人脐带间充质干细胞连续静脉注射对大鼠的安全性及肝脏的影响

目的 探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)多次注射对大鼠的安全性及肝脏的影响,为hUC-MSCs临床应用的安全性提供支持。方法 取SPF级健康SD大鼠50只,随机分成阴性对照组(生理盐水)、溶媒对照组(白蛋白)、hUC-MSCs高剂量(1.0×10^(7)cells/kg)、中剂量(5.0×10^(6)cells/kg)、低剂量组(2.5×10^(6) cells/kg),每组10只,尾静脉注射给药4次,1次/周。在末次给药后24 h,采集大鼠血样,检测血生化指标(TBIL、AST、ALT、GGT)、血清细胞因子(IFN-γ、IL-17、TNF-α)以及T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+));观察大鼠肝脏重量、脏体比指数及组织病理学变化;提取大鼠肝脏组织总RNA,qRT-PCR分析Act1、IL-17A、Hsp90aa1基因水平的表达情况。结果 hUC-MSCs高、中、低剂量组多次静脉注射后,大鼠血生化、血清细胞因子IFN-γ、IL-17、TNF-α以及T淋巴细胞亚群、肝脏重量、脏体指数及组织病理学变化与阴性对照组、溶媒对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。hUC-MSCs可明显降低肝组织中IL-17A mRNA表达水平,对Act1、Hsp90aa1 mRNA表达未见明显影响(P>0.05)。结论 hUC-MSCs在1.0×10^(7)、5.0×10^(6)、2.5×10^(6) cells/kg剂量下多次静脉注射大鼠安全性好,可下调IL-17A水平。

松节方提取物对炎症动物模型的抗炎作用及机制探讨

该文旨在评价松节方提取物(SJF)的抗炎镇痛作用,尤其是对关节炎的抑制作用,并初步探讨其作用机制。采用二甲苯诱导的小鼠耳肿胀模型、醋酸诱导的小鼠疼痛模型、鸡II型胶原(CCII)诱导的大鼠关节炎模型,观察松节方提取物的体内抗炎镇痛活性和抗关节炎的作用,检测大鼠血清TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-1β含量,观察大鼠踝关节组织病理学变化。结果表明松节方提取物可减轻上述模型的炎症及疼痛症状,抑制CCII致关节炎大鼠滑膜组织炎性细胞浸润和滑膜组织增生,能显著降低关节炎大鼠血清TNF-α、INF-γ、IL-1β含量,升高血清IL-10含量。说明松节方提取物具有较好的抗炎镇痛作用,可明显抑制CCII所致大鼠关节炎,降低其关节组织损伤程度,其机制可能与调节炎症因子表达相关。

双氢青蒿素与火把花根配伍对佐剂性关节炎模型大鼠的保护作用

目的 研究双氢青蒿素与火把花根配伍对佐剂性关节炎模型大鼠的保护作用及其机制。方法 大鼠随机分为正常组、模型组、双氢青蒿素+火把花根配伍组(0.05 g/kg+3.75 g/kg)、双氢青蒿素组(0.1 g/kg)、火把花根组(7.5 g/kg),采用完全弗氏佐剂诱导大鼠关节炎模型。观察双氢青蒿素与火把花根配伍对佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀、踝关节组织病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶1(MMP-1)水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测足跖关节滑膜组织VEGFA、MMP-1及巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)蛋白表达情况,RT-qPCR检测足跖关节滑膜组织VEGF、MMP-1、MIF mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠左后足、右后足关节肿胀率和关节指数,血清炎症细胞因子水平,关节滑膜组织VEGF、MMP-1、MIF mRNA及蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,配伍组大鼠给药第21天左后足、右后足关节肿胀率和关节指数,血清IFN-γ、VEGF、MMP-1水平,关节滑膜组织VEGF、MMP-1、MIF mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 双氢青蒿素与火把花根配伍对佐剂性关节炎模型大鼠具有治疗作用,其机制可能是通过抑制VEGF、MMP-1、MIF表达,降低炎症因子水平而发挥作用。

