广西地区猪、鼠、狗戊型肝炎病毒感染血清学分析

目的了解广西地区猪、鼠和狗血清中抗-戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体流行情况。方法应用HEV基因1型开放读码框(ORF)2和ORF3多肽包被酶标板,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗猪、羊抗鼠和羊抗狗建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测猪、鼠和狗血清中抗-HEV IgG。结果总抗-HEVIgG阳性率为31.84%(170/534),其中猪血清抗-HEV IgG阳性率为26.40%(66/250),鼠血清抗-HEV IgG阳性率为43.02%(77/179),狗血清抗-HEV IgG阳性率为25.71%(27/105)。结论猪、鼠和狗血清中存在HEV感染,鼠抗-HEV IgG阳性率最高。

广西地区动物HEV基因型及亚型分布

目的了解广西地区猪、鼠、狗、猕猴和鱼5种动物戌型肝炎病毒（HEV）基因型和亚型分布。方法对广西地区猪、鼠、狗HEV抗体阳性血清170份,鼠肝组织150份,3月龄以下狗粪便标本80份,鱼胆汁标本120份,3月龄以下猪粪便标本129份,龙虎山自然景区猴粪便标本130份,用巢式逆转录聚合酶链反应法（RT-nPCR）检测戊型肝炎病毒核糖核酸（HEV RNA）,对RT-nPCR阳性扩增产物进行克隆测序,用Vector NTI Suite 9.0和Treeview软件与目前新分型方法所选参考序列进行核苷酸序列相似性比较和生物进化树分析。结果广西地区170份猪、鼠和狗血清HEV RNA检测均为阴性。在150份鼠肝组织,120份鱼胆汁标本,80份狗和130份猕猴粪便标本中均未检出HEV RNA;3月龄以下猪粪便标本HEV RNA阳性率10.08（13/129）。对13株猪HEV开放读码框架（ORF）1区部分核酸序列进行分析,其与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型HEV的相似性分别为73%～77%,76%～79%,76%～81%,82%～97%;与6个亚型的相似分别为4a：82%～94%;4b：82%～98%;4c：82%～87%;4d：81%～87%;4f：84%～86%;4g：81%～84%,其中2株与Ⅳa亚型相似性是高为82%～94%,11株与Ⅳb亚型相似性最高为82%～98%。结论广西地区猪HEV均为基因型4,2株属于基因型Ⅳa,Ⅱ株为Ⅳb。HEV在猪、鼠、狗血清、鼠肝组织、鱼胆汁、狗和猕猴粪便标本中均未检出。

广西地区5种动物戊型肝炎病毒RNA的检测

目的了解广西地区与人关系密切的猪、鼠、狗、猕猴和鱼等5种动物戊型肝炎病毒(HEV)。方法对广西地区3月龄以下狗、猪粪便标本及龙虎山自然景区猴粪便标本,鱼胆汁标本,鼠肝组织,猪、鼠、狗HEV抗体阳性血清,用巢式逆转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测戊型肝炎病毒核糖核酸(HEV RNA)。结果在3月龄以下猪粪便标本检测出HEV RNA,阳性率为10.08%(13/129),其余各种动物粪便、肝组织、胆汁、HEV抗体阳性血清标本均未检测出HEV RNA。结论猪粪便标本存在HEV RNA,该地区应加强动物粪便特别是猪粪便的管理,以预防戊型肝炎病毒的感染。

7种动物血清抗-HEV抗体检测

目的了解猕猴、鼠、旱獭、鸽子、鸡、鱼、蟾蜍血清中抗-HEV抗体流行情况。方法应用双抗原夹心酶联免疫法检测猕猴、鼠、旱獭、鸽子、鸡、鱼和蟾蜍血清中抗-HEV抗体。结果总抗-HEV抗体阳性率为14.41%(113/784)。7种动物中猕猴血清抗-HEV抗体阳性率为7.26%(9/124);鼠和旱獭抗-HEV抗体阳性率分别为34.91%(59/169)和4.74%(9/190);鱼和蟾蜍分别为17.33%(13/75)和25.56%(23/90);鸡和鸽子血清中未检测到抗-HEV抗体。结论猕猴、鼠、旱獭、鱼和蟾蜍中存在HEV感染,鼠抗-HEV抗体阳性率最高;其次为蟾蜍和鱼;鸡和鸽子中未检测到抗-HEV抗体。

猪HEV基因型和亚型的研究

目的调查猪HEV的基因型和亚型。方法收集新疆南部和广西柳州地区3月龄以下猪粪便标本134份,用巢式逆转录聚合酶链反应法(RT-nPCR)检测戊型肝炎病毒核糖核酸(HEV RNA),对RT-nPCR阳性扩增产物进行克隆测序,用Vector NTI Suite 9.0和TreeView软件与目前新的分型方法所选参考序列进行核苷酸序列相似性比较和生物进化树分析。结果新疆和广西猪粪便标本的HEV RNA阳性率分别为3.64%(2/55)和3.80%(3/79),命名为XJ3-2、XJ3-6、GX3-1、GX5-2和GX6-3。5株猪HEV的开放阅读框架1(ORF1)的部分核苷酸序列与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型HEV的相似性分别为74%～77%、76%～77%、73%～81%和82%～98%。同时对开放阅读框架2(ORF2)部分核苷酸序列进行了分析,GX3-1和GX6-3与Ⅳb亚型相似性最高,为88%～95%。GX5-2、XJ3-2和XJ3-6与Ⅳa亚型相似性最高,为90%～96%。结论新疆和广西5株猪HEV均属于基因型Ⅳ,新疆2株为Ⅳa亚型,广西1株为Ⅳa,另2株为Ⅳb亚型。未检测到HEV基因Ⅰ型和Ⅲ型。

4a亚型猪戊型肝炎病毒对猕猴致病性

目的研究4 a亚型猪戊型肝炎病毒(HEV)对猕猴的致病性。方法用1株从广西壮族自治区农村地区幼猪粪便中分离并已经基因测序确定为4 a亚型的猪HEV静脉注射感染猕猴,通过检测粪便HEV RNA、血中HEVRNA、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平、HEV抗体及肝组织分别进行病理学和电镜检查确定HEV致病性。结果猪HEV株实验感染猕猴后,出现粪便排毒、病毒血症、ALT升高及HEV抗体阳转,活检肝组织切片呈现典型的急性病毒性肝炎的病理变化,电镜下观察到肝细胞中散在有大量病毒样颗粒。结论广西4 a亚型猪HEV能够跨物种感染猕猴并引起戊型肝炎。