当归对宫内缺氧新生大鼠大脑皮质神经元与VEGF mRNA表达的影响

目的探讨宫内缺氧对新生大鼠大脑皮质神经元与VEGF mRNA表达的影响以及当归的调控作用。方法孕14d健康SD雌性大鼠15只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各5只,于孕14d开始将当归组与缺氧组孕鼠置于低张氧浓度三气培养箱中,制作胎鼠宫内缺氧模型,此前一小时按8mL/kg分别给予当归和生理盐水尾静脉注射,对照组不缺氧,余同缺氧组。三组孕鼠分娩当日每窝随机选取新生鼠4只,取脑组织多聚甲醛固定,石蜡包埋切片、NSE mRNA、VEGF mRNA原位杂交,400倍拍照、IPP6.0软件图像分析。结果缺氧组新生大鼠大脑皮质NSE mRNA阳性细胞数较对照组减少,积分光密度值(IOD)降低(P<0.05),VEGF mRNA阳性细胞IOD值升高(P<0.05);当归组新生大鼠大脑皮质NSE mRNA阳性细胞数较缺氧组增多、IOD值增高(P<0.05),VEGFmRNA阳性细胞IOD值增高(P<0.05)。结论宫内缺氧可致新生大鼠大脑皮质神经元受损,当归注射液对此损伤有一定保护作用,其机制可能是通过上调大脑皮质VEGF mRNA的表达而使缺氧环境改善。

留学生组织胚胎学全英文教学的实践与体会

针对目前医学院校留学生全英语教学现状及存在的主要问题,结合本校教学实践,探讨了我院组织胚胎学教研室为提高留学生全英语教学质量所采取的措施,为进一步提高和改进留学生教学提供参考。

组织学考试方法改革探索

为正确评价学生应用知识解决问题的能力,突出培养具有创新能力的医学人才,教研室通过平时阶段性考试、绘图作业、随堂抽问、综合性实验考试、理论闭卷考试等多元化考试形式,以基础知识为主、突出学生综合能力与创新能力的考核内容为导向,总成绩等于综合理论考试占70%(期末理论占60%,课堂提问10%)+综合标本考试占30%(期末多媒体标本考试10%,组织芯片考试10%,平时随堂考核与绘图作业10%)的评价方式,创立了科学的组织学考试模式,使成绩结构多样化、考试形式多元化,能更真实地反映学生的学习情况,也提高了教学质量。

关于加强医学发育生物学教学的几点思考

医学发育生物学是研究人体从胚胎发生、生长发育至衰老死亡的生命过程中所发生的变化和规律的科学，是传统胚胎学的深入和发展，也是发育生物学的一个重要组成部分。我院从2002年开始开设了《医学发育生物学》这门课程，目前，这门学科的教学模式尚处于探索过程中，课程建设这一重要问题已摆在我们面前，笔者参加了这门学科的教学工作，总结以下几点体会。

神经干细胞培养及其影响因素

背景:神经干细胞移植治疗是中枢神经系统损伤性、难治性疾病研究的热点。如何有效提高神经干细胞存活率、克隆形成率将是其应用的重要基础和前提。目的:探讨影响神经干细胞培养质量的可能因素,为神经干细胞的基础和临床应用研究提供参考。方法:①神经干细胞分离和培养:分离出生24h内SD大鼠的大脑,剪碎离心后以1×108L-1的浓度接种,经含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基预培养4h后改用无血清条件培养基(DMEM/F12,碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、B27)培养,2d或3d换液1次,6d时传代。②神经干细胞鉴定:倒置显微镜下观察细胞形态及生物学特性;免疫组化检测第3代细胞神经巢蛋白表达和诱导分化后神经元特异性烯醇化酶和神经胶质酸性蛋白的表达。结果与结论:出生24h的新生大鼠可获得足量的神经干细胞;血清预培养可提高神经干细胞的增殖和存活率;免疫组化结合血清诱导分化可对培养的神经干细胞进行定性鉴定。取材时间、细胞接种密度、传代时间、细胞因子、血清等多种因素都将影响神经干细胞的培养质量。

