槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌细胞的特异性杀伤效应

目的:研究植物源性黄酮类化合物单体槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞的杀伤作用。方法:体外培养人结直肠癌细胞K-Ras突变型CRC细胞系(DLD1K-RAS G13D)和K-Ras野生型CRC细胞系(DLD1K-RAS WT),分别给予50和100μM的槲皮素处理24h,采用MTT和集落形成实验,观察细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting测定DLD1K-RAS G13D和DLD1K-RASWT的Ras信号通路相关蛋白AKT、JNK、MEK和ERK的表达。结果:槲皮素(50-100μM)处理24h后,与DLD1K-RASWT相比,突变型细胞DLD1K-RAS G13D增殖和集落形成明显降低(P<0.05)。槲皮素处理后,cleaved-PARP和caspase-3活化明显增强;磷酸化的AKT(p-AKT)随槲皮素浓度增加表达降低,在KRAS突变细胞中上述变化更加明显。结论:槲皮素通过caspase依赖凋亡通路诱导K-Ras突变细胞凋亡,并通过抑制AKT信号通路的活化,特异性抑制K-Ras突变细胞的增殖和集落形成。

生皮散对大鼠Ⅲ期压疮创面的保护作用

目的观察生皮散对大鼠Ⅲ期压疮创面的保护作用。方法将SD大鼠随机分成6组,每组10只,分别为模型组,空白组,阳性药(七厘散)组,生皮散高、中、低剂量组(1.8、0.9、0.45 g/kg)。给药前3 d除空白组外,其余各组制备大鼠Ⅲ期压疮模型,连续15 d于创面处给药,分别在造模成功后第0、3、7、10、15天测量创面面积;15 d后处死大鼠,取一部分创面皮肤组织进行HE染色,一部分进行肿瘤坏死因子α(TNF-α)的测定。结果七厘散组和生皮散各剂量组均显著缩小创面面积(P<0.01),降低局部组织中TNF-α的水平(P<0.01),HE染色结果显示炎性浸润程度明显减轻,新生肉芽组织明显增多。结论生皮散通过抑制压疮局部炎症细胞释放TNF-α而促进组织的修复,具有明显的生肌、抗炎作用。

重组人生长激素对败血症大鼠的实验治疗

目的 :观察重组人生长激素 (rhGH)对败血症大鼠的治疗效果并探讨其作用机制。方法 :观测正常对照组、败血症组及败血症 +rhGH组大鼠平均动脉压 (MAP)、白细胞计数、血浆TNFα、IL - 1β和内毒素 (ET)水平及 1周存活率。结果 :( 1)rhGH能明显减轻败血症大鼠MAP的下降、降低血浆TNFα及ET水平并提高其中性粒细胞比例 ;rhGH能显著提高败血症大鼠 1周存活率。 ( 2 )各组血浆IL - 1β浓度在各时点均无明显变化。 结论 :rhGH对败血症大鼠具有较理想的治疗效果 ,其机制可能与rhGH改善败血症大鼠的循环功能障碍、保护肠粘膜屏障、减轻肠道细菌/ET移位及抑制TNFα的生成和释放等有关。

重组人生长激素对腹腔大肠埃希菌感染大鼠内毒素血症影响的实验研究

目的 观察重组人生长激素 (rh GH)对严重腹腔内大肠埃希菌感染大鼠内毒素血症的影响。方法 SD大鼠 75只 ,随机分为正常对照组、感染组和治疗组 (后两组又再分为 1d、3d两个亚组 ) ,每组 15只 ;感染组 :腹腔注射鸵鸟株大肠埃希菌标准菌株悬液 (1× 10 10 CFU/L ,15ml/kg) ;治疗组 :腹腔注射大肠埃希菌后给予rh GH(2 .2 5U·kg 1·d 1)肌内注射治疗 ;于注射后 2 4、72h分别测定各组大鼠的血浆内毒素含量、血浆TNFα浓度、白细胞总数和分类计数及平均动脉压 (MAP)。结果 感染组血浆内毒素含量显著升高 ,2 4h和 72h分别为 (0 .2 5 6±0 .0 5 2 )和 (0 .189± 0 .0 5 2 )EU/ml,明显高于对照组 [(0 .111± 0 .0 5 3)EU/ml,P <0 .0 1],血TNFα明显升高 [(3.5 9± 0 .6 9) / (2 .88± 0 .74 ) μg/L ,P <0 .0 5 ],呈现典型而严重的感染性休克临床经过 ,MAP显著降低 [(8.99± 3.0 1) / (16 .6 1± 1.85 )kPa,P <0 .0 1];治疗组血浆内毒素含量在感染后 2 4h轻度升高 [(0 .15 0± 0 .0 39)EU/ml],72h降至正常对照水平 [(0 .10 8± 0 .0 4 2 )EU/ml],与感染组比较 ,两个时点差异均有显著性 (P <0 .0 1) ,72h血TNFα浓度 [(1.5 4± 0 .36 ) μg/L]明显低于对照组 [(2 .88± 0 .74 ) μg/L ,P <0 .0 1]和感染组

