大型听神经瘤显微切除术中应用IFNM技术可视化面神经

目的探讨术中面神经监测(IFNM)技术在显微切除大型听神经瘤过程中保留面神经的效果。方法对86例单侧大型听神经瘤(直径≥3cm)病人采用枕下乙状窦后入路显微切除肿瘤。切开肿瘤背侧包膜前,根据电刺激肿瘤表面及边缘产生的激发性肌电图来探查并确认面神经的行走路径;术中采用自发性肌电图监测面神经,使其免受牵拉、挤压或损伤,交替采用激发性肌电图实时探查、确认面神经,从而在虚拟状态下达到面神经"可视化"。结果本组肿瘤全切除79例,占91.9%;次全切除5例,占5.8%;大部分切除2例,占2.3%。面神经解剖保留74例,保留率达86.0%;实用听力保留28例,占32.6%。术后面神经功能House-Brackman分级:Ⅰ～Ⅱ级64例,占74.4%;Ⅲ～Ⅳ级15例,占17.4%;Ⅴ～Ⅵ级7例,占8.2%。结论采用IFNM技术术中"可视化"面神经是大型听神经瘤切除术后面神经得以保留的关键,而娴熟的显微手术技巧、扎实的桥小脑角局部解剖知识是手术成功的保障。

蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型行为学退行性改变的研究

目的观察蛋白酶体抑制剂诱导的帕金森病(PD)行为学退行性变化,探索其发病机制。方法将32只大鼠随机分成实验组和对照组,每组16只,将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射到实验组大鼠左侧黑质致密部,对照组注射等体积生理盐水。术后1、3、5、7、9、11、14、18和21d,追踪观察大鼠自主行为和阿扑吗啡诱导的旋转行为变化;开野实验观察大鼠自发运动行为改变。结果实验组给药后,随着时间推移大鼠开始出现渐进性自发性活动减少、动作缓慢、对外界刺激不自主竖毛、震颤;阿扑吗啡诱导的向健侧旋转运动逐渐增多。开野实验结果显示:实验组大鼠自发运动行为出现渐进性异常改变。结论蛋白酶体抑制剂Lactacystin单侧黑质致密部微量注射诱导的大鼠行为学呈渐进性发展,符合PD发病过程,说明蛋白酶体功能下降可能在PD发病机制起重要作用。

热休克蛋白在神经变性疾病中作用的研究进展

随着老年化人口的日益加剧,越来越多的人遭受着神经变性疾病的困扰。大多神经变性疾病的最明显特征是神经细胞内外蛋白质聚集体的出现,这些疾病包括帕金森病、阿耳茨海默(氏)病和亨廷顿舞蹈病等。这种聚集体的蓄积引起细胞变性以及细胞功能的丢失,从而导致神经变性疾病的发生。然而,热休克蛋白在正常情况下却能阻止细胞内外错折叠蛋白的形成与蓄积,热休克蛋白这种功能的发挥对神经细胞是种保护作用。那么热休克蛋白在神经变性疾病中将如何发挥这种保护作用,以及它在几种常见神经变性疾病中的研究进展如何,本文将就此作一综述。

