2015-2017年聊城市腹泻病例中沙门氏菌分子分型及耐药性研究

目的对2015-2017年聊城地区主动监测哨点医院腹泻患者中分离到的沙门氏菌进行病原学分析,了解沙门氏菌的感染现状及血清型分布、分子分型特征和耐药情况。方法对2015-2017年分离自腹泻患者的41株沙门氏菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和药物敏感性测试,并用BioNumerics软件分析菌株之间的相似度,用微量肉汤稀释法进行菌株耐药性检测。结果腹泻患者中沙门氏菌总分离率为7.16%,且不同年龄段分离率存在差异。分离的沙门氏菌共有8个血清型,其中鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌分别为18株和7株,为优势血清型;PFGE分析发现41株菌共产生了34种不同的PFGE带型,相同血清型的沙门氏菌的PFGE带型比较相近,不同血清型的PFGE带型具有多态性,未发现菌株成簇存在现象。测试菌株对四环素耐药率最高为73.17%,多重耐药率达68.29%,发现6株携带不同耐药基因类型的产广谱β-内酰胺酶的鼠伤寒沙门氏菌。结论聊城地区沙门氏菌具有一定的血清型及遗传的多样性,高耐药和多重耐药现象严重,应加强病例及环境联合耐药监测。

土壤不同水分条件对长春花(Catharanthus roseus)生活史型的影响

为了研究土壤中不同水分条件对长春花生活史型形成及生理代谢的影响,设置对照、轻度干旱、中度干旱和重度干旱等土壤水分梯度,对长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)幼苗进行处理。对长春花形态指标进行聚类分析发现选择的20个聚类实体被分为2组,第1组为对照(CK)和轻度干旱(LD)处理的植株,第2组为中度干旱(MD)和重度干旱(HD)处理的植株。运用主成分分析(Principal component analysis,PCA)方法对不同土壤水分条件下长春花营养生长(Vegetative growth,V)、有性生殖(Sexual reproduction,S)和无性繁殖(Clone reproduction,C)等3类15种性状进行统计。结果显示,长春花在对照条件下生活史型为V0.39S0.54C0.07,轻度干旱为V0.36S0.50C0.14,中度干旱为V0.53S0.27C0.20,重度干旱为V0.45S0.09C0.46,干旱程度加强显著提高了无性繁殖的比重,降低了有性生殖的比例。同时,对长春花中文朵灵、长春质碱和脱水长春碱等生物碱的含量进行了动态测定,发现重度干旱下的文朵灵、长春质碱和脱水长春碱的含量在16d时分别是对照水平的1.5倍、2.3倍和3.1倍,表明干旱胁迫诱导生物碱积累,为长春花高效栽培提供了理论依据。

人工种植长春花生物学性状和生物碱含量的季节动态

以人工种植的长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)为材料,研究了一个生长季节内长春花的生物学性状和生物碱含量的季节动态。研究发现,长春花的株高、生物量和叶片数呈现相似的生长趋势,即前期(5～7月)缓慢增长、中期(7～9月)快速增长和后期(9～10月)增长缓慢3个明显的季节生长特征,而花总数在前期和中期也呈现相似的规律,但在后期(9～10月)快速下降。长春花叶片中3种生物碱含量的季节变化规律明显,变化趋势相一致。3种生物碱的含量在一个生长季节内均是先增加后降低再增加的趋势,且3种生物碱含量均在7月下旬和10月下旬出现2个明显的高峰值。长春花叶片中长春碱含量与长春质碱和文多灵含量之间均有较强的正相关,且与文多灵含量呈显著的正相关(p<0.05),长春花叶片中长春质碱含量与文多灵含量之间呈显著的正相关(p<0.05)。因此,生产实践中人工种植长春花的最佳采收期是10月末,并可通过改变环境因子进一步诱导长春花叶片中长春碱类物质的积累。

32.5t轴重货车作用下重载铁路轨道的合理刚度

针对以往轨道刚度计算方法只能得出轨下垫板静刚度的取值范围或下限值,而不能确定轨道整体刚度的问题,运用大型轮轨动力学软件NUCARS建立32.5t轴重货车—轨道系统耦合动力学模型,采用动力敏感系数分析方法,通过分析轨道结构各种部件刚度组合情况下的车辆、轨道系统动力特性,研究32.5t轴重货车作用下重载铁路轨道的合理刚度。结果表明:钢轨垂向位移、道床压力和垫板压力对垫板刚度较为敏感;轨枕垂向位移、轨枕垂向加速度、道床压力对道床刚度较为敏感;以轨道动力特性的综合效应最小为目标建立目标函数,筛选得出32.5t轴重货车作用下重载铁路轨道结构的部件刚度最优匹配方案是轨下垫板刚度为140kN·mm-1,道床刚度为150kN·mm-1;最优部件刚度匹配方案所对应的轨道结构整体刚度为82kN·mm-1。