递进性开放式实验教学模式培养学生创新能力

以培养具有创新精神和终身学习能力的本科生为目标,遵从学生群体学习能力的客观规律,对传统的机能学实验课程进行改革,形成递进式开放性的实验教学模式。通过“基本技能培训—综合性试验—探索性实验—自主创新性科研”循序渐进的教学模式,引导和激励大部分学生逐步养成探索创新的思维。这种以创新培养为主的教学模式具有科学性、先进性、前瞻性和自主性,试行阶段极大程度地调动了学生参与的积极性,也促进了教师自身业务水平的提高,形成了以科研促教学的“教学-研究”良性循环,从根本上提高了教学质量,为造就出具有科学探索精神、活跃的创新思维能力和熟悉科研技能的全能型人才打下了坚实的基础。

重组人生长激素对大肠杆菌感染性休克及其预后影响的实验研究

目的 研究重组人生长激素 (rh -GH)对大肠杆菌感染性休克大鼠模型休克的临床过程及其预后的影响。方法 SD大鼠 75只 ,随机分为正常对照组、感染组和治疗组 (后两组又再分为 1d、3d两个亚组 ) ,每组 1 5只。感染组 :腹腔注射鸵鸟株大肠杆菌标准菌株悬液 (1× 1 0 1 0 cfu/L ,1 5mL/kg)制成感染性休克模型 ;治疗组 :腹腔注射大肠杆菌后给予rh -GH(2 2 5U·kg- 1 ·d- 1 )肌肉注射治疗。分别于注射后 2 4、72h测定血压、血浆TNF -α浓度、血常规等 ,测定结束后解剖观察大鼠肺、心、肾、肝、胃肠等脏器的病理改变。另有 39只大鼠随机分为正常对照组、感染组和rh -GH治疗组 ,每组 1 3只 ,处理同前 ,观察 2 4h存活率。结果 感染组大鼠呈现典型而严重的感染性休克临床经过 ,MAP显著降低 [(67 4± 2 2 6) / (1 2 4 6± 1 3 9)mmHg ,P<0 0 1 ] ,血TNF -α明显升高 [(3 59± 0 69) / (2 88± 0 74) μg/L ,P <0 0 5] ,肺组织广泛实变、出血及灶性坏死 ,2 4h存活率仅46 2 % (6/ 1 3) ;治疗组血压基本维持稳定 [(1 1 4 4± 1 5 9) / (1 2 4 6± 1 3 9)mmHg] ,72h时血TNF -α浓度 [(1 54± 0 36) μg/L]明显低于对照组 (P <0 0 1 )和感染组 (P <0 0 5) ,肺组织改变轻微 ,2 4h存活率 (1 1 / 1 3 。

重组人生长激素对腹腔大肠杆菌感染大鼠内毒素血症影响的实验研究

目的 :观察重组人生长激素 (rh -GH)对严重腹腔内大肠杆菌感染大鼠内毒素血症的影响。方法 :SD大鼠 75只 ,随机分为正常对照组、感染组和治疗组 (后两组又再分为 1天、 3天两个亚组 ) ,每组 15只。感染组 ;腹腔注射鸵鸟株大肠杆菌标准菌株悬液 (1× 10 10 cfu/L ,15ml/kg) ;治疗组 :腹腔注射大肠杆菌后给予rh -GH (2 2 5iu .kg-1.d-1)肌肉注射治疗。于注射后 2 4h、 72h分别测定各组大鼠的血浆内毒素含量、血浆TNFα浓度、白细胞总数和分类计数及平均动脉压 (MAP)。结果 :感染组血浆内毒素含量显著升高 ,2 4h和 72h分别为(0 2 5 6± 0 0 5 2 )和 (0 189± 0 0 5 2 )EU/ml,明显高于对照组 [(0 111± 0 0 5 3)EU/ml,P <0 0 1],血TNFα明显升高 [(3 5 9± 0 6 9) /(2 88± 0 74) μg/L ,P <0 0 5 ],呈现典型而严重的感染性休克临床经过 ,MAP显著降低[ (6 7 4± 2 2 6 ) / (12 4 6± 13 9)mmHg,P <0 0 1];治疗组血浆内毒素含量在感染后 2 4h轻度升高 [(0 15 0±0 0 39)EU/ml],72h降至正常对照水平 [(0 10 8± 0 0 42 )EU/ml],与感染组比较 ,两个时点均有显著差异 (P <0 0 1) ,72h血TNFα浓度 [(1 5 4± 0 36 ) μg/L]明显低于对照组 [(2 88± 0 74) μg/L ,P <0 0 1]和感染组[(2

