP1B、PBP1A为主。使用Hinf I酶切,PBP2B、PBP2X具有两种基因型,其中优势型均大于65%。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 青霉素 耐药 青霉素结合蛋白
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例腹泻患儿轮状病毒和腺病毒检出率及流行特征 被引量:43
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作者 何艳明 梁秉绍 +3 位作者 姚淑雯 梁卓夫 龚四堂 周珍文 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第11期1872-1875,共4页
目的:了解广州地区儿童腹泻A组轮状病毒(RV-A)和腺病毒(Adv)感染情况和流行特征。方法:采用胶体金免疫层析技术对2015年1-12月来我院就诊2 171例腹泻患儿的粪便标本进行A组轮状病毒和腺病毒抗原检测及分析。结果:2 171例腹泻患儿粪便中,... 目的:了解广州地区儿童腹泻A组轮状病毒(RV-A)和腺病毒(Adv)感染情况和流行特征。方法:采用胶体金免疫层析技术对2015年1-12月来我院就诊2 171例腹泻患儿的粪便标本进行A组轮状病毒和腺病毒抗原检测及分析。结果:2 171例腹泻患儿粪便中,A组轮状病毒阳性率17.96%,腺病毒阳性率8.66%,A组轮状病毒和腺病毒双重感染阳性率3.45%。不同性别腹泻患儿的阳性检出率差异无显著性(P>0.05);A组轮状病毒感染的高发月份是1、2月和12月,阳性率分别为40.78%、32.61%和39.24%。以1月为最高;腺病毒感染的高发月份是5月和7月,阳性率分别为15.79%、15.89%;A组轮状病毒和腺病毒双重感染的高发月份是1月和12月,阳性率分别是7.01%和7.29%。>1岁龄~3岁儿童是病毒感染的高发年龄段。结论:A组轮状病毒及腺病毒感染是本地区儿童腹泻的重要病原,并且它们的发病具有明显的季节性。 展开更多
关键词 腹泻 儿童 轮状病毒 腺病毒
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2014~2019年广州地区血液肿瘤儿童血培养病原菌分布及耐药性特点分析 被引量:3
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作者 王洁琳 周珍文 +4 位作者 高飞 高秀蓉 邓露露 梁秉绍 朱素菲 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第5期82-86,共5页
目的探讨本中心儿童血液肿瘤患者血培养病原菌的分布及耐药特点,为临床合理诊疗提供参考。方法对该中心2014年~2019年儿童血液肿瘤科室送检血培养样本所分离的病原菌以及药敏结果进行回顾性分析。结果9396例患儿血培养标本共分离出病原... 目的探讨本中心儿童血液肿瘤患者血培养病原菌的分布及耐药特点,为临床合理诊疗提供参考。方法对该中心2014年~2019年儿童血液肿瘤科室送检血培养样本所分离的病原菌以及药敏结果进行回顾性分析。结果9396例患儿血培养标本共分离出病原菌538株,其中革兰阴性菌253株(47.03%)、革兰阳性菌242株(44.98%)、真菌43株(7.99%)。革兰阴性菌中以肺炎克雷伯菌(11.90%)、大肠埃希菌(10.04%)和铜绿假单胞菌(5.39%)为主,三者对氨苄西林及一代头孢均表现出极高的耐药率,而厄他培南、美罗培南等碳青霉烯类抗生素对三种革兰阴性菌保持了较好的抗菌活性。2014~2019年肺炎克雷伯菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南的耐药率差异有统计学意义(χ^2=11.328~15.203,P<0.05)。革兰氏阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌(17.47%)、缓症链球菌(10.60%)和金黄色葡萄球菌(4.28%)为主;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离率为30.80%,对青霉素G的耐药率高达100%,但对万古霉素、利奈唑胺及喹奴普汀均表现为敏感。真菌中热带假丝酵母菌(6.69%)占主要比例。结论儿童血液肿瘤患者感染的病原菌种类较多,多重耐药感染情况比较常见。明确病原菌种类及药敏结果,合理应用抗生素,对有效控制血液感染有重要意义。 展开更多