净肝脂胶囊对高脂性脂肪肝的预防作用及其作用机理研究

目的:探讨净肝脂胶囊(JGZJN)对高脂性大鼠脂肪肝模型的预防作用及作用机理研究。方法:大鼠每天给予88%基础饲料+猪油10.0%+胆固醇1.5%+三号胆盐0.5%配方饲料,连续饲养3个月,建立高脂性脂肪肝大鼠模型。造模同时分别灌胃给药3个月后分别检测大鼠血清ALT、AST、AKP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、MDA、SOD、FFA、血液流变学(高切、低切、血浆粘度、还原粘度等);肝组织TG、TC、MDA、SOD、HL、LPL、FFA;取肝左叶用于常规病理学检查。结果:JGZJN对高脂性脂肪肝模型大鼠血清转氨酶ALT、AST和血清脂质TC、TG升高有明显降低作用;对血清FFA、MDA、全血切变率(低切)和红细胞聚集指数升高有明显降低作用;对血清SOD活性降低有明显升高作用;对大鼠肝组织的TC、TG、FFA、MDA升高有明显降低作用,而对肝组织HL、LPL、SOD活性降低有明显升高作用。病理组织学检查显示:JGZJN各给药组脂肪变性和炎症反应程度均较模型组有一定的减轻,其中以30g/kg剂量组减轻较为明显。结论:JGZJN具有预防实验性脂肪肝发生的作用,其作用机理可能与调节脂肪代谢、改善肝脏功能、抗脂质氧化作用有关。

昆明山海棠提取物对新西兰兔的胚胎-胎仔发育毒性研究

目的:研究昆明山海棠提取物对妊娠动物、胚胎及胎仔发育的影响。方法:取交配成功的新西兰雌兔,按体质量随机区组法分为溶剂对照组、阳性对照组(环磷酰胺,20 mg/kg)和昆明山海棠提取物高、中、低剂量组(15.0、7.50、3.75 g/kg,以生药量计),每组均至少18只。溶剂对照组和昆明山海棠提取物各剂量组雌兔在妊娠第6~18天灌胃水或相应昆明山海棠提取物药液,5 mL/kg,每天1次;阳性对照组雌兔在妊娠第10~13天于颈部皮下注射环磷酰胺,1 mL/kg,每天1次。依据《药物生殖毒性研究技术指导原则》相关要求,在实验期间观察并记录雌兔的一般情况、体质量和摄食量,并于妊娠第28天时对其实施安乐死,解剖后观察并记录其主要脏器、带胎子宫、胎盘子宫、胎盘、卵巢以及着床腺、吸收胎、死胎、活胎、黄体等相关指标,并对胎仔进行体质量、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标的检查。结果:与溶剂对照组比较,昆明山海棠提取物各剂量组孕兔的体质量、体质量增长、摄食量、主要脏器,孕兔妊娠、生殖功能以及胚胎形成和胎仔的生长发育、外观形态、内脏和骨骼发育等相关指标均未见明显异常改变(P>0.05);阳性对照组上述指标均有显著变化(P<0.05),表现出明显的孕兔母体毒性以及胚胎和胎仔发育毒性。结论:昆明山海棠提取物在剂量为3.75~15.00 g/kg(以生药量计)时对新西兰兔无明显母体毒性、胚胎或胎仔发育毒性。

松节方醇提物对类风湿性关节炎大鼠模型TCR Vβ亚族基因表达谱的影响

目的:研究松节方醇提物对类风湿性关节炎大鼠模型T细胞抗原受体(TCR)Vβ亚族基因表达谱的影响。方法:采用类风湿性关节炎(RA)大鼠模型,给予松节方2 w,观察RA大鼠踝关节组织病理学变化,免疫组化检测RA大鼠踝关节滑膜组织中TCR表达情况,提取大鼠血液、滑膜组织总RNA,qRT-PCR法分析Tcr Vb亚族基因变化。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠足关节肿胀百分率、关节指数及组织半定量评分明显升高,关节滑膜组织TCR强阳性表达,同时血液Tcr Vb1、Vb5的mRNA表达明显减弱,Vb6 mRNA表达明显增强(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,松节方醇提物能明显抑制RA大鼠滑膜组织炎性细胞浸润和滑膜组织增生,下调滑膜组织TCR阳性表达,同时上调血液Tcr Vb1、Vb3、Vb5及滑膜组织Tcr Vb1、Vb2、Vb5、Vb11、Vb12 mRNA表达,下调血液Tcr Vb4、Vb6、Vb7及滑膜组织Tcr Vb7 mRNA表达。结论:松节方醇提物对RA大鼠的作用机制可能是调节Tcr Vb的表达,改善免疫识别,激活有效免疫反应来对抗外来抗原。