创新综合性医学机能实验教学的改革

机能实验学作为基础医学教学一门重要学科,其教学改革和探索是一项长期而艰巨的任务。针对目前机能学所出现的生理学、病理生理学、药理学这三门学科融合难的问题,以及以培养具有创新精神和终身学习能力的本科生为目标,四川大学机能学实验室十八年来在整合教学资源和创新实验教学方面积累了丰富的经验,探索出医学机能学实验教学的新模式,提高了学生的基本技能和自主创新能力,为造就出具有科学探索精神、活跃的创新思维能力和熟悉科研技能的全能型人才打下了坚实的基础。

注射用清开灵冻干粉的一般药理作用研究

目的:观察注射用清开灵冻干粉对动物中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响及对戊巴比妥钠阈下催眠剂量作用的影响。方法:尾静脉注射给予小鼠不同剂量注射用清开灵冻干粉,或同时腹腔给予阈下催眠剂量的戊巴比妥钠,观察小鼠一般行为学指标和自主活动的变化,以及对戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响;给予麻醉犬不同剂量清开灵冻干粉观察该药对血压,心电图以及呼吸指标的影响。结果:注射用清开灵冻干粉大剂量(210.18 mg/kg)对小鼠有中枢神经系统抑制作用(P<0.05),并有延长巴比妥类睡眠时间的作用(P<0.05)。对犬心血管系统及呼吸系统的影响试验结果显示,清开灵冻干粉各剂量(43.92 mg/kg、21.96 mg/kg、10.98 mg/kg)均对麻醉犬心血管系统及呼吸系统均无影响(P>0.05)。结论:注射用清开灵冻干粉有一定程度的中枢神经系统抑制作用。对心血管系统(心率、心率节律、心电图)、呼吸系统(呼吸频率、呼吸深度、呼吸节律)无明显影响。

重组人生长激素对内毒素血症大鼠的治疗作用

目的 :观察重组人生长激素 (rhGH)对大鼠内毒素血症的治疗效果。方法 :76只SD大鼠随机分为正常对照组、内毒素血症组 (仅腹腔注射鸵鸟株大肠杆菌 (1 5ml/kg ,1× 1 0 10 cfu/L)及治疗组 (腹腔注射鸵鸟株大肠杆菌后行rhGH肌肉注射 (2 2 5IU/kg/d)。内毒素血症组及治疗组又依观察时点再分为 1天、3天两个亚组。采用放射免疫分析方法测定血浆肿瘤坏死因子 α(TNF α)浓度并观测大鼠血压的变化。结果 :与正常对照组相比 ,无论是内毒素血症组还是治疗组 ,1天时其大鼠血浆TNF α浓度均明显升高 (P <0 .0 5 ) ;虽然两组大鼠血压都降低 (P <0 .0 5 ) ,但治疗组大鼠血压降低幅度明显小于内毒素血症组 (P <0 .0 0 1 )。 3天时 ,内毒素血症组大鼠血浆TNF α浓度降至正常对照水平 ,而治疗组大鼠血浆TNF α浓度却明显低于正常对照组 (P <0 .0 0 1 )及内毒素血症组 3天水平 (P <0 .0 5 )。结论 :rhGH能明显减轻内毒素血症大鼠血压的下降 ,对内毒素血症大鼠具有较理想的治疗效果 ;

生皮散对大鼠感染性创面微循环的保护作用

目的观察生皮散对大鼠感染性创面微循环的保护作用。方法将SD大鼠随机分成6组,每组10只,分别为空白组,模型组,阳性药(七厘散)组,生皮散高、中、低剂量组(1.8 g/kg、0.9 g/kg、0.45 g/kg)。除空白组外,各组大鼠制备皮肤全层缺损,且创面接种金黄色葡萄球菌形成感染性创面。除模型组外,各组大鼠创面处分别于术后第3 d外敷七厘散和各剂量的生皮散,连续12 d于创面处给药,分别在造模成功后第3、5、7、10、15 d测量创面面积。并观察创面造模前和给药后(15 d)微循环血流灌注量(PU)、血细胞聚集程度(CMBC)以及运动血细胞的速率(Velocity)。15 d后处死大鼠,取创面皮肤组织进行HE染色。结果七厘散组和生皮散各剂量组均显著缩小创面面积(P<0.01);HE染色结果显示经过生皮散治疗后,创面的炎性浸润程度明显减轻,新生肉芽组织明显增多;生皮散显著降低创面微循环PU、CMBC及V的变化率(P<0.05)。结论生皮散通过改善创面的微循环而促进组织修复,具有明显的生肌作用。