Ⅰ型糖尿病胃轻瘫大鼠动物模型建立与优化

目的探讨I型糖尿病胃轻瘫大鼠模型的建立方法,为糖尿病胃肠动力障碍研究提供合理的平台。方法链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射方法建立I型糖尿病动物模型,观察大鼠一般状况、血糖、胃排空、小肠传输速率。结果①模型组大鼠于造模后均出现糖尿病症状;平均体重明显低于对照组(P<0.01);平均血糖浓度显著高于对照组(P<0.01)。②模型组大鼠胃内色素残留率明显高于对照组(P<0.01);小肠传输速率显著慢于对照组(P<0.01)。结论链脲佐菌素一次性腹腔内注射10周后能成功诱导出糖尿病胃轻瘫大鼠模型。

精原干细胞体外非分化扩增的初步研究

目的探讨精原干细胞体外非分化性扩增的影响因素。方法采用昆明系小白鼠骨髓基质细胞原代培养，待细胞长成单层后经丝裂霉素C处理，作为精原干细胞培养的饲养层，细胞在37℃环境下培养。结果接种后2～4d，精原干细胞数明显增加，细胞单个、成双或成群，非精原干细胞开始出现崩解死亡；接种4～8d，精原干细胞增殖不明显，处于相对静止期；接种10d后，又开始出现明显的分裂增殖，15d已具有精原干细胞特征，继续培养25d，细胞形态未见明显改变，胞质桥仍明显。结论精原干细胞能在37℃环境温度下，在以骨髓基质饲养层上保持良好非分化性扩增。

内外侧小切口在小儿肱骨髁上骨折的治疗中的应用

目的探讨内外侧小切口在小儿肱骨髁上骨折中的应用。方法本组共42例,均为Gartland Ⅲ型骨折。所有病例均经过急诊手法复位,因对位不理想或骨折不稳定而接受手术治疗。采用肘关节内外侧进路,直视下对合骨折并用2枚克氏针交叉固定,石膏固定4周。结果42例均获得半年以上随访。除1例提携角较对侧有10°以上改变,1例肘关节伸屈受限范围>15°外,其他肘关节活动恢复优良,无血管神经并发症。结论肘内外侧进路切开复位治疗Gartland Ⅲ肱骨髁上骨折,方便了直视下内外髁的准确对位,避免误伤尺神经,降低了肘内外翻的发生率,隐藏了切口,达到美观作用,而且能够使骨折得到满意的复位和固定,有效避免了医源性尺神经损伤,并可以获得良好的肘关节外形和功能。

组织学实验教学中融入互动式教学法探讨

组织学是一门重要的医学基础课程,它为学习其他基础医学课程和临床学科奠定了必要的形态学基础,而实验教学是整个教学过程中的重要环节。为加强组织学实验教学效果,在组织学实验教学过程中融入了互动式教学法,通过多种方式加强师生互动,有利于激发学生学习兴趣,培养学生自主学习的能力和创新能力,明显提高了组织学教学质量。

当归对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞增殖的影响

目的探讨宫内缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用。方法将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组。缺氧组孕鼠自孕第14天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 m l/kg(连续7d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3d:孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组。孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织,常规石蜡切片,经巢蛋白(nestin)免疫组织化学染色后行图像分析。结果缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度(IOD)值较对照组增加[IOD缺氧组:(14 806±4 636.8);IOD对照组:(7 387±3191.7),P<0.05];当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱[IOD治疗组:(9 859±2 386.4),P<0.05]。结论一定程度的缺氧可刺激神经干细胞增殖;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞可能具有保护作用。