脑肿瘤干细胞的增殖活性与病理级别的相关性研究

目的检测增殖细胞核标记物Ki-67与脑肿瘤干细胞(BTSCs)标记物CD133、Nestin在60例脑胶质瘤组织中的表达,探讨BTSCs的增殖活性与病理级别的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测CD133、Nestin和Ki-67在60例胶质瘤组织中的表达;采用免疫荧光双染法检测Ki-67、CD133和Nestin之间的共表达情况。计算两种方法中CD133+细胞、Nestin+细胞和Ki-67+细胞所占的百分率,并将Ki-67+细胞与CD133+细胞、Nestin+细胞和肿瘤病理分级分别进行相关性分析。结果按照WHO 2000的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级18例,Ⅲ级23例,Ⅳ级19例,在不同的病理级别组中,CD133+、Nestin+和Ki-67+细胞的表达有明显差异,并且免疫荧光双染相比免疫组化单染更能代表BTSCs的增殖活性研究。在免疫荧光共表达中,随着病理级别的升高,CD133+/Ki-67+细胞(F=30.668,P=0.000)或Nestin+/Ki-67+细胞(F=15.316,P=0.000)的百分比差异都有显著性,并且同时均与CD133+/Nestin+BTSCs的表达成正相关。结论Ki-67+指标与肿瘤级别成正相关,可以作为预后判断的指标,同时与BTSCs标记物CD133、Nestin的表达之间也有明显的相关性,并且,免疫荧光双染得出的BTSCs的增殖活性与病理级别的相关性研究更有统计学意义。

脑肿瘤干细胞的增殖活性与微血管密度的相关性研究

目的探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)增殖活性与微血管密度的相关性。方法采用免疫组织化学染色检测BTSC标记物CD133、增殖细胞核标记物Ki-67和血管内皮细胞标记物CD31在胶质瘤组织中的表达;采用免疫荧光双染法检测CD133/Ki-67和CD133/CD31的共表达情况;并对BTSC的增殖活性与微血管密度的相关性行统计学分析。结果免疫组化显示:低级别胶质瘤中,CD133、CD31和Ki-67的阳性表达较少;而在高级别胶质瘤中,CD133、CD31和Ki-67阳性表达明显增加。免疫荧光双染显示:随着胶质瘤级别升高,CD133/Ki-67共表达明显增加,且可见CD133/CD31共表达于血管内皮细胞。在胶质瘤组织中,Ki-67、CD31表达均与CD133表达呈正相关(r1=0.758,P1=0.000;r2=0.439,P2=0.000),Ki-67与CD31的表达也呈正相关(r3=0.816,P3=0.000)。结论 BTSC与微血管联系密切,不仅在区域分布上围绕微血管增殖分化,并且在功能上与微血管相互促进和依赖。

功能性磁共振导航结合皮质电极描记切除功能区及其附近的癫癎灶

目的探讨利用fMRI导航结合皮质电极描记切除功能区及其附近癫癎灶的临床疗效。方法回顾性分析11例癫癎灶起源于功能区及其附近的癫癎病人的手术经验。病人术前发作频率(2.63±1.68)次/月。术前利用fMRI检查确定功能区位置并与导航图像进行融合,术中使用皮质电极描记标记出癫癎波的位置,通过导航系统了解功能区与癫癎波起源的关系。在保留功能区皮质的基础上,将病灶和癫癎波起源处皮质切除,而位于功能区皮质上的癫癎波起源处则给予小功率皮质热灼。结果皮质发育不全8例,灰质异位症2例,脑外伤后局部皮质软化1例。术后随访6～12个月,癫癎发作完全消失9例,术后3～6d内发作1次2例,随后未再出现癫癎发作。术后未出现明显的神经功能损害加重的情况。术后3个月复查脑电图显示基本正常。结论fMRI导航结合皮质电极描记切除起源于功能区及其附近的癫癎灶是一种微侵袭的手术方法,在切除癫癎灶的同时能最大限度地保留功能区的神经功能。