浅析高中英语口语表达能力的培养策略

英语是一门语言学科,在英语教学中培养学生的口语表达能力,是英语语言学科的重要内容。本文通过对英语学习中如何培养提高学生的英语口语表达能力进行了阐述,希望能够在今后的工作中对英语的教学起到一定的积极作用。

绿色建筑理念在建筑工程施工过程中运用研究

随着人们对建筑物绿色环保性能关注程度越来越高,现代建筑工程的绿色建筑理念应用也受到广泛关注。基于此,本文简单分析绿色建筑理念及工艺效能,并深入探讨建筑工程中绿色建筑理念的应用,进行工程实例分析,以供参考。

一起肉毒梭菌中毒事件的实验室诊断

目的 对2023年11月发生的1起疑似肉毒中毒事件的相关样本进行实验室检测,对分离到的一株A型肉毒梭菌(C. botulinum)进行全基因组测序(WGS)。方法 对食品、病例粪便和环境样本应用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)快速检测肉毒毒素基因。参照GB 4789.12—2016对样本进行前处理,经接种疱肉培养基和TPGYT培养基增菌培养5 d,通过动物试验进行毒素检出、确证和定性实验,采用卵黄琼脂平板分离和纯化菌株,并用API 20A和VITEK MS做菌种鉴定。同时对分离得到的菌株开展WGS,分析菌株的遗传特征。结果 病例粪便样本A型肉毒毒素基因阳性,通过动物试验检出A型肉毒毒素,利用卵黄琼脂平板成功分离A型肉毒梭菌RD1和RD2。其他样品均为阴性。WGS分析显示,该菌为肉毒梭菌,共有12个毒素编码相关基因,染色体上有3个噬菌体序列,wg-SNPs分析显示RD1和RD2与BrDura亲缘关系最近。结论 此次实验按照国家标准和本实验室建立的荧光定量PCR方法进行鉴定,检测方案和结果为临床A型肉毒中毒提供参考。

2019—2022年聊城市食品和病例分离单增李斯特菌基于全基因组测序的分子特征及耐药性分析

目的基于全基因组测序(WGS)比较分析2019—2022年聊城市单核细胞增生李斯特菌(Lm)食品和病例分离株基因组特征、毒力性、耐药性以及遗传多样性。方法对聊城市33株市售食品和临床病例中Lm分离株开展抗生素敏感性试验和WGS。利用MGAP对WGS数据进行拼接组装,对组装基因组进行基因预测和功能注释、MLST,制作cg MLST最小生成树图,并与美国国家生物信息中心(NCBI)上获取的18株国内外Lm构建wg-SNP进化树。结果33株Lm分离株的基因组大小为2.89~3.41 Mb,CG含量为37.81%~37.97%,可分为6个ST型(ST9、ST121、ST8、ST87、ST155、ST101),分别属于6个克隆复合群(CC9、CC121、CC8、CC87、CC155、CC101);分离株均携带fosX和mprF耐药基因,此外还携带lplA1、prsA2等其他18个毒力基因,有不同程度的毒力基因缺失情况。2株菌对四环素耐药,1株菌对林可霉素耐药。均携带毒力岛LIPI-1和LIPI-2,未检测到毒力岛LIPI-3和LIPI-4。wg-SNPs、cgMLST和基于单拷贝核心蛋白序列的系统发育树遗传进化分析显示,33株Lm分子分型呈现高度多样性,病例来源菌株与食品分离株亲缘关系密切,食品分离株与国外暴发分离株在进化关系上密切相关。结论山东省聊城市食品和病例中分离的单增李斯特菌均携带毒力基因,具有一定的潜在致病能力,耐药情况尚不严重。分子型别呈现出多样性,食品来源菌株和病例分离株具有较近的亲缘关系,提示市售食品有食源性感染的潜在风险。