大黄素对Ⅰ型糖尿病大鼠血糖及体重的影响

目的揭示Ⅰ型糖尿病大鼠血糖、体重改变及大黄素对其影响。方法健康SD大鼠适应性喂养1 w,选择血糖正常者40只,随机选取10只作为对照组,其余大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg制作糖尿病模型(对照组注射等量柠檬酸缓冲液)。3 d后禁食不禁水6 h,采尾血测空腹血糖,STZ注射后第10 d(成模初期)再测血糖,以血糖≥16.9 mmol/L为造模成功。成模大鼠随机分为糖尿病组(10只)与大黄素组(10只)。成模2 w后,对照组与糖尿病组以PBS 5 ml/kg灌胃,大黄素组用8 g/L大黄素混悬液灌胃,5 ml/kg,1次/d,直至成模后第10 w。STZ注射后第3 d、第10 d(成模初期)及成模后第10 w,检测各组血糖及体重变化。结果 (1)成模初期,3组体重无差异;与对照组相比,糖尿病组与大黄素组血糖均升高,但两组间无显著差异。(2)成模后第10 w,与对照组相比,糖尿病组与大黄素组体重均减轻,血糖均升高;与糖尿病组相比,大黄素组体重无差异,血糖降低。(3)成模后期与初期相比,对照组体重增加,血糖无改变;糖尿病组体重减少,血糖升高;大黄素组体重减少,血糖无改变。结论大黄素可降低Ⅰ型糖尿病大鼠血糖浓度,对体重无影响。

“互动式”精品课程网络教学平台的构建和应用研究

随着教育教学改革的不断深入,各个学校都会努力打造精品课程,而精品课程网络教学平台的构建和应用,是近年来广大教育工作者关注的热点问题。本文从分析当前精品课程网络教学平台建设存在的主要问题出发,指出其需要完善的方向。然后结合课题实际,对如何构建"互动式"精品课程网络教学平台进行了研究,提出了具体的措施和办法。

小鼠精原干细胞生物学特征的研究

目的:探讨培养状态下精原干细胞的生物学特征,为体外鉴定精原干细胞及认识精原干细胞在体内的生物学行为打下实验基础。方法:在预先制备的骨髓基质饲养单层上接种生后6￣10天雄性小鼠生精细胞,于IMDM培养基及37℃下培养,倒置显微镜观察细胞增殖行为并对增殖后的细胞进行组织学、细胞化学、免疫组化及遗传学检测。结果:培养状态下的精原干细胞增殖经历了短暂增殖期、静止期和分离增生期三个阶段,且增殖细胞呈簇、团状生长,细胞间可见明显的胞质间桥,细胞核大,核/质比高,碱性磷酸酶及C-KIT受体阳性,染色体核型为20对(40条)。结论:精原干细胞具有典型的生物学行为和特征,结合行为及生物学特征可对增殖的精原干细胞进行鉴定。

大鼠非酒精性脂肪肝模型构建的方法探讨

目的建立大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,为深入探讨非酒精性脂肪肝的发病机制及药物治疗提供实验参考。方法取Wistar大鼠60只,随机分为对照组15只(常规饮食喂养),模型组45只(高脂、高胆固醇饮食组)喂养,12周后处死动物取出肝脏,经H-E染色、组织化学与免疫组织化学染色观察造模情况。结果模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,eNOS免疫组化显示肝中央静脉和门管区内皮细胞呈强阳性。结论高脂、高胆固醇饮食是诱导非酒精性脂肪肝形成的重要诱因,降低其摄入是有效预防该疾病的重要措施,此外eNOS在病变早期起到减轻肝损伤的作用。

小鼠精原干细胞染色体G带显示及其影响因素研究

目的:探索精原干细胞染色体G带显示技术及其影响因素,为如何鉴定培养状态下干细胞的染色体核型提供实验参考。方法:培养昆明系小白鼠精原干细胞,待细胞生长到15￣20天时,吸出克隆细胞团,吹打分散后滴加秋水仙素处理4￣6小时。收集细胞悬液,再经低渗处理后滴片染色制成。结果:正常小鼠精原干细胞染色体呈粒状、棒状,核型为20对,40条。结论:小鼠精原干细胞染色体受到细胞所处的分裂时期、低渗处理的效果、滴片时细胞的分散程度及胰酶浓度及消化时间等因素的影响。