基于分子对接和内质网应激探讨老鼠簕生物碱A对小鼠急性肝损伤的作用

目的:探讨老鼠簕生物碱A(HBOA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肝损伤的作用及机制。方法:采用AutoDock Tools软件将HBOA与GRP78、IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白进行分子对接。腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肝损伤模型,分为正常组、模型组、联苯双酯阳性药组及HBOA高、中、低剂量组。连续灌胃给药10 d,除正常组外,其余5组小鼠均腹腔注射LPS,诱导急性肝损伤模型。检测各组肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫组化法检测白细胞介素(IL)-1β的表达,Western blotting法测定内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源体蛋白(CHOP)、Caspase-12及炎症相关蛋白肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6的表达。结果:HBOA与GRP78、IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白之间的最优对接构象结合能分别为-5.77 kcal/mol、-5.48 kcal/mol、-5.83 kcal/mol、-5.36 kcal/mol。与正常组相比,模型组小鼠肝组织中LDH含量及GRP78、CHOP、Caspase-12、IL-1β、TNF-α和IL-6表达显著增高,GSH水平显著降低(均P<0.05)。与模型组相比,HBOA高、中剂量组和阳性药组LDH含量及GRP78、CHOP、Caspase-12、IL-1β、TNF-α和IL-6表达明显降低,GSH水平显著升高(均P<0.05)。结论:HBOA能在一定程度上减轻LPS所致的小鼠急性肝损伤,其保肝机制可能与减轻炎症、减少内质网应激、抑制肝细胞凋亡相关。

老鼠簕生物碱A对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用及其机制研究

目的:研究老鼠簕生物碱A(HBOA)对大鼠非酒精性脂肪肝的改善作用及其机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、水飞蓟宾胶囊组(阳性对照,26.25 mg/kg)和HBOA高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组10只。除空白对照组喂养普通饲料外,其余各组大鼠连续喂养高脂饲料8周以复制非酒精性脂肪肝模型。于第9周起,空白对照组和模型组大鼠灌胃等体积0.6%羟甲基纤维素钠溶液,各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续4周。观察各组大鼠一般情况并计算其体质量增量、脏器(肝、肾、脾)指数;检测肝组织中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(NEFA)含量,以及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;采用免疫组织化学法检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白的表达情况。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠体质量增量和肝指数均显著升高(P<0.01);肝内可见脂肪沉积现象,血清中SOD、GSH-Px活性均显著降低,MDA含量以及肝组织中AST、ALT、TC、TG、NEFA含量均显著升高,PPARα蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠体质量增加量和肝指数均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝内脂肪沉积现象改善,血清中SOD、GSH-Px活性(除HBOA低剂量组外)均显著升高,MDA含量以及肝组织中AST、ALT、TC(除HBOA低剂量组外)、TG(除HBOA低剂量组外)、NEFA含量均显著降低,PPARα蛋白表达水平(除HBOA低剂量组外)均显著升高(P<0.05或P<0.01),且高剂量组上述部分指标显著优于中、低剂量组(P<0.05)。结论:老鼠簕生物碱A对高脂饮食致大鼠非酒精性脂肪肝有一定的改善作用,其机制可能与改善脂质代谢紊乱、抗氧化应激及上调PPARα表达有关。

4-苯基丁酸对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝病的治疗作用

目的:研究内质网应激(ERS)抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)对高脂饮食所致非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠的保护作用。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、4-PBA组,除正常组外,其余大鼠给予高脂饮食8周复制NAFLD模型,采取4-PBA(350 mg/kg)进行灌胃,连续干预4周。计算大鼠体重变化,肝、肾、脾指数;测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总蛋白(TP)、白/球比(A/G);测定肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;饱和油红O染色观察大鼠肝脏脂滴沉积;免疫组织化学法检测肝脏葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平。结果:与模型组比较,4-PBA组大鼠体重增加量、肝指数明显降低(P<0.05);血清中ALT、AST、GLB、TP、TC、TG、LDLC水平显著下降,HDL-C、A/G显著上升(P<0.05);肝脏中SOD、GSH、GSH-Px活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05);油红O染色证实,肝细胞脂滴沉积面积显著减少(P<0.05);免疫组化表明,肝脏中GRP78表达水平显著降低(P<0.05)。结论:4-PBA对高脂饮食诱导NAFLD大鼠有一定的治疗作用,可能与改善氧化应激、调节脂质代谢紊乱及减轻ERS有关。

