探讨双歧杆菌四联活菌改善SAP大鼠炎症反应的效果

目的探讨双歧杆菌四联活菌在改善重症急性胰腺炎(SAP)大鼠炎症反应中的治疗价值。方法健康wistar雄性大鼠共24只,按随机原则分为实验组、对照组及空白组,每组8只。实验组和对照组大鼠分别于造模前7 d及造模后24 h内给予双歧杆菌四联活菌片0.75 g,b.i.d.和玉米片0.75 g,b.i.d.。空白组大鼠同质饲料喂食,未行造模及手术处理。比较三组大鼠血清淀粉酶(AMY)、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)水平,观察大鼠胰腺组织病理损伤。结果与空白组血清AMY(2483.25±197.98)U/L相比,对照组以及实验组的血清AMY(3521.13±419.22)、(2859.13±136.56)U/L明显升高,实验组与对照组相比明显较低,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。与空白组血清WBC(2.655±0.524)×10^(9)/L、CRP(4.889±0.489)mg/L相比,实验组的血清WBC(4.770±0.655)×10^(9)/L、CRP(5.840±0.311)mg/L与对照组血清WBC(6.590±0.755)×10^(9)/L、CRP(7.019±0.806)mg/L均明显升高,但与对照组相比,实验组经双歧杆菌四联活菌片干预后,血清WBC、CRP水平明显降低,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。同时,实验组胰腺组织损伤程度、胰腺炎症细胞浸润程度、小叶间隙增宽及胰腺细胞坏死程度与对照组相比均减轻。结论应用双歧杆菌四联活菌对改善SAP大鼠胰腺损害程度及炎症反应程度有明显的治疗价值,可为临床减轻SAP患者炎症反应提供动物实验理论依据和参考靶点。

GPC3蛋白结构的分析及其表达纯化

目的了解GPC3蛋白结构,构建GPC3蛋白的原核表达纯化系统,高效表达和纯化出GPC3蛋白。方法从GenBank中获取基因序列,通过Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等在线软件对GPC3蛋白(25-554 aa)的结构进行分析。从不同载体和菌株中筛选出相对优势的组合,优化其表达条件,并诱导表达TrxA-GPC3融合蛋白,通过包涵体的溶解和复性、亲和层析、标签切割和分子筛纯化等方法分离纯化出无TrxA标签的GPC3蛋白。结果GPC3蛋白的相对分子质量为60.26 kDa,等电点为5.76,不稳定系数为41.27,脂肪系数为83.66,平均亲水系数为-0.312,是不稳定的亲水性蛋白,其主要为α-螺旋和无规则卷曲结构,引入标签的TrxA-GPC3融合蛋白比GPC3蛋白更稳定。通过对比筛选出表达效率较高的BL21(DE3)-pET32a-GPC3工程菌,其在0.5%的葡萄糖浓度和0.1 mmol/L的IPTG浓度条件下,结合20℃的诱导温度及16 h的诱导时间,可显著提高蛋白表达量,通过亲和层析得到纯度90%以上的TrxA-GPC3融合蛋白,利用凝血酶将TrxA标签切除,最后通过分子筛纯化得到单一的GPC3蛋白。结论利用生物信息学分析了GPC3蛋白的理化性质和结构,并在原核系统中成功表达和纯化了GPC3蛋白,为高特异性抗体的制备或筛选以及结构-功能研究奠定了基础,同时也为其它蛋白的表达纯化提供科学的指导意义。

双歧杆菌四联活菌对重症急性胰腺炎肠屏障功能的影响和相关作用机制研究

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)常伴肠功能衰竭,会诱发机体出现多器官障碍综合征,因此肠功能衰竭被认为是SAP死亡的起始环节。大量研究发现SAP肠功能衰竭与肠屏障功能障碍密切相关,机制可能与肠道缺血及再灌注损伤、胃肠动力障碍和肠道菌群紊乱等相关。目前研究发现应用益生菌治疗SAP伴肠屏障功能障碍者有显著疗效。双歧杆菌四联活菌为目前应用广泛的复合益生菌制剂,通过调节胃肠道的微生态环境,对肠道的机械、化学、免疫及生物屏障均有保护作用,对改善肠功能衰竭有显著效果。本文通过回顾性分析双歧杆菌四联活菌治疗SAP的相关文献,对双歧杆菌四联活菌影响SAP肠屏障功能相关机制、疗效进行综述。

不同剂量熊去氧胆酸治疗原发性硬化性胆管炎的研究进展

原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)是一种以特发性肝内外胆管炎症和纤维化导致多灶性胆管狭窄为特征、慢性胆汁淤积病变为主要临床表现的自身免疫性肝病[1-3]。PSC的病因和发病机制尚未明确,可能与疏水性胆汁酸的毒性作用、免疫因素以及遗传因素有关。有研究报道PSC与炎症性肠病密切相关,尤其是溃疡性结肠炎[4-5]。

四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析

建立四物汤中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱分析方法,探讨不同配伍对氨基酸类指纹图谱的影响。采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生法,以精氨酸为参照物。色谱柱Kromasil C-18(250×4.6 mm×5μm);流动相A为乙腈,B为N,N-二甲基甲酰胺-0.025 mol/L醋酸钠(1:100,用36%乙酸调pH=6.0),梯度系统;柱温40℃;检测波长360 nm;流速1.0 mL/min;进样量10μL;分析时间70 min。结果共标出17个共有峰,鉴定出13种对人体有益的氨基酸成分。10批样品的相似度均大于0.97。对整方氨基酸指纹图谱的影响从大到小依次是当归、熟地黄、白芍、川芎。所建立的氨基酸类成分指纹图谱特征性强,可作为四物汤质量控制的手段之一,并可为中药复方配伍化学成分变化研究提供一定参考。

胆汁酸与肠道菌群在原发性硬化性胆管炎中的作用及相关机制研究进展

原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis,PSC)是一种相对少见、复杂的肝病,特征为肝内、外胆管发生炎症,逐渐纤维化使管腔狭窄、胆汁慢性淤积,最终进展为肝纤维化,甚至肝功能衰竭。其发病率和患病率在不同地区呈现不同的分布。PSC患者可能没有明显症状,也可能有瘙痒、乏力、右上腹疼痛、复发性胆管炎或门静脉高压后遗症。

如何加强工程项目的索赔管理工作

为使企业在索赔工作做得更好,本文介绍了工程索赔的主要内容及如何加强工程索赔的管理工作。