关键词 儿童 血液肿瘤 败血症 耐药性
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儿童尿液分析复检规则的探讨 被引量:3
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作者 何艳明 姚淑雯 +2 位作者 黄钰君 梁秉绍 刘海英 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第6期738-739,742,共3页
目的通过LabUMat尿液干化学分析仪(简称干化学)和Urised有形成分分析仪的检测结果与显微镜镜检结果的符合率,探讨尿液镜检的复检规则。方法收集1 040例门诊及住院儿童患者的尿液标本,先用朗迈全自动尿液分析仪进行尿液干化学和尿液有形... 目的通过LabUMat尿液干化学分析仪(简称干化学)和Urised有形成分分析仪的检测结果与显微镜镜检结果的符合率,探讨尿液镜检的复检规则。方法收集1 040例门诊及住院儿童患者的尿液标本,先用朗迈全自动尿液分析仪进行尿液干化学和尿液有形成分的检测,然后进行显微镜检测,探讨自动化尿液分析仪尿常规分析的复检规则;通过漏检率对规则进行评价,且能避免肾功能异常的患者漏诊的复检规则。用200例标本对该复检规则进行临床验证。结果用于研究复检规则的标本中,镜检结果阳性标本占58.65%,阴性标本占41.35%。在阳性检测标本中,以RBC阳性居多,RBC阳性标本占50%,WBC阳性标本占23.08%,CAST阳性标本占7.69%。设置规则的符合率87.5%,漏检率分别是2.9%。用200例尿液标本对复检规则进行验证,符合率89.52%,漏检率2.4%。结论干化学潜血(BLD),白细胞(LEU),蛋白(PRO)和Urised有形成分分析仪RBC,WBC,管型(CAST)的检测结果不相符,或相差2个级差均要进行复检。 展开更多
关键词 全自动分析仪 显微镜 复检规则
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女性患者肠道分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌多黏菌素耐药分析
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作者 姚淑雯 陈广兴 +10 位作者 谭晓明 李梅爱 谢永强 邓秋连 钟华敏 黄莲芬 梁秉绍 高飞 龙燕 吴德 周珍文 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第S01期56-59,共4页
目的调查某三甲妇幼保健院住院女性患者粪便分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对多黏菌素的耐药情况,并检测耐药基因mcr-1携带情况,为多黏菌素耐药菌的防控提供临床资料。方法使用中国蓝平板从女性住院患者大便分离革兰阴性杆菌,对疑似大肠... 目的调查某三甲妇幼保健院住院女性患者粪便分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对多黏菌素的耐药情况,并检测耐药基因mcr-1携带情况,为多黏菌素耐药菌的防控提供临床资料。方法使用中国蓝平板从女性住院患者大便分离革兰阴性杆菌,对疑似大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的菌落进行鉴定,提取基因组为模板,聚合酶链式反应(PCR)扩增mcr-1基因,手工肉汤稀释法对分离菌株进行多黏菌素B药敏实验,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对mcr-1阳性株进行同源性分析。结果从89例患者大便中分离出大肠埃希菌65株,肺炎克雷伯24株,其中3株大肠埃希菌对多黏菌素B耐药,此3株耐药菌mcr-1基因均阳性,所分离大肠埃希菌多黏菌素耐药率及mcr-1阳性率为4.62%,24株肺炎克雷伯未发现多黏菌素耐药及mcr-1基因,PFGE结果显示3株耐药菌株均为不同型的克隆株。结论所调查成人女性大便所分离大肠埃希菌多黏菌素B耐药率达4.62%,耐药菌株均携带mcr-1基因,建议临床加强大肠埃希菌多黏菌素的耐药监测。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 肺炎克雷伯 多黏菌素 mcr-1基因