4-羟基-苯丙噁唑-2-酮对非酒精性脂肪肝病模型大鼠炎症和凋亡信号通路的影响

目的:探讨4-羟基-苯丙噁唑-2-酮对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型大鼠炎症和凋亡信号通路的影响。方法:将SD大鼠分为正常对照组(10只)和造模组(50只),正常对照组大鼠给予基础饲料,造模组大鼠给予高脂饲料以复制NAFLD模型。造模成功后,将大鼠分为正常对照组、模型组、水飞蓟宾组(26.25 mg/kg)和4-羟基-苯丙噁唑-2-酮高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组8只,正常对照组和模型组大鼠灌胃0.6%羧甲基纤维素钠溶液,其余各组大鼠灌胃相应药物,灌胃体积为10 mL/kg,每天1次,连续4周。末次给药后,检测大鼠血清中白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)水平,ALB/GLB比值以及游离脂肪酸(FFA)水平;采用TUNEL染色法观察大鼠肝细胞凋亡情况;采用Western blot法检测大鼠肝组织中炎症信号通路相关蛋白[Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)、NF-κB抑制蛋白(IκBα)]的表达水平或磷酸化水平以及凋亡信号通路相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)]的表达水平。结果:与模型组比较,4-羟基-苯丙噁唑-2-酮各剂量组大鼠血清中TP(低剂量组除外)、GLB、FFA水平和肝组织中TLR4(低剂量组除外)、MyD88(中剂量组除外)、caspase-3蛋白表达水平以及NF-κB p65、IκBα的磷酸化水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中ALB/GLB比值和肝组织中Bcl-2/Bax比值均显著升高(P<0.05或P<0.01),肝细胞凋亡现象有所改善。结论:4-羟基-苯丙噁唑-2-酮可改善大鼠NAFLD状态,其作用机制可能与抑制肝组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和凋亡相关蛋白表达有关。

老鼠簕生物碱A对D-GalN/LPS致小鼠急性肝损伤的影响

目的:探讨老鼠簕生物碱A对D-GalN/LPS所致的小鼠急性肝损伤的影响。方法:使用D-GalN(700 mg/kg)和LPS(10μg/kg)建立小鼠急性肝损伤模型,设置正常对照组、模型组、联苯双酯滴丸(150 mg/kg)阳性对照组及老鼠簕生物碱A高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组,计算小鼠生存率,采用试剂盒测定血浆ALT、AST及肝组织中LDH水平,利用免疫组化法检测肝组织TNF-α表达,Western blot测定肝组织中PI3K-p85蛋白表达及p-Akt/Akt水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠生存率低;血浆ALT、AST及肝组织中LDH水平及TNF-α蛋白表达显著升高;肝组织PI3K-p85蛋白表达及p-Akt/Akt水平显著降低。与模型组比较,各给药组血浆ALT、AST及肝组织LDH水平和TNF-α蛋白表达显著降低;小鼠生存率有所提高;联苯双酯组和老鼠簕生物碱A高剂量组肝组织PI3K-p85蛋白表达及p-Akt/Akt水平显著升高。结论:老鼠簕生物碱A可在一定程度上改善D-GalN/LPS所致的小鼠急性肝损伤,对小鼠有肝保护作用,可能通过PI3K/Akt途径降低肝损伤。

基于网络药理学探讨4-乙酰氧基苯并噁唑-2-酮对急性肝损伤的作用机制

目的:通过网络药理学方法探讨4-乙酰氧基苯并噁唑-2-酮(AcO-BOA)对急性肝损伤(ALI)的作用机制,并运用分子对接技术和动物实验进行验证。方法:采用ChemDraw绘制AcO-BOA的结构式,Swiss Target Prediction、Phammapper、Gene-Cards、OMIM数据库筛选药物和疾病ALI的靶点;通过Venny 2.1.0在线平台,获取药物与ALI的共同靶点,String在线数据库构建蛋白质相互作用(PPI)网络图,利用Cytohubba筛选核心靶点。David数据库进行GO和KEGG富集分析且运用Omicshare在线工具可视化。运用AutoDockTools-1.5.6进行分子对接验证,最后将预测结果进行动物实验初步验证。结果:共筛选到药物靶点268个,疾病靶点2119个,药物与疾病的交集靶点共52个。GO和KEGG富集共涉及111条生物学过程和38条信号通路,分子对接结果显示AcO-BOA能与核心靶点自发结合。动物实验结果表明,AcO-BOA能够改善小鼠肝功能,Western blotting结果表明,AcO-BOA能降低p-AKT/AKT的表达。结论:AcO-BOA能够通过多靶点,多通路发挥防治ALI作用,其作用机制可能与调控PI3K-AKT通路有关。

药师干预对2型糖尿病患者血糖控制、不良反应的影响

分析药师干预在2型糖尿病患者血糖控制及减少不良反应风险方面的作用。方法 对2019年5月-2020年6月钦州市第一人民医院2型糖尿病患者66例开展研究,对患者采取随机投掷法进行组别划分,33例/组。对照组给予常规护理干预,给予观察组和对照组同样常规护理服务后增加药师干预服务,对比两组血糖指标水平变化、不良反应风险。结果 两组干预前空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平对比一致(P>0.05),观察组干预后以上血糖指标水平和对照组相比较低(P<0.05)。观察组不良反应发生率9.09%(3/33)和对照组33.33%(11/33)相比较低(P<0.05)。结论 药师干预的实施,可有效维持血糖稳定,能抑制2型糖尿病患者用药相关不良反应风险,对药物服用效果的提升有促进意义。

