农村电商物流“最后一公里”存在的问题及模式创新研究

随着农村网民规模增长、网络基础环境改善、农村居民收入稳步提高,农村电商市场展现出巨大潜力,农村市场正处在增长爆发期,正在成为网络消费的"新蓝海"。对于电商企业来说,物流的覆盖是市场拓展的基本保证,更是决胜农村市场的关键。面对我国农村电商物流体系中农村级站点缺乏的现状,解决这"最后一公里"问题是当务之急。农村合作站点这种新型物流模式或许可以提供新的思路,从而构建"场站共享、服务同网、信息互通"的农村电商物流发展新格局。

基于甲型流感病毒血凝素的广谱流感疫苗研究进展

目前使用的流感疫苗都是针对现行流行株设计的,因此难以有效应对病毒快速变异出现的新病毒株,而开发能同时抵抗多个流感病毒株感染具有交叉保护作用的通用疫苗是今后流感疫苗研发的趋势。本研究对近年来基于流感病毒血凝素构建的通用流感疫苗作一综述。

阴离子交换层析处理对静注人免疫球蛋白(pH 4)制品的影响

目的分析在低温乙醇蛋白分离法基础上引入阴离子交换层析(anion exchange chromatography,AEX)纯化工艺处理,对静注人免疫球蛋白(pH 4)制品质量的影响。方法检测并对比分析低温乙醇蛋白分离法及联合AEX纯化工艺制备的静注人免疫球蛋白(pH 4)制品分子量大小分布、抗补体活性(anticomplement activity,ACA)、抗-HBs效价、白喉抗体效价、IgA含量、抗体Fc段生物学活性、IgG亚型分布、N-糖基化类型、蛋白质二级结构和三级结构的异同。结果在低温乙醇蛋白分离法基础上,引入AEX纯化工艺处理,可大幅度降低静注人免疫球蛋白(pH 4)制品中IgA含量;有利于去除制品中三级结构发生改变的蛋白质;未对制品其他质量指标产生显著影响。结论在低温乙醇蛋白分离法基础上,引入AEX纯化工艺可提高静注人免疫球蛋白(pH 4)制品质量。

实验设计法优化高浓度静注人免疫球蛋白制剂的处方

目的通过实验设计法优化高浓度(10%)静注人免疫球蛋白(human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)的制剂处方。方法采用单因素试验(包括等电点、二级结构、分子大小分布,转变中点温度4个指标)确定IVIG(10%)的pH范围,同时经国外相关数据和产品质量指标选择IVIG的稳定剂甘氨酸和聚山梨酯80的浓度范围,再采用实验设计法优化IVIG的pH及稳定剂浓度。以转变中点温度为指标,通过单因素试验优化IVIG(10%)的离子强度。结果最佳IVIG(10%)制剂处方为聚山梨酯80:80 mg/L,pH:4. 5,甘氨酸:0. 25 mol/L。最适离子强度为0 mmol/L氯化钠。结论成功优化了IVIG(10%)的制剂处方,可确保制剂的稳定性,提高临床用药安全性。

模制瓶及盐水透析对人血白蛋白制品中铝离子残留量的影响

目的探讨模制瓶及盐水透析对人血白蛋白制品中铝离子残留量的影响。方法采用原子吸收法检测5%、10%、20%和25%4种规格人血白蛋白空白制剂(不含人血白蛋白,仅含辛酸钠和氯化钠等辅料配方制剂,不同规格空白制剂的辅料配方相同,仅浓度不同)的铝离子含量,随后分别灌装至不同厂家的模制瓶中,于57℃存放0、2、4、6和8周,原子吸收法检测铝离子含量。将5%和10%规格人血白蛋白中间样品分别经6倍和8倍浓度的盐水透析,原子吸收法检测铝离子含量。取5%和10%规格人血白蛋白(批号分别为:B201908050和B201908047)生产过程中盐水透析(8倍浓度)前后和灌装(2~8℃)前后样品,原子吸收法检测铝离子含量。结果4种规格人血白蛋白空白制剂中铝离子含量均较低。在高温保存条件下,不同厂家的模制瓶中铝离子含量随时间延长整体呈上升趋势。两种规格人血白蛋白中间样品经8倍浓度盐水透析后,铝离子含量明显低于6倍浓度盐水透析(P<0.05)。5%和10%规格人血白蛋白生产过程中透析后样品中铝离子含量大幅降低,灌装前后变化较小。结论人血白蛋白生产过程中,原辅料中的铝离子含量可通过提高盐水透析的倍数大幅降低,灌装过程中模制瓶中铝离子的析出可通过调控温度控制在安全范围内。