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1700例广州市儿童幽门螺杆菌感染临床分析
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作者 李彩金 梁秉绍 容莉莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第A02期29-31,共3页
目的为了解广州地区有消化道症状儿童幽门螺杆菌感染状况及分布特征。方法收集广州市妇女儿童医疗中心2017年有消化道症状就诊的门诊及住院患儿粪便标本用免疫层析法做大便幽门螺杆菌抗原检测感染情况,并对其结果进行统计学分析。结果1... 目的为了解广州地区有消化道症状儿童幽门螺杆菌感染状况及分布特征。方法收集广州市妇女儿童医疗中心2017年有消化道症状就诊的门诊及住院患儿粪便标本用免疫层析法做大便幽门螺杆菌抗原检测感染情况,并对其结果进行统计学分析。结果1700例有消化道症状患儿中男977例,女723例,年龄0~14岁,1700例受检儿童幽门螺杆菌总阳性感染率为42.47%,其中男女儿童幽门螺杆菌感染阳性率分别为42.07%和43.01%,男女儿童感染阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论广州地区有消化道症状儿童幽门螺杆菌感染率较高,一岁以下婴儿是幽门螺杆菌的易感人群。因此加强对幽门螺杆菌的预防,最好从婴幼儿开始。 展开更多
关键词 儿童 幽门螺杆菌 感染率
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2018年广州地区学龄儿童鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的筛查及基因分型
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作者 林少香 梁秉绍 +5 位作者 张超 兰芳俊 刘笑春 谢世营 周珍文 蔡安季 《热带医学杂志》 CAS 2023年第7期1020-1023,1038,共5页
目的分析广州地区学龄儿童(6-12岁)鼻腔中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的携带情况,并进行药敏实验及多位点序列基因分型(MLST)。方法采集学龄儿童鼻拭子1029份,接种于哥伦比亚血琼脂,挑取具有金黄色葡萄球菌菌落形态特征的细菌进行... 目的分析广州地区学龄儿童(6-12岁)鼻腔中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的携带情况,并进行药敏实验及多位点序列基因分型(MLST)。方法采集学龄儿童鼻拭子1029份,接种于哥伦比亚血琼脂,挑取具有金黄色葡萄球菌菌落形态特征的细菌进行全自动微生物鉴定系统(VITEK)鉴定,对已鉴定为金黄色葡萄球菌的菌株进行药敏实验并对MRSA菌株进行耐药分析及MLST基因分型。结果学龄儿童鼻腔携带金黄色葡萄球菌率为35.3%(363/1029),MRSA携带率为4.5%(46/1029),MRSA菌株对青霉素和头孢西丁耐药率为100.0%,对克林霉素和红霉素耐药率分别为69.6%、63.0%,对四环素耐药率为10.9%,对磺胺甲恶唑-甲氧苄啶、庆大霉素耐药率为2.2%,对利福平、左旋沙星、莫西沙星、西普沙星耐药率为4.4%,未检出万古霉素、呋喃妥因、替加环素、利奈唑胺和奎奴普丁/达福普汀耐药的菌株。46株MRSA菌株鉴定为12种ST基因型,主要的基因型为ST45型占58.7%,ST59型占15.2%,ST338型占4.4%,ST508型占4.4%。其中ST45、ST59基因型均对四环素耐药(P=0.0009、0.0346),其他抗生素的耐药各基因型差异无统计学意义(P>0.05)。结论广州健康学龄儿童鼻腔中MRSA携带率为4.5%,其主要基因型为ST45型、ST59型。应加强学龄儿童健康宣教,关注手鼻卫生,减少MRSA在儿童中的交叉感染。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 鼻腔 MLST分型 儿童
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金黄色葡萄球菌LDH多克隆抗体制备及其交叉反应性 被引量:3