老鼠簕生物碱A对小鼠药物性肝损伤的保护作用

目的:观察老鼠簕生物碱A(AAIA)对对乙酰氨基酚引起肝损伤模型的影响。方法:将小鼠随机分成正常组、模型组、联苯双酯组(联苯双酯,150 mg·kg-1)及AAIA高、中、低剂量(200,100,50 mg·kg-1)组,每组10只,连续灌胃给药10 d,末次给药后禁食不禁水8 h,除正常组外,其余各组给予腹腔注射275 mg·kg-1对乙酰氨基酚,诱导小鼠急性肝损伤模型。6 h后,进行眼球取血,称量小鼠体质量、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺质量,计算相应脏器指数,使用试剂盒检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量,紫外分光光度法测定肝匀浆中一氧化氮(NO),诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2),磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)的表达。结果:与正常组比较,模型组的肝脏指数,血清中AST,ALT,肝组织匀浆NO,iNOS水平及p-ERK1/2在肝脏中的蛋白表达显著增高(P <0. 01);与模型组比较,各给药组均能降低对乙酰氨基酚急性肝损伤小鼠肝脏指数,血清AST,ALT水平,肝组织匀浆中NO,iNOS的产生,肝脏p-ERK1/2蛋白表达(P <0. 01);所有注射对乙酰氨基酚组的脾脏、肾脏及胸腺无明显变化,差异无统计学意义。结论:AAIA可能通过降低AST,ALT的水平,下调NO,iNOS的表达,减少p-ERK1/2的表达,对小鼠药物性肝损伤起到保护作用。

4-乙酰氧基苯并噁唑-2-酮对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨4-乙酰氧基苯并噁唑-2-酮(AcO-BOA)对脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖(D-GalN)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将C57小鼠随机分为6组:正常组、模型组、对照组和低、中、高剂量AcO-BOA组。正常组和模型组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),对照组灌胃水飞蓟宾(83.66 mg·kg;),低、中、高剂量AcO-BOA组分别灌胃50,100,200 mg·kg;AcO-BOA,连续给药10 d,末次给药后禁食不禁水12 h后,除正常组注射生理盐水外其余各组均腹腔注射LPS(40μL·kg;)/D-GalN(800 mg·kg;)以复制急性肝损伤模型。造模4 h后,将小鼠麻醉后进行眼球取血,收集肝、肾、脾并称重,计算各脏器指数。检测肝组织中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)含量,并用蛋白质印迹法测定细胞外调节蛋白激酶(ERK)及其磷酸化蛋白(p-ERK)、双重特异性激酶(MEK)及其磷酸化蛋白(p-MEK)的表达水平。用AutoDockTools-1.5.6进行分子对接验证。结果正常组、模型组、对照组和高剂量AcO-BOA组肝指数分别为(3.68±0.18)%,(7.86±0.41)%,(5.21±0.53)%,(3.88±0.26)%;肾指数分别为(1.03±0.01)%,(1.33±0.04)%,(1.05±0.01)%,(1.05±0.01)%;脾指数分别为(0.21±0.07)%,(0.40±0.04)%,(0.26±0.00)%,(0.27±0.00)%;GPT含量分别为(186.48±15.77),(274.32±19.46),(179.27±22.56),(204.08±25.03)U·g;GOT含量分别为(61.61±14.92),(104.44±7.83),(48.63±11.65),(54.96±6.44)U·g;prot;LDH含量分别为(174.01±21.19),(226.27±7.79),(161.65±14.25),(156.82±8.05)U·g;MPO含量分别为(0.87±0.50),(2.50±0.50),(1.29±0.40),(1.10±0.29)U·L;模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);对照组及中、高剂量AcO-BOA组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 AcO-BOA能在一定程度上改善LPS/D-GalN所致的小鼠急性肝损伤,并且其作用机制可能与调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径有关。

烟酸注射液致新的4例药品不良反应分析及文献复习

总结并分析烟酸注射液引起静脉炎的原因,提高临床用药安全。方法:报道4例使用烟酸注射液引起静脉炎的患者临床资料、诊疗经过。结果:两名患者在使用烟酸注射液当天出现静脉炎,另两名患者在使用烟酸注射液3~5天后出现静脉炎,4名患者均在停药对症处理2小时左右静脉炎逐渐消失。结论:烟酸注射液引起静脉炎属于新的药物不良反应,临床应用时应加强其用药监测,保障患者用药安全。