双氢青蒿素与火把花配伍对迟发型超敏反应模型小鼠p-p38 MAPK及ICAM-1表达的影响

研究双氢青蒿素与火把花配伍对迟发型超敏反应小鼠的免疫抑制作用及可能的作用机制。通过建立迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,观察双氢青蒿素与火把花配伍对DTH小鼠的免疫抑制效应;苏木素-伊红(HE)染色观察耳组织病理学改变及单核细胞浸润程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中γ干扰素(interferon,IFN-γ)水平;免疫组化法检测小鼠右耳细胞黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表达水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测右耳磷酸化p38丝裂酶原激活蛋白激酶(p38 phospho mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK)蛋白的活性表达情况。结果显示,与正常组比较,模型组小鼠耳肿胀度、胸腺/脾脏指数、单核细胞浸润计数及浸润程度明显升高,血清IFN-γ含量显著升高;与模型组比较,双氢青蒿素与火把花配伍组小鼠耳肿胀度、胸腺/脾脏指数显著降低,单核细胞浸润计数及浸润程度明显减轻,血清中IFN-γ含量显著降低,右耳p-p38 MAPK和ICAM-1蛋白表达水平显著下调。表明青蒿素与火把花配伍能够明显抑制DTH反应,其可能通过抑制p38 MAPK磷酸化活性的表达,调节相关炎症因子IFN-γ的产生和分泌,进一步降低ICAM-1的表达,从而发挥免疫抑制作用。

沙苑子补肾固精的作用研究

目的:观察沙苑子对生精障碍动物的促生精作用及其对肾阳虚动物模型的影响。方法:通过建立生精障碍大鼠、小鼠模型及肾阳虚小鼠模型,计数生精障碍模型各组动物精子数量,观察各组精子的活力,测定血清性激素水平。测定肾阳虚模型各组小鼠肛温、游泳时间、自主活动、睾丸和精囊腺指数。结果:沙苑子提取物0.2,0.4 g.kg-1能明显增加生精障碍模型大鼠、小鼠的精子数、精子活动率及前列腺和精囊腺指数,能明显降低精子畸形数;能明显增加血清睾酮(T)含量,降低促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)水平;能明显增加肾阳虚模型小鼠的体温及自发活动次数、延长低温游泳存活时间及增加睾丸、精囊腺指数。结论:沙苑子提取物对生精障碍模型动物有显著的促生精作用,显著提高大鼠精子的质量,同时可改善血清性激素水平,对肾阳虚模型动物有明显的治疗作用。

松节方醇提物对类风湿关节炎模型大鼠T细胞抗原受体信号通路相关分子表达的影响

目的探讨松节方醇提物(SJF)对炎症动物模型T细胞抗原受体(TCR)信号通路酪氨酸激酶及磷酸酶相关分子表达的作用机制。方法采用类风湿关节炎(RA)大鼠模型,给予SJF 2周,酶联免疫吸附法(ELISA)检测RA大鼠关节液中蛋白酪氨酸激酶(Lck、Fyn、ZAP70)、酪氨酸磷酸酶(CD45)含量,观察RA大鼠踝关节组织病理学变化,免疫组化检测RA大鼠踝关节滑膜组织中Lck、Fyn、ZAP70、CD45表达情况。结果 SJF能显著降低RA大鼠关节液Lck、Fyn、ZAP70、CD45含量,抑制RA大鼠滑膜组织炎性细胞浸润和滑膜组织增生,同时明显下调滑膜组织Lck、Fyn、ZAP70、CD45的表达。结论 SJF对RA大鼠的作用机制可能是通过抑制异常激活的TCR信号通路酪氨酸激酶及磷酸酶相关分子的表达来调控其下游的各级信号通路转导功能,从而起到抗炎作用。

昆明山海棠对大鼠睾丸功能相关酶活性的影响

目的研究昆明山海棠染毒对大鼠睾丸功能相关酶的影响。方法 80只SD雄性大鼠随机分为正常对照组及5.0、10.0和20.0 g/kg 3个染毒组,连续灌胃3个月。于染毒1个月、2个月、3个月,测定睾丸酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH-X)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和ATP酶(ATPase)活性。结果昆明山海棠染毒后,大鼠睾丸ALP、LDH活性升高,LDH-X、SDH活性降低,ACP和ATPase活性先降低后升高。结论昆明山海棠可导致大鼠睾丸功能相关酶活性明显异常。