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作者 梁秉绍 杨丽媛 +6 位作者 董慧 李飞 黄艳梅 陈吟霜 谢永强 钟华敏 周珍文 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第33期6436-6439,共4页
目的:在原核载体中表达、纯化金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶,免疫小鼠获得多克隆抗体,使用多克隆抗体分析与其它菌种的交叉反应性。方法:复苏p ET28a-ldh/Bl21重组菌,IPTG诱导重组融合蛋白表达、以抗HIS标签的单克隆抗体进行western-blot鉴... 目的:在原核载体中表达、纯化金黄色葡萄球菌乳酸脱氢酶,免疫小鼠获得多克隆抗体,使用多克隆抗体分析与其它菌种的交叉反应性。方法:复苏p ET28a-ldh/Bl21重组菌,IPTG诱导重组融合蛋白表达、以抗HIS标签的单克隆抗体进行western-blot鉴定重组蛋白。使用纯化的重组蛋白以及相应的佐剂免疫小鼠,利用ELISA测定血清抗体效价,并使用小鼠抗血清进行免疫印迹法鉴定重组蛋白的反应原性及其与金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌的交叉反应性。结果:SDS-PAGE电泳在39 KDa处可见目的条带,免疫印迹法验证了重组LDH的表达,纯化后获得2.8 mg重组蛋白。纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性Ig G效价为1:50000,western-blot鉴定显示所制备的多克隆抗血清能分别识别金黄色葡萄球菌重组及天然乳酸脱氢酶,但不识别表皮葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌中天然乳酸脱氢酶。结论:纯化的LDH具有良好的免疫活性,免疫小鼠获得高滴度的多克隆抗体。使用多克隆抗体western-blot显示与其它菌种LDH不存在交叉反应性,为后续使用该重组蛋白进行金黄色葡萄球菌感染的诊断研究奠定基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 乳酸脱氢酶 多克隆抗体 交叉反应性
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花生主要变应原Ara h2的克隆及原核表达 被引量:2
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作者 董慧 梁秉绍 +3 位作者 黄艳梅 李飞 陈吟霜 周珍文 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第4期624-627,共4页
目的:在原核载体中克隆、表达花生主要变应原Ara h2,为其重组变应原应用研究奠定基础。方法:合成花生主要变应原Ara h2基因,设计特异性引物行PCR扩增,经Eco RⅠ、HindⅢ双酶切后与做相应酶切的pET-28a载体连接,转化大肠杆菌BL21,提取质... 目的:在原核载体中克隆、表达花生主要变应原Ara h2,为其重组变应原应用研究奠定基础。方法:合成花生主要变应原Ara h2基因,设计特异性引物行PCR扩增,经Eco RⅠ、HindⅢ双酶切后与做相应酶切的pET-28a载体连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序分析,使用IPTG诱导融合蛋白表达,使用Ara h2特异性多克隆抗体对表达产物进行免疫印迹鉴定。结果:成功扩增了Ara h2基因,重组质粒双酶切见目的条带,基因测序显示Ara h2在正确开放阅读框中,基因长423bp,编码140个氨基酸,预测的等电点为5.3,分子量约16660.17 Da,基因比对分析显示其与相关报道的核苷酸序列一致性达100%。重组pET-28a-Ara h2/BL21经0.6 mmol/L IPTG诱导表达可见重组融合蛋白在相应分子量大量表达,使用Ara h2多克隆抗体免疫印迹法能检测到目的蛋白。结论:成功克隆、表达了花生主要变应原Ara h2,为其重组变应原应用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 花生 变应原 ARA H2 克隆 表达
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广州地区腹泻患儿肠致病性大肠杆菌的血清型及耐药性 被引量:2
