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顺铂诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制的研究 被引量:26
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作者 柳友清 邢辉 +4 位作者 韩晓兵 石小艳 梁缝奇 陈刚 马丁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-4,共4页
目的:研究顺铂在体外诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法测定顺铂对Hela细胞增殖的影响;流式细胞仪和Hochest33258检测药物作用前后的细胞凋亡情况;RT-PCR检测HPVE6的mRNA水平表达;WesternBlot测定HPVE6、p53、p21、Ba... 目的:研究顺铂在体外诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法测定顺铂对Hela细胞增殖的影响;流式细胞仪和Hochest33258检测药物作用前后的细胞凋亡情况;RT-PCR检测HPVE6的mRNA水平表达;WesternBlot测定HPVE6、p53、p21、Bax、Bcl-2蛋白水平的表达。结果:顺铂抑制Hela细胞生长呈时效和量效关系;经10μg/ml顺铂分别在12、24、36、48小时作用Hela细胞,亚G1峰与对照组有显著性差异;RT-PCR提示顺铂作用Hela细胞后HPVE6的mRNA水平表达逐渐降低;WesternBlot提示顺铂作用Hela细胞后HPVE6的蛋白水平表达逐渐降低,p53、p21和Bax蛋白水平表达逐步升高,Bcl-2的表达无变化。结论:顺铂通过抑制HPVE6的表达,恢复p53的功能,引起细胞凋亡,起到杀伤肿瘤的作用。 展开更多
关键词 细胞凋亡 顺铂 流式细胞仪HPV E6 BAX Bcl-2子宫颈癌
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顺铂诱导宫颈癌SiHa细胞周期阻滞及凋亡的研究 被引量:12
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作者 柳友清 邢辉 +4 位作者 韩晓兵 石小燕 梁缝奇 陈刚 马丁 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第4期248-251,共4页
目的:探讨顺铂在体外对宫颈癌SiHa细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法测定顺铂对SiHa细胞增殖的影响;DNA ladder和Hoechst33258检洲药物作用前后的细胞凋亡情况;流式细胞仪检测药物作用前后的周期阻滞和凋亡;Wester... 目的:探讨顺铂在体外对宫颈癌SiHa细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法测定顺铂对SiHa细胞增殖的影响;DNA ladder和Hoechst33258检洲药物作用前后的细胞凋亡情况;流式细胞仪检测药物作用前后的周期阻滞和凋亡;Western blot检测E6、p53和p21的表达。结果:顺铂抑制SiHa细胞生长呈时效和量效关系,10mol/L顺铂作用SiHa细胞12、24、36和48h,亚G1峰分别为(3.07±0.15)%、(5.18±0.28)%、(17.73±1.20)%和(32.55±2.74)%,与对照组比较差异均有统计学意义,t值分别为32.80、31.46、29.73和25.99,P值均为0.000;顺铂能使SiHa细胞发生G2~M期阻滞,24h达到最高(66.43±4.62)%,凋亡开始;Hoechst33258实验组可见凋亡细胞;琼脂糖凝肢电泳出现DNA梯形条带;Western blot提示,顺铂作用SiHa细胞后HPV E6的蛋白水平表达逐渐降低,p53和p21蛋白水平表达逐步升高。结论:顺铂随着药物浓度和作用时间的增加对SiHa细胞的体外抑制效应增加,顺铂通过引起SiHa细胞G2~M周期阻滞及抑制HPV E6蛋白的表达,恢复p53功能,启动凋亡,起到杀伤肿瘤作用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤/病理学 顺铂/药理学 细胞凋亡 病毒蛋白质类 蛋白质P53 蛋白质P21 流式细胞术
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Apoptosis of HeLa Cells Induced by Cisplatin and Its Mechanism
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作者 柳友清 邢辉 +5 位作者 韩晓兵 石小燕 梁缝奇 陈刚 卢运萍 马丁 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第2期197-199,共3页
To study the apoptosis induced by cisplatin in cervical cancer cell line HeLa and its mechanism, cell growth inhibition of cisplatin on HeLa cells was analyzed by MTT assay. Cell apoptosis was examined by cytometry an... To study the apoptosis induced by cisplatin in cervical cancer cell line HeLa and its mechanism, cell growth inhibition of cisplatin on HeLa cells was analyzed by MTT assay. Cell apoptosis was examined by cytometry and Hoechst33258 staining after treatment with cisplatin. The effects of cisplatin on transcription of E6 were analyzed by RT-PCR. The protein expressions of E6, p53, p21, Bax and Bcl-2 were studied by Western blotting. Cisplatin inhibited proliferation in a time- and dose-dependant manner. Cytometically, sub-G1 peak showed higher apoptosis rates in the experimental group than those in the control. Hoechst33258staining exhibited apoptosis induced by cisplatin. RT-PCR revealed that cisplatin decreased transcription of E6. Western blotting showed that cisplatin decreased protein expression of E6 and increased protein expression of p53, p21and Bax. It had no effect on protein expression of Bcl-2. It is concluded that cisplatin can induce apoptosis in HeLa cells by suppressing HPV E6 and thereby restoring the function of p53. 展开更多
关键词 cell apoptosis CISPLATIN flow cytometry HPV E6 BAX Bcl-2 cervix cancer
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