中药注射剂对I型变态反应试验的影响

目的:研究中药注射剂的过敏反应,测定致敏动物血清IgE抗体和组织胺含量,观察其与过敏反应是否具有相关性,为提高I型过敏反应试验预测的准确性提供实验依据。方法:选用3种中药注射剂进行PCA,ASA试验和类过敏反应研究,用ELISA法对致敏动物血清进行血清OVA-sIgE、血清总IgE、组织胺水平检测。结果:3种中药注射剂的PCA试验结果为阴性,血清总IgE水平与生理盐水组无明显差异;3种中药注射剂+OVA(不引起过敏反应的剂量)的研究中双黄连注射液(SHL)、鱼腥草注射液(YXC)的PCA试验均为阳性,OVA-sIgE水平明显增加,清开灵注射液(QKL)的PCA试验为阴性,OVA-sIgE水平增加不明显,各组血清总IgE水平增加不明显;3种中药注射剂的ASA试验结果为阳性;3种中药注射剂(临床剂量和临床等效剂量)均引起了豚鼠的类过敏症状,且反应强弱呈现剂量和注射速度依赖性,各给药组血清组织胺水平均较生理盐水组明显增高,血清总IgE水平无明显差异。结论:SHL和YXC具有增加豚鼠对卵蛋白敏感性的作用,SHL,YXC,QKL均能引起豚鼠的类过敏反应,3种中药注射剂的过敏反应的发生与特异性IgE抗体和组织胺水平有相关性。

金烫宝烧烫伤喷雾剂治疗烧烫伤创面愈合的研究

目的:观察金烫宝烧烫伤喷雾剂对大鼠浅Ⅱ度烫伤模型的治疗作用以及其抗炎镇痛作用。方法:采用SD大鼠浅Ⅱ度烫伤和KM小鼠足部烫伤创面模型评价其治疗烧烫伤作用;采用角叉菜胶致SD大鼠足肿胀和甲醛致KM小鼠疼痛模型来评价其抗炎镇痛作用。以上动物试验在造模同时分别皮肤涂抹不同质量浓度(0.59,0.39,0.20 g.mL-1)的金烫宝烧烫伤喷雾剂和阳性药物,模型组动物皮肤涂抹等容量的赋形剂。结果:金烫宝烧烫伤喷雾剂1.76 g/只能明显促进浅Ⅱ度烫伤大鼠模型皮肤创面的愈合,病理组织检查结果显示能够促进浅Ⅱ度烫伤大鼠皮肤表皮损伤和真皮胶原纤维束排列紊乱的修复,促进真皮毛囊增生,减轻炎症细胞对烫伤皮肤的浸润,对烫伤皮肤具有明显的修复作用;金烫宝烧烫伤喷雾剂0.12 g/只和0.08g/只能明显减少小鼠实验性烫伤足部组织含水量;金烫宝烧烫伤喷雾剂0.70 g/只对角叉菜胶所致大鼠足肿胀有明显的抑制作用;金烫宝烧烫伤喷雾剂0.12 g/只对甲醛引起的小鼠疼痛具有明显镇痛作用。结论:金烫宝烧烫伤喷雾剂具有促进烧烫伤创面愈合和抗炎镇痛作用。