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作者 梁秉绍 黄艳梅 +5 位作者 麦嘉良 钟华敏 谢永强 邓秋连 黄莲芬 周珍文 《热带医学杂志》 CAS 2018年第7期919-922,共4页
目的调查广州地区腹泻患儿肠致病性大肠杆菌(EPEC)感染的情况,分析EPEC菌株的血清型及耐药性,为更有效地防治EPEC感染提供重要基础数据。方法回顾性分析2014年7月-2016年12月广州市妇女儿童医疗中心3 013名提供大便培养的腹泻患儿的临... 目的调查广州地区腹泻患儿肠致病性大肠杆菌(EPEC)感染的情况,分析EPEC菌株的血清型及耐药性,为更有效地防治EPEC感染提供重要基础数据。方法回顾性分析2014年7月-2016年12月广州市妇女儿童医疗中心3 013名提供大便培养的腹泻患儿的临床资料,统计EPEC感染的流行特征,并分析EPEC阳性菌株的血清型分布及耐药情况。结果在3 013份急性腹泻患儿提供的大便培养标本中分离到96株无重复的EPEC,分离率为3.19%。以1~2岁和大于5岁年龄组检出率相对较高,年龄组间检出率的差异有统计学意义(P<0.05)。以冬、夏季检出率较高,季节间检出率差异亦有统计学意义(P<0.05)。共分为12个血清型,其中血清型O86K61、O125K70、O44K74、O126K71为优势血清型。EPEC对抗生素耐药率最高为氨苄西林(86.46%),其次为复方新诺明(76.04%)和头孢噻肟(57.29%)。未发现对亚胺培南耐药菌株,其他抗生素均有一定程度的耐药。多重耐药率为61.46%。结论 EPEC是婴幼儿腹泻的重要病原菌,O86K61为最常见血清型,该菌多重耐药严重,应加强监测并根据药物敏感试验合理选择抗生素进行治疗。 展开更多
关键词 腹泻 肠致病性大肠杆菌 血清型 耐药
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儿童粪便金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及分析 被引量:5
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作者 艾晓兰 龙燕 +11 位作者 梁秉绍 姚淑雯 刘云锋 高飞 麦嘉良 熊志乐 梁珠薇 王洁琳 陈显堂 杨敏 龚四堂 周珍文 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期291-297,共7页
目的探讨广州地区就诊患儿粪便分离金黄色葡萄球菌毒素基因的分布状况和临床诊断及各分子分型的关系。方法收集2018年8至11月广州市妇女儿童医疗中心3所院区就诊儿童2059份非重复粪便标本所分离的412株金黄色葡萄球菌,采集相关临床信息... 目的探讨广州地区就诊患儿粪便分离金黄色葡萄球菌毒素基因的分布状况和临床诊断及各分子分型的关系。方法收集2018年8至11月广州市妇女儿童医疗中心3所院区就诊儿童2059份非重复粪便标本所分离的412株金黄色葡萄球菌,采集相关临床信息。提取菌株DNA后用PCR的方法检测相关的毒素基因,其中包括葡萄球菌肠毒素(SE)基因(sea、seb、sec、sed、see)以及杀白细胞毒素基因(pvl),采用多位点序列分型(MLST)的方法对菌株进行分子分型,最后采用χ^(²)检验对数据进行比较。结果从所分离的412株金黄色葡萄球菌中检测到256株(256/412,62.1%)至少含有1种肠毒素基因,携带率较高的依次为sec(125/412,30.3%)、seb(98/412,23.8%)和sea(66/412,16.0%),并且金黄色葡萄球菌pvl基因的携带率为18.7%(77/412)。其中分离自胃肠炎患者粪便的金黄色葡萄球菌sea基因检出率(58/319,18.2%)明显高于非胃肠炎组(8/93,8.6%)(χ^(²)=4.912,P=0.027),而在住院肺炎患者粪便中的金黄色葡萄球菌pvl基因检出率(8/21,38.1%)高于非肺炎组(6/47,12.8%)(χ^(²)=4.252,P=0.039)。并且金黄色葡萄球菌的毒素基因与特定的ST型密切相关,82.4%(28/34)的ST6携带sea基因,所有的ST338和ST59均携带seb基因,96%(48/50)的ST45携带sec基因,ST338的pvl基因携带率高达5/5。结论ST6型金黄色葡萄球菌产生的SEA毒素可能与儿童患者胃肠炎诊断呈密切相关。PVL毒力基因在社区获得性肺炎住院患儿金黄色葡萄球菌中的携带率高于非肺炎组,且与CC59克隆群密切相关。 展开更多