脑肿瘤干细胞的增殖活性与微血管密度的相关性研究

背景与目的:越来越多的研究表明脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell,BTSC)起源于神经干细胞(neural stem sell,NSC)的基因突变。本研究检测脑肿瘤干细胞标志物CD133、增殖细胞核标志物Ki-67和血管内皮细胞标志物CD31在68例脑胶质瘤中的表达,探讨脑肿瘤干细胞的增殖活性与微血管密度的相关性。方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133、Ki-67和CD31在68例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133/Ki-67和CD133/CD31的共表达情况。计算CD133^+肿瘤干细胞、CD31^+血管和Ki-67^+细胞所占的百分率,并进行统计学分析。结果:按照WHO2000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级23例,Ⅲ级19例,Ⅳ级26例。CD133^+肿瘤干细胞、CD31^+血管和Ki-67^+细胞在各级别胶质瘤中均有表达,在低级别组中,免疫组化中可见CD133^+肿瘤干细胞、CD31^+血管和Ki-67^+细胞较少,免疫荧光双染可见CD133^+/Ki-67^+肿瘤干细胞较少,CD133^+肿瘤干细胞周围的CD31^+血管散在分布,同时可见少数CD133^+/CD31^+血管。而在高级别组中,免疫组化中CD133^+肿瘤干细胞、CD31^+血管和Ki-67^+细胞数明显增加,荧光双染中CD133^+/Ki-67^+细胞和CD133^+肿瘤干细胞周围的CD31+血管均明显增多,同样可见少数CD133^+/CD31^+血管。并且,Ki-67^+细胞(r=0.758,P<0.001)和CD31+血管(r=0.439,P<0.001)在高低级别组中的表达均与CD133^+肿瘤干细胞的表达呈正相关,并且,Ki-67^+细胞和CD31^+血管之间也呈明显的正相关(r=0.816,P<0.001)。结论:在脑胶质瘤组织中,脑肿瘤干细胞的增殖活性与微血管是密切联系的,不仅表现在区域分布上肿瘤干细胞围绕微血管增殖分化,还可以表现在功能上与微血管的相互促进和相互依赖。

脑肿瘤干细胞壁龛的病理学特性研究

背景与目的:瘤周微环境对胶质瘤干细胞起着重要作用。本研究检测CD133、Nestin、CD31和PCNA在脑肿瘤干细胞壁龛中的表达,探讨脑肿瘤干细胞生存的微环境——壁龛的结构、分布及其内部细胞的增殖潜能。方法:(1)采用免疫组织化学SP法检测CD133、Nestin和PCNA在65例胶质瘤组织中的表达。(2)采用免疫荧光双染法检测CD133/CD31、CD133/PCNA、CD133/Nestin、Nestin/CD31和Nestin/PCNA的共表达情况,计算CD133+壁龛、CD133+血管、PCNA+细胞、Nestin+壁龛和Nestin+血管所占的百分率,并将壁龛的表达率和壁龛内PCNA+细胞百分率与肿瘤病理分级进行相关性分析。结果:按照WHO2007年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为Ⅱ级22例,Ⅲ级23例,Ⅳ级20例,随着肿瘤级别的升高,CD133+壁龛的百分比越来越高(P=0.000),并且与CD133+血管之间呈正相关(r=0.549,P=0.001);同样Nestin+壁龛的百分比也越来越高(P=0.000),并且与Nestin+血管之间呈正相关(r=0.388,P=0.018);同时;对壁龛内PCNA+细胞百分比进行统计学分析,发现随着肿瘤级别的升高,PCNA+细胞的百分比差异有显著性(F=44.782,P=0.000)。壁龛在各级别胶质瘤中均有表达,在低级别组中,壁龛阳性率较低,壁龛内增殖细胞较少,与相邻壁龛之间界限清晰,并且,周围血管分布较少。在高级别组中,壁龛阳性率高,壁龛之间无明显界限,壁龛内细胞增殖活跃,周围可见丰富的微血管分布。壁龛中除CD133+/Nestin+BTSC外,还可见CD133+/Nestin-细胞、CD133-/PCNA+细胞等亚群细胞。结论:CD133+壁龛和Nestin+壁龛随着肿瘤级别的升高其表达率明显增加,均围绕着微血管分布,并且微血管系统在维护BTSCs壁龛结构中起了非常重要的作用。