CD44阳性人脐带间充质干细胞扰乱大鼠血小板稳态研究

目的 基于生物信息分析与动物实验探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)与机体血小板稳态的关系。方法 运用DisGeNET、GeneCards、STRING 11.5等数据库,分析hUCMSCs诱发血小板减少的靶点及通路。将SD大鼠随机区组分为5组:阴性对照组(0.9%氯化钠注射液)、溶媒对照(80 mg·kg^(-1)白蛋白)组和hUCMSCs高、中、低剂量(1.0×10^(7)、5×10^(6)、2.5×10^(6)个·kg^(-1),分别为临床等效剂量的10.0、5.0、2.5倍)组,每组6只,雌雄各半。每周按10 mL·kg^(-1)尾iv 1次,共4次,与临床拟用方法一致。全自动血液分析仪分析血小板相关的指标:血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV);剖取大鼠胸骨,取骨髓,制备骨髓涂片,瑞特-吉姆萨复合染液染色,光学显微镜下计数全片巨核细胞总数、产血小板巨核细胞数;测量脾脏总长度;苏木精-伊红(HE)和过碘酸-雪夫(PAS)染色脾脏作组织病理学检查;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析肝脏促血小板生成素(TPO)、血小板生成素受体(Mpl)、Krüppel样因子1(Klf1)、Friend白血病整合素1(FLI1)、GATA结合蛋白1(GATA1)mRNA变化。结果 hUCMSCs与血小板减少相关的靶点有209个,作用于158条信号通路,与血小板生成最密切的通路为造血细胞谱通路,包含了20个靶点。以平均连接度筛选出14个核心靶点:IL6、TNFRSF11A、CD34、KIT、IL4、CSF2、CSF3、IL3、IL2RA、TPO、EPO、TFRC、CD44、IL11。CD44既是核心靶点又是hUCMSCs阳性表面标志物。与阴性对照、溶媒对照组比较,hUCMSCs高、中、低剂量组PLT、PCT显著降低(P<0.05),PDW、MPV差异无统计学意义;hUCMSCs组全片巨核细胞总数、产血小板巨核细胞数差异无统计学意义;hUCMSCs高、中剂量组脾脏长度显著增加(P<0.05);PAS染色见hUCMSCs高、中剂量组脾脏血小板储存增加;hUCMSCs高、中、低剂量组肝脏组织TPO、Mpl、KLF1 mRNA表达显著增加(P<0.05),FLI1、GATA1 mRNA表达变化不显著。结论 CD44+hUCMSCs可能通过促脾脏吞噬血小板,增加血小板在脾脏中储存,使血液中PLT、PCT减少,从而扰乱血小板稳态。

火把花根片对SD大鼠围产期毒性的试验研究

目的:观察火把花根片对孕期、哺乳期的SD大鼠及子代生长发育和生殖功能的影响。方法:试验设4组,即火把花根片7.5、15.0、30.0 g生药/kg和溶媒对照组(纯化水),各组雌鼠从妊娠D15至子代(F1代)大鼠离乳(出生后D21)灌胃给药,每天1次;对亲代的生殖能力和子代的生长发育、生殖能力进行观察。结果:给药后亲代雌鼠和子代大鼠一般状况良好,体重、摄食量无异常变化;亲代雌鼠生殖功能、哺乳、胚胎发育,子代大鼠生理发育、反射机能、行为学习、生殖功能等指标均未见异常(P>0.05)。结论:火把花根片7.5 g生药/kg^30.0 g生药/kg对亲代大鼠的妊娠、哺乳、胚胎和子代大鼠生长发育、生殖能力未见明显毒性。

网络药理学结合动物实验初步探究火把花根片的睾丸毒性

目的 通过网络药理寻找火把花根片(HBHGH)脱靶靶点,并进行动物实验验证火把花根片睾丸毒性分子机制。方法 运用维普网、中药系统药理疗数据库与分析平台和人类基因组注释数据库等数据库,采用网络药理学方法分析火把花根片脱靶靶点及通路;将雄性KM种小鼠随机分为2组,即药物组和溶媒对照组,分别灌胃火把花根片1.0 g/kg·bw及等体积纯化水(20 ml/kg·bw),6个月后,采集睾丸样本,分别称量睾丸重量、计算睾丸相对指数、定性观察睾丸组织病理学变化、RT-PCR检测NR4A1、Bax、Bcl-2、3β-HSD、INSL3、Cyp17a1和Star mRNA表达。结果 火把花根片脱靶靶点包括AR、NR4A1、ESR2,NR4A1因生物功能及作用通路与睾丸毒性相关成为实验验证的靶点;火把花根片持续6个月重复给药诱导了小鼠睾丸毒性;组织病理学检查可见药物组曲精管凋亡、萎缩、间距改变,腔内皮改变,精原细胞和精母细胞数量改变;在检测的mRNA中,NR4A1、Bax、3β-HSD和INSL3较溶媒对照组升高,Bcl-2低表达,Bax/Bcl-2比值升高,其余Cyp17a1和Star变化不明显。结论 NR4A1是火把花根片诱导睾丸毒性的重要靶点,可能与调控凋亡(Bcl-2、Bax)和激素-精子生成(3β-HSD、INSL3)有关。

安全状况的不平等

2015年6月19日的《大西洋》杂志上，刊载了爱德华·德尔曼的文章《安全状况的不平等》。在文中，德尔曼介绍了全球各个国家和地区在“和平”与“安全”问题方面的不平等状况。相较于对“收入不平等”的谈论，人们似乎较少谈及“战争的不平等”。但是此类差距不仅存在，而且根据澳洲经济与和平研究所的最新报告，它还正在呈现出扩大趋势。