关键词 葡萄球菌 金黄色 细菌毒素类 肠毒素类 杀白细胞毒素类 多位点序列分型 儿童
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌儿童分离株外排泵基因与耐药关系 被引量:3
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作者 麦嘉良 罗美群 +6 位作者 黄艳梅 梁秉绍 谢永强 钟华敏 高飞 龙燕 周珍文 《热带医学杂志》 CAS 2019年第5期622-625,共4页
目的对广州市妇女儿童医疗中心患儿分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药表型,及3个外排泵基因NorA、MepA、SepA的携带情况进行调查,探讨外排泵与儿童MRSA分离株多重耐药的相关性。方法收集2013-2016年分离自就诊患儿的MRSA菌株,... 目的对广州市妇女儿童医疗中心患儿分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药表型,及3个外排泵基因NorA、MepA、SepA的携带情况进行调查,探讨外排泵与儿童MRSA分离株多重耐药的相关性。方法收集2013-2016年分离自就诊患儿的MRSA菌株,分析标本的基本信息和患儿的临床资料,并统计分析菌株抗生素的耐药情况。提取细菌基因组,运用PCR技术扩增3个外排泵基因并测序鉴定,采用卡方检验分析多重耐药外排泵基因携带模式与抗生素耐药率的相关性。结果收集了72株MRSA菌株,患儿以婴幼儿和新生儿为主,分别占62.50%、15.28%。分离自深部感染标本35例,其中血液标本28例,脑脊液标本6例,骨髓标本1例。所有MRSA菌株对万古霉素、替加环素、利奈唑烷、呋喃妥因、喹奴普汀/达福普汀敏感,对克林霉素的耐药率为79.17%、四环素耐药率为44.44%、庆大霉素的耐药率为11.11%,环丙沙星、利福平的耐药率为9.72%。所分离MRSA菌株中,SepA、NorA、MepA基因携带率分别为27.78%(20株)、47.22%(34株)、52.78%(38株)。携带外排泵基因的菌株对克林霉素的耐药率显著高于不携带外排泵基因的菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MRSA为儿童深部感染主要致病菌之一,儿童分离MRSA耐药情况严峻,所分离的MRSA大部分携带外排泵基因,克林霉素的耐药性与携带外排泵基因正相关。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 儿童 多重耐药 外排泵基因
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广州地区儿童血清中牛奶主要致敏蛋白组分sIgE的分布特征 被引量:2
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作者 梁珠薇 熊志乐 +7 位作者 刘云锋 梁秉绍 麦嘉良 姚淑雯 张超 蔡好 龚四堂 周珍文 《热带医学杂志》 CAS 2022年第7期920-924,共5页
目的分析广州地区牛奶特异性免疫球蛋白E(sIgE)阳性儿童血清中酪蛋白(CAS)、α-乳白蛋白(ALA)、β-乳球蛋白(BLG)sIgE的阳性分布特征。方法使用CAS、ALA、BLG包被聚乙烯板,建立间接酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,分析血清中牛奶sIgE阳性... 目的分析广州地区牛奶特异性免疫球蛋白E(sIgE)阳性儿童血清中酪蛋白(CAS)、α-乳白蛋白(ALA)、β-乳球蛋白(BLG)sIgE的阳性分布特征。方法使用CAS、ALA、BLG包被聚乙烯板,建立间接酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,分析血清中牛奶sIgE阳性儿童CAS、ALA及BLG sIgE的水平及分布情况。结果90例牛奶sIgE阳性儿童血清CAS、ALA、BLG sIgE OD_(450)(稀释30倍)分别为(0.16±0.17)、(0.17±0.18)、(0.18±0.17),显著高于对照组(0.05±0.04)、(0.05±0.06)、(0.06±0.05)(P均<0.05),阳性率分别为36.67%、42.22%、48.89%。男女性别间阳性率差异无统计学意义(P>0.05),3岁以下儿童三种致敏蛋白sIgE阳性率均显著高于6~13岁儿童。53.33%牛奶sIgE阳性儿童至少对CAS、ALA、BLG其中1种蛋白sIgE阳性,同时对此三种致敏蛋白sIgE阳性儿童有31.11%。结论大部分牛奶sIgE阳性儿童同时对2种以上牛奶致敏蛋白成分sIgE阳性,ALA和BLG为广州地区儿童牛奶致敏主要的组分,低年龄组儿童三种致敏蛋白sIgE阳性率显著高于高年龄组儿童。 展开更多