2016年山东省聊城市临床病例中2种罕见施万菌的鉴定

目的对2016年山东省聊城市临床患者分离株进行鉴定以及分析其生化特性和药物敏感性。方法对患者来源标本及6株菌株进行选择性培养基分离培养,并进行生化试验、溶血试验、耐盐耐热实验和药敏试验,使用API生化鉴定系统、VITEK 2 Compact、全自动快速微生物质谱检测系统进行鉴定,并进行16S rRNA和gyrB序列分析。结果 8株菌在菌落形态和生化特性上差异无统计学意义,只有溶血状态有所不同,临床鉴定系统有局限性,只能分辨到海藻施万菌和腐败施万菌,进一步使用16S rRNA和gyrB序列检测方法,确认患者分离株属于2种罕见的施万菌,即鲍施万菌和优佩内施万菌。结论首次在中国大陆的临床病例中,鉴定了2株由罕见施万菌导致的感染病例。由施万菌属引起的临床感染还需要进一步重视,并加强监测。

2011年山东聊城市食源性致病菌检测结果分析

目的了解聊城市食源性致病菌污染的状况,为食品安全监管和预防控制食源性疾病提供依据。方法依照《食品卫生标准检验方法》GB/T 4789-2003、《食品卫生标准检验方法》GB 4789-2010标准要求进行检验。结果调查采集12类食品301份样品,共检出致病菌49株,总检出率16.28%。其中金黄色葡萄球菌检出率6.67%,沙门菌检出率1.33%,单增李斯特菌检出率4.40%,阪崎杆菌检出率40.00%,副溶血弧菌检出率8.00%,大肠埃希菌O157检出率4.67%;未检出空肠弯曲菌、蜡样芽孢杆菌和志贺菌。结论食源性致病菌在聊城市流通领域食品中有不同程度的污染,特别是婴幼儿配方奶粉受到较严重的污染,存在安全隐患,应加强监督管理,防止食源性疾病暴发。

2016~2018年聊城市部分儿童社区获得性肺炎患者的病原体分布及耐药性分析

目的了解聊城市儿童社区获得性肺炎(CAP)患者的病原谱构成及主要病原菌的耐药情况,为临床治疗提供参考依据。方法选取2016年7月至2018年12月确诊的670例社区获得性肺炎患儿为研究对象,对其呼吸道分泌物进行细菌培养,呼吸道8种病毒及3种非典型病原体进行检测,并对结果进行分析。结果 670例病例中有425例病原学阳性(63.43%)。共检出718株病原,其中细菌208株(28.97%),主要包括流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌等。病毒检出261株(36.35%),主要包括呼吸道合胞病毒、副流感病毒、鼻病毒等。非典型病原体主要检出肺炎支原体(34.54%)。混合感染率达到43.73%,占病原阳性患儿的68.94%,混合感染以支原体和病毒混合感染为主,其次是细菌和支原体混合感染较多。主要的革兰阳性菌对青霉素、红霉素、复方新诺明等均有较高的耐药性;主要的革兰阴性菌对复方新诺明有较高的耐药性,对亚胺培南均有很高的敏感性。结论聊城市儿童社区获得性肺炎患者的主要病原是肺炎支原体和病毒,呼吸道合胞病毒为主要病毒病原,且肺炎支原体混合感染率较高。

山东省聊城市2020-2021年小肠结肠炎耶尔森菌食品分离株分子特征分析

目的了解2020-2021年山东省聊城市小肠结肠炎耶尔森菌(Y.e)食品分离株分子特征。方法对聊城市市售生肉与肉制品中Y.e开展分离培养、药敏试验、毒力基因检测、PFGE和全基因组测序(WGS)。利用微生物基因组注释系统对全基因组数据进行拼接组装,对组装基因组开展多位点序列分型(MLST)和核心基因组多位点序列分型(cgMLST),并应用基于WGS的单核苷酸多态性(wg-SNPs)分型方法与美国生物技术信息中心上获取的14株国内外Y.e的基因组进行遗传进化分析。结果165份样品中共检出21株Y.e,检出率为12.73%,20株Y.e测序成功。Y.e携带多种耐药基因和毒力基因,出现多重耐药现象,毒力基因PCR检测显示21株Y.e呈现2种毒力基因特征;PFGE、MLST和cgMLST聚类分析显示,21株Y.e呈高度多样性;wg-SNPs遗传进化分析显示20株Y.e可分为2个进化主分支。结论聊城市生肉与肉制品中分离的Y.e携带多种耐药基因和毒力基因,且分子分型呈现高度多样性,应加强生肉与肉制品中Y.e分子生物学监测,开展基因组测序及分子分型检测工作,为预防由Y.e引起的食源性疾病提供理论依据。