狂犬病病毒CTN-1株基质蛋白密码子优化、原核表达及多克隆抗体的制备

目的对狂犬病病毒CTN-1株基质蛋白(matrix protein,MP)密码子进行优化,原核表达重组蛋白,并制备多克隆抗体。方法通过GenBank查找狂犬病病毒CTN-1株M蛋白编码序列并体外合成,将目的序列插入原核表达载体pET-28b,构建重组质粒pET-28b-M,转入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达M蛋白,经亲和层析和复性后,免疫豚鼠制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA检测多抗的免疫反应性以及效价。结果成功构建了pET-28b-M重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,经亲和层析及透析获得纯化的重组M蛋白,制备的多克隆抗体可与M蛋白发生特异性结合,效价达1∶21 870。结论成功优化表达了狂犬病病毒CTN-1株M蛋白,制备了高效价的多克隆抗体,为后续M蛋白生物学分析以及新型狂犬病疫苗的研究奠定了基础。

磁珠法结合定量PCR检测肠道病毒71型灭活疫苗中宿主细胞DNA残留量的验证及应用

目的对磁珠法结合定量PCR（quantitative PCR，qPCR）检测肠道病毒71型灭活疫苗（Vero细胞）（EV71疫苗）中宿主DNA残留量进行适用性验证及应用。方法利用微磁珠与蛋白溶液中DNA的特异性结合，来提取样品中残留的宿主细胞DNA。将已知浓度的细胞DNA对照系列稀释后，作为标准品DNA与提取的DNA同时进行qPCR扩增。根据标准品DNA的循环阈值与浓度之间的线性关系，对未知样品中残留DNA进行定量分析。结果标准品检测范围在0．03～3000．00Pg／反应。该方法的标准曲线决定系数≥O．980，扩增效率为90．O％～110．00。质控样品回收率为50％～150％，相对标准偏差均小于30％。实验结果的各项参数均在要求范围内。结论磁珠法可解决残留DNA检测中样品前处理的技术难点，qPCR能够简便、快速、准确地对EVTl疫苗生产过程中的DNA残留量进行定量测定。该法适用于EV71疫苗中DNA残留量的检测及疫苗生产过程和其成品的质量控制，对其他采用同样细胞基质的病毒性疫苗质量控制具有借鉴意义。

不同工艺制备的静注人免疫球蛋白产品质量对比研究

目的对比用低温乙醇蛋白分离工艺制备的静注人免疫球蛋白(pH4)和两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白(10%)产品质量指标,分析制备工艺对产品质量的影响。方法对2种工艺的产品进行IgA含量、分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱和IgG亚型分布等指标的检测和对比分析。结果两步阴离子交换层析工艺制备的静注人免疫球蛋白的IgA含量(5.30 μg/ml)明显低于低温乙醇分离工艺(281.95 μg/ml),而分子大小分布、抗-HBs效价、蛋白空间结构、Fc片段活性、抗体谱、亚型分布指标没有明显差别。结论两步阴离子交换层析制备的静注人免疫球蛋白(10%)具有更高的安全性。

静注人免疫球蛋白纳米过滤工艺模型的建立

目的探讨纳米膜过滤的最佳实验条件,构建静注人免疫球蛋白的纳米膜过滤工艺模型。方法分析影响纳米膜过滤效率的因素,利用正交实验对纳米膜预过滤系统、制品蛋白质量浓度、pH值、保护剂相关实验参数进行优化。结果选择过滤载量更高的预过滤器。pH值对纳米膜过滤载量影响显著;低蛋白质量浓度条件下,蛋白浓度对过滤载量影响不显著;保护剂对过滤载量影响不显著。预过滤器与纳米膜的最佳面积比为1:1。优化条件下,纳米膜的最大过滤载量达13.6 kg/m^2。结论通过优化工艺组成条件和预过滤可以提高静注人免疫球蛋白过滤载量,进而降低生产过程中纳米膜过滤成本。

重组长效人胰高血糖素样肽1类似物研究进展

人胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是治疗2型糖尿病的主要药物,其长效性是一个重要指标。GLP-1化学合成工艺复杂、成本较高,因此通过基因工程获得重组长效GLP-1类似物成为目前的研究方向。此文对近年来通过基因工程获得重组长效GLP-1类似物的研究进行综述。