连体自撑式定型钢模板施工桥梁

济东铁路支线泗河特大桥和邹—济公路上行立交桥,设计采用钢筋混凝土扩大基础、双柱桥墩、桥帽和梁(板)结构,施工规模大,工期紧,质量要求高。为实现优质工程目标,确定以模板设计为中心,测量放线为先导,混凝土表面平整光滑为突破口;同时结全我处龙门架桥机运输机械化程度较高的优势,经方案比较。

艰难梭菌新型氧化还原酶Fnr的异源表达与纯化

目的了解艰难梭菌新型氧化还原酶Fnr的性质和催化功能。方法通过PCR扩增艰难梭菌的fnr基因片段,利用限制性内切酶NheⅠ、XhoⅠ对PCR产物进行双酶切,酶切片段插入经相同酶切处理的pET28b(+)质粒中,构建pET28b(+)-fnr重组表达载体,测序验证正确后转化至E.coli C41(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达目的蛋白,Ni-NTA柱亲和层析纯化后进行纯度及酶活性测定。结果成功构建了pET28b(+)-fnr重组表达载体,转化E.coli C41(DE3)高效表达重组蛋白Fnr。柱层析纯化后进行SDS-PAGE分析,该蛋白由两个大小分别约为51×103和33×103的亚基组成,具有NAD+依赖的NADPH还原TTC的活性。其酶所展现的性质一致,表明它们具有相同的生化功能。结论成功表达和纯化了艰难梭菌Fnr重组蛋白,该蛋白具有与其他专性厌氧菌对应的氧化还原酶活性,为其生理功能奠定研究了基础。