关键词 乳白蛋白 Β-乳球蛋白 酪蛋白 过敏 牛奶 儿童
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儿童肺炎患者支气管肺泡灌洗液病原菌分布及耐药性分析 被引量:5
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作者 龙燕 梁秉绍 +3 位作者 艾晓兰 高飞 王洁琳 徐晓明 《热带医学杂志》 CAS 2021年第8期1001-1005,共5页
目的分析儿童肺炎患者支气管肺泡灌洗液中分离病原菌的分布及其耐药情况,以指导临床抗生素合理使用。方法回顾性分析2015年1月-2018年12月广州市妇女儿童医疗中心7892例肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的细菌、真菌培养结果,采用WHONET5.6软... 目的分析儿童肺炎患者支气管肺泡灌洗液中分离病原菌的分布及其耐药情况,以指导临床抗生素合理使用。方法回顾性分析2015年1月-2018年12月广州市妇女儿童医疗中心7892例肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的细菌、真菌培养结果,采用WHONET5.6软件进行药敏结果统计。结果共分离1503株非重复菌株,阳性检出率为19.04%,其中革兰阴性杆菌670株(44.58%),革兰阳性球菌644株(42.85%),革兰阴性球菌105株(6.99%)及真菌83株(5.52%);肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及卡他莫拉菌为主要病原菌。肺炎链球菌多重耐药明显,金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为43.91%,二者均未发现耐万古霉素菌株。流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌中产β-内酰胺酶菌株检出率分别为46.84%和97.14%,但两者对加酶抑制剂复合物和四环素类抗生素均较敏感。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率为14.52%,中介率高达30.65%,明显高于头孢他啶。结论支气管肺泡灌洗液检查对儿童肺炎的病原学诊断有较高价值。细菌多重耐药现象明显,应根据药敏结果合理选择抗生素,提高临床疗效,延缓耐药发生。 展开更多
关键词 儿童 肺炎 支气管肺泡灌洗液 病原菌 耐药性
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1022例儿童感染沙门菌的流行特征及耐药分析 被引量:3
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作者 高飞 郑浩 +5 位作者 王洁琳 龙燕 邓秋连 梁秉绍 朱素菲 邱敏娟 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2021年第5期533-540,共8页
了解广州市妇女儿童医疗中心临床分离沙门菌的流行特征及耐药率。回顾分析1022例在我院临床分离的沙门菌,均进行血清学分型及药敏试验。研究表明,1022例沙门菌主要来源于粪便和血液;以3岁以下婴、幼儿组为主;季节分布呈夏、秋季高发;共... 了解广州市妇女儿童医疗中心临床分离沙门菌的流行特征及耐药率。回顾分析1022例在我院临床分离的沙门菌,均进行血清学分型及药敏试验。研究表明,1022例沙门菌主要来源于粪便和血液;以3岁以下婴、幼儿组为主;季节分布呈夏、秋季高发;共检测到45种血清型,以鼠伤寒沙门菌检出率最高(80.0%)。药敏结果显示,沙门菌对氨苄西林耐药率最高(85.9%),对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星的耐药率较低。粪便分离株对所检测抗菌药物的耐药率均高于血液分离株。多重耐药(MDR)沙门菌五年平均检出率8.9%,其中鼠伤寒沙门菌MDR率最低(6.8%)。儿童抗菌药物治疗要结合血清型及药敏结果慎重选择。 展开更多