大脑胶质瘤相毗邻皮质脊髓束的纤维束成像与临床体征的对比分析

目的:对比分析胶质瘤相毗邻皮质脊髓束纤维束成像与患者的临床体征,探究皮质脊髓束纤维束成像的精确性。方法:2006年8月～2008年9月,16例脑深部占位术后病理证实为胶质瘤患者,术前行常规磁共振序列及DTI序列扫描。在FA图上,以一侧大脑脚为种子兴趣区(ROI)以及同侧的内囊后肢为第二兴趣区,FA阈值设置为0.2,采用连续追踪法对双侧的大脑皮质脊髓束进行重建,分析其走行及完整性,对患侧皮质脊髓束的状态进行评估,并与患者的临床体征进行对比分析。结果:16例大脑胶质瘤相毗邻皮质脊髓束的纤维束成像分析发现:皮质脊髓束仅有移位的3例;受浸润9例;完全破坏4例。皮质脊髓束移位3例,患者对侧肢体肌力均正常或者轻度的下降。皮质脊髓束受浸润9例,其中对侧上肢轻度偏瘫2例,中度偏瘫4例,重度偏瘫3例;对侧下肢轻度偏瘫4例,中度偏瘫3例,重度偏瘫2例。皮质脊髓束破坏4例,对侧上下肢肌力均重度偏瘫。结论:弥散张量纤维束成像能够较为准确的反应出皮质脊髓束状态的改变,可用于临床手术计划系统的制定。

预热激对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞神经毒性损伤的保护作用

目的探讨预热激对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)神经毒性损伤的保护作用及其机制。方法对实验组SH-SY5Y细胞进行预热激(42±0.5)℃处理,再通过6-OHDA对其进行神经毒性诱导,未行预热激处理细胞作为对照组。逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同热激时间(15 min、30 min、60 min)SH-SY5Y细胞内葡萄糖调节蛋白(GRP78、GRP94)的表达水平;显微镜下观察细胞形态学变化,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SH-SY5Y细胞活性情况。结果 6-OHDA对SH-SY5Y细胞的神经毒性损伤呈剂量依赖性及时间依赖性关系,实验组SH-SY5Y细胞较对照组所受的神经毒性损伤轻(P<0.05),且实验组间差异也具有统计学意义(P<0.05);SH-SY5Y细胞中GRP78和GRP94 mRNA表达水平与热应激时间正相关(P<0.05)。结论预热激可降低6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞的神经毒性损伤作用,且热激过程中SH-SY5Y细胞中GRP78和GRP94表达上调。

单侧额底入路显微手术切除颅前窝大型脑膜瘤

目的总结单侧额底入路显微手术切除颅前窝大型脑膜瘤手术的经验。方法回顾性分析22例颅前窝大型脑膜瘤的临床资料,肿瘤直径大小为6.0~6.6 cm,均行单侧额底入路显微切除。结果 SimpsonⅠ级切除13例,Ⅱ级切除7例,Ⅲ级切除2例。结论单侧额底入路有利于颅前窝大型脑膜瘤的充分暴露和手术切除,精湛的显微外科技术不仅有利于提高肿瘤切除率、减少脑组织损伤,同时有利于神经血管的保护。

蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元变性及诱导型一氧化氮合酶变化

目的探讨蛋白酶体(proteasome)功能下降在帕金森病(PD)发病机制中的作用,以及模型大鼠脑内黑质部位诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是否参与蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导的多巴胺能神经元变性。方法将30只健康雄性SD大鼠分为5组(生理盐水对照组,1d组、3d组、1周组、3周组),每组6只。将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射至大鼠黑质部位,记录大鼠在不同时间点的行为学改变,并用免疫组化方法观察生理盐水对照组及不同时间点组(1d、3d,1周、3周)大鼠黑质区多巴胺能神经元变性及iNOS变化。结果Lactacystin注射1周后大鼠开始出现自发性活动减少,阿朴吗啡可诱导出旋转行为;3周后,30min旋转次数为258.90±11.56;实验3周组黑质部位TH阳性细胞减少。1d后iNOS阳性细胞明显增多,3d时达高峰,1周后开始下降,3周时基本消失。结论蛋白酶体功能下降可能是多巴胺能神经元变性的始动因素,而iNOS上调可能是多巴胺能神经元变性的重要过程。

苍白球或丘脑毁损术后帕金森病脑深部电刺激术疗效分析及策略

目的探讨脑深部电刺激术治疗苍白球或丘脑毁损术后帕金森病的可行性与疗效,并分析其治疗策略。方法选择2013年12月至2019年12月行神经核团毁损术后复发并再次行脑深部电刺激术的帕金森病患者共9例,观察术中、术后麻醉苏醒和随访期间不良事件,采用统一帕金森病评价量表(UPDRS)和日常生活活动能力量表(ADL)评价患者运动症状和日常生活活动能力改善情况。结果9例患者分别行单侧(2例)或双侧(7例)丘脑底核电刺激术,于毁损灶同侧和对侧所记录到的细胞放电频率均在400~500 Hz,无明显差异;术后症状均得到明显改善,以双侧丘脑底核电刺激术疗效更佳,无一例于术中或术后发生严重并发症。术前UPDRS评分为115.56±26.17,术后开机刺激3个月后评分为32.56±9.08,运动症状明显改善,手术前后评分差异具有统计学意义(t=10.853,P=0.000);术前ADL评分为38.56±6.09,术后开机刺激3个月为73.68±19.07,术后日常生活活动能力明显改善(t=10.850,P=0.000)。结论对于单侧苍白球或丘脑毁损术后出现肢体僵直和(或)震颤症状的患者,只要丘脑底核解剖结构完整,择期行丘脑底核电刺激术安全有效,以双侧丘脑底核电刺激术效果更佳。

安徽省立医院成功为一高龄脑溢血术后植物人开启“苏醒之门”

近日，安徽省立医院神经外科牛朝诗教授领衔的团队成功为一高龄高血压脑出血术后昏迷11个月患者实施“脊髓电刺激器植入术”，这是既首例特重度颅脑损伤昏迷患者后的技术应用再拓展，术后苏醒疗效满意。

蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型海马区HSP70表达

目的观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导帕金森病大鼠模型海马区HSP70表达。方法将Lactacystin 10μg(2μl)经立体定向仪注射到大鼠(Lactacystin组,n=36)左侧黑质致密部,对照组(n=36)以等体积生理盐水代替;分别在药物注射后24h、3d、5d、7d、9d、11d、14d、18d和21d提取海马标本,通过免疫组化和RT-PCR观察HSP70的表达。结果Lactacystin组大鼠海马区HSP70表达较对照组高,表现为注药24h后表达开始增高,5d达高峰,11d开始减少;且海马区表达分布呈CA3>CA2>CA1。结论Lactacystin诱导帕金森病大鼠海马区HSP70表达增高,且呈明显区域性和时间依从性;增加的热休克蛋白可能参与拮抗蛋白酶体抑制毒性而起到神经细胞保护作用。

安徽省立医院首例清醒麻醉联合术中磁共振辅助下脑肿瘤切除术

9月17日,安徽省立医院南区神经外科联合麻醉科开展了我省首例清醒麻醉联合术中磁共振辅助下左额叶功能区深部肿瘤切除术,整个术中患者与术者和麻醉医师沟通交流,且无任何痛苦.

安徽省立医院成功为帕金森病患者安装国产脑起搏器

安徽省立医院神经外科牛朝诗教授领衔的“帕金森病诊疗团队”成功为安徽省阜阳地区一名帕金森病患者安装由我国自主研发的“脑起搏器”-清华品驰脑起搏器。由我国清华大学自主研发的“清华脑起搏器”，还能自行充电，使得脉冲发生器电源的使用寿命达10年之久。患者王某，罹患帕金森病10年。先后就诊国内多家医院。入院时已完全不能行走，起坐不能，连最基本的日常生活如：穿衣、扣扣子都困难，多种药物联合服用仍无法控制症状．而且由于长期用药，患者已出现明显的药物异动症，体质较差，明显消瘦，完全生活不能自理。