关键词 儿童 沙门菌 细菌耐药率 多重耐药 血清型
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外周血IG和HFLC以及CRP在新生儿败血症中的应用价值
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作者 梁肖云 杨春妍 +5 位作者 郑浩 李文利 鲍丽娟 汪道文 梁秉绍 周珍文 《热带医学杂志》 CAS 2022年第10期1414-1417,1461,共5页
目的评估联合检测外周血中未成熟粒细胞(IG)、高荧光强度淋巴细胞(HFLC)和C反应蛋白(CRP)对新生儿败血症诊断的价值。方法选取广州市妇女儿童医疗中心2017年9月至2018年12月住院的110例有感染中毒症状的新生儿作为研究对象,其中败血症... 目的评估联合检测外周血中未成熟粒细胞(IG)、高荧光强度淋巴细胞(HFLC)和C反应蛋白(CRP)对新生儿败血症诊断的价值。方法选取广州市妇女儿童医疗中心2017年9月至2018年12月住院的110例有感染中毒症状的新生儿作为研究对象,其中败血症组48例,局部感染组62例。另选取60名同期健康体检的新生儿作为健康对照组。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价IG%、HFLC%、CRP诊断新生儿败血症的效能。结果败血症组IG明显高于局部感染组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HFLC与CRP在败血症组和局部感染组间比较差异无统计学意义(P>0.05),而健康对照组的IG、HFLC、CRP三项参数均明显低于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。三项参数联合诊断,ROC曲线下面积(AUC)达到0.898,敏感度为76.70%,特异度为87.50%,阳性预测值为0.742,阴性预测值为0.881。结论联合检测新生儿外周血中IG%、HFLC%和CRP对新生儿败血症早期诊断、早期合理用药干预具有重要参考价值。 展开更多
关键词 新生儿 败血症 未成熟粒细胞 高荧光强度淋巴细胞 C反应蛋白
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金黄色葡萄球菌阳性儿童血清EsxA特异性抗体的检测
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作者 黄艳梅 麦嘉良 +3 位作者 梁秉绍 谢永强 钟华敏 周珍文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第21期2599-2601,共3页
目的分析金黄色葡萄球菌培养阳性儿童血清EsxA特异性IgG、IgG1、IgG2水平,探讨金黄色葡萄球菌阳性儿童EsxA相关免疫特性,为其功能研究奠定基础。方法在使用抗生素治疗前收集经实验室鉴定为金黄色葡萄球菌阳性的儿童血清92例及健康体检... 目的分析金黄色葡萄球菌培养阳性儿童血清EsxA特异性IgG、IgG1、IgG2水平,探讨金黄色葡萄球菌阳性儿童EsxA相关免疫特性,为其功能研究奠定基础。方法在使用抗生素治疗前收集经实验室鉴定为金黄色葡萄球菌阳性的儿童血清92例及健康体检者血清92例,用纯化的EsxA重组蛋白包被ELISA板,检测血清EsxA特异性IgG、IgG1及IgG2吸光度。结果金黄色葡萄球菌阳性组血清IgG抗体、IgG1抗体、IgG2抗体吸光度值与对照组比较,差异均有统计学意义(P <0. 05)。92例金黄色葡萄球菌阳性儿童血清以痰液标本为主,占38. 0%;其次为皮肤脓液(占16. 3%)、咽拭子(占15. 2%)、扁桃体分泌物(占14. 1%)。结论金黄色葡萄球菌阳性儿童血清EsxA特异性IgG、IgG1、IgG2水平显著升高,提示EsxA可刺激机体产生体液免疫,机体免疫趋向Th1型。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 儿童 EsxA蛋白 免疫球蛋白
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