多模态影像融合三维重建技术在颅内中央区脑膜瘤手术中的应用

目的探讨多模态影像融合三维重建技术在中央区脑膜瘤手术中的应用价值。方法与结果纳入2019年4月至2021年5月中国科学技术大学附属第一医院收治的46例中央区脑膜瘤患者,采用3D Slicer软件处理原始影像学数据,重建出肿瘤、瘤周静脉、大脑皮质、颅骨、头皮等三维模型,术前采用手机Sina软件进行体表投影辅助皮瓣和骨窗设计,结合术中实际肿瘤部位及其毗邻结构,验证术前重建效果,于显微镜下切除肿瘤。所有患者均完成术前重建,术中验证肿瘤及其毗邻解剖结构与术前三维重建模型相吻合,均无因术前规划不当引起术中肿瘤显露不充分带来的损伤。46例患者均全切除肿瘤,32例未出现肢体功能障碍、8例肢体功能明显改善、6例肌力下降;均未发生癫发作,1例出现术后感染;无一例死亡。结论3D Slicer三维重建技术应用于中央区脑膜瘤,可直观、多维度、动态、立体展示肿瘤及其毗邻解剖结构,指导术中最大程度地切除肿瘤及保护瘤周静脉和大脑皮质。手机Sina软件应用于中央区脑膜瘤术前定位具有精确、安全、无创性、方便等实用价值,值得进一步研究与推广。

苹果酸酶2乙酰化调控脑胶质瘤细胞增殖的机制

目的研究苹果酸酶2(ME2)的乙酰化修饰在恶性脑胶质瘤细胞系U87MG增殖中的功能及其分子机制。方法基于序列保守性并结合质谱数据库,预测ME2的乙酰化修饰位点,再构建点突变体,转染细胞,通过免疫沉淀(IP)和Western blot确定修饰位点;通过293T细胞纯化ME2野生型和突变体,检测乙酰化修饰对ME2酶活的影响;通过共转染、富集纯化并结合酶活实验,检测去乙酰化酶Sirtuin3(SIRT3)对ME2酶活、细胞内活性氧(ROS)及NADH水平的影响;在U87MG细胞中用shRNA敲低内源ME2后,回转野生型和模拟乙酰化突变型,检测ME2的乙酰化对细胞增殖的影响,并通过裸鼠成瘤在动物水平验证;通过Western blot在恶性脑胶质瘤临床样本中检测癌与癌旁组织中ME2的乙酰化水平差异。结果K156是ME2主要的乙酰化修饰位点,该位点的乙酰化会抑制ME2活性并抑制U87MG细胞增殖。SIRT3去乙酰化ME2,提高ME2活性,促进NADH的生成,降低细胞内ROS水平。结论SIRT3调控的ME2乙酰化修饰通过提高自身酶的活性,上调细胞NADH水平,降低ROS水平,从而促进U87MG细胞增殖。

槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用

目的探讨槲皮素对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞的诱导分化作用。方法 MTT法检测神经生长因子(NGF)、不同浓度槲皮素(5、12.5、25、50μmol/L)对PC12细胞增殖活性的影响。分别以NGF、不同浓度的槲皮素(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化,以PBS作为对照组,诱导3 d后,显微镜下观察并记录PC12细胞分化情况,统计分析细胞分化率(轴索长度≥细胞直径的细胞百分数)、具有轴索的细胞数、细胞平均轴索数、梭形细胞比例等细胞分化的形态学参数。结果 MTT检测发现:50μmol/L槲皮素可明显抑制PC12细胞增殖(P<0.05)。与对照组比较,NGF组、槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)的细胞均表现出显著分化特征(均P<0.05)。不同浓度槲皮素组(5、12.5、25μmol/L)诱导PC12细胞分化能力没有明显统计学差异。结论槲皮素可诱导PC12细胞分化,但没有明显剂量依赖性。