新一代动物无创血压测定仪的研制及性能检验

目的:研制新一代“动物无创血压测定仪”。方法:本研究利用与人血压测定相似的原理,以自行开发、拥有自主知识产权的专用软件克服了动物舒张压的测定点较难精确标定的困难,成功研制出新一代“动物无创血压测定仪”。并与经典的动物有创血压测定法行同步比较。结果:在正常血压、高血压、低血压等不同情况下,两法测值极为相近,相关系数皆大于0.9。结论:本研制的新一代“动物无创血压测定仪”可作为家兔、大鼠血压无创测定的可靠方法。

金关片对小鼠高尿酸血症的药效作用研究

目的探讨金关片对小鼠高尿酸血症的药效作用。方法小鼠分为造模给药同时进行处理,以及造模后给药处理。每类处理都将小鼠随机分为阴性对照组(5%-CMC-Na溶液20 mL/kg)、模型组、阳性药对照组(别嘌呤40 mg/kg),金关片高、中、低剂量组(金关片2.4 g/kg、1.2 g/kg、0.6 g/kg)。通过饲喂小鼠酵母膏造成高尿酸血症模型,对各组动物分别于造模第7日(造模给药同时进行),和造模第10日(造模后给药处理)末次给药30 min后,经眼眶后静脉丛取血,测定小鼠血清中尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量。结果金关片能显著降低血清中UA、BUN、Scr水平(P<0.05或P<0.01),降低水平以造模给药同时进行组更明显。结论金关片能显著降低高尿酸血症小鼠尿酸水平;并显著降低高尿酸血症所致的高尿素氮、高肌酐水平;对模型形成过程小鼠血清中尿酸水平有良好抑制效果。

参麦注射液对^(60)Co照射小鼠血液系统作用的研究

目的 :观察参麦注射液 (SMI)对于放射性损伤所致的小鼠血虚证的治疗作用。方法 :采用6 0 Co照射小鼠 ,造成小鼠白细胞减少模型 ,即产生小鼠血虚证。评价SMI对于6 0 Co所致的小鼠血虚证的治疗作用。结果 :SMI对6 0 Co照射所致小鼠血虚证症状如虚汗多、寒战、精神萎靡有一定程度的抑制作用 ,尤其对6 0 Co照射所致小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数的减少有明显对抗作用 ,与模型组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。试验还显示 ,照射后四天SMI大、中剂量组小鼠骨髓有核细胞数与阴性对照组无显著性差异 ,说明其骨髓造血功能比较活跃 ,提示SMI对放射性损伤所致小鼠血虚证有一定的保护和治疗作用 ,对于小鼠白细胞减少有较好的治疗效果。结论 :SMI对小鼠放射性损伤所致血虚证有一定的保护和治疗作用。

机能学实验结果分析能力培养方式探究

医学机能实验学是一门研究机体正常机能,疾病发生机制和药物作用规律的实验性科学。在以动物为主的实验中,实验结果往往与预期不一致。根据实验中可能出现的多种情况,构建“机能学实验结果分析思路图”,旨在帮助学生提高对实验结果的观察、分析、处理能力,培养学生的科研思维和严肃的科学态度,启发科研探索性意识和团队协作精神,逐步形成严谨的科研思维,为今后科研工作奠定基础。

改良闭胸盲插法测量家兔右心室内压

目的:探讨改良闭胸盲插法在家兔右心室内压中的应用。方法:选取新西兰白兔12只,雌雄不限,随机分为对照组(n=5)和实验组(n=7)。所有动物经耳缘静脉注射1.5%戊巴比妥钠溶液(0.03 g·kg-1)麻醉后,行气管插管,连接BL420i生物信息系统,耳缘静脉注射0.5%肝素生理盐水溶液1 ml·kg-1使得家兔全身肝素化。随后,对照组采用直接导管法(PE50管)测定家兔右心室内压;实验组采用改良套管法,从颈内静脉与颈外静脉交叉处插入头皮针管做成的外鞘管(长8 cm),结扎固定后插入尖端微弯曲的PE50内鞘管。两组插管过程中均持续观察血压,待收缩压为25 mmHg左右,舒张压值为0 mmHg时提示插管进入右心室。结果:实验组采用一次性使用静脉输液针管作为外鞘管,因具有自然弯曲的弧度,可为内鞘管进入心脏导引方向,有效避免插管进入下腔静脉,成功率高,操作简便,成本低廉。结论:本研究成功建立了一种既简便高效又稳定的右心室插管法,可监测右心室内压,为今后研究右心室及肺动脉的功能提供了有效手段。

参附注射液对失血性休克犬血流动力学的作用

目的:研究参附注射液对失血性休克犬血流动力学的作用。方法:采用股动脉放血法建立犬失血性休克模型。造模成功后,静脉滴注相当于失血量的相应药液。测定各组造模前后、给药后5,10,20,30,60,90 min时血流动力学指标。结果:参附注射液对失血性休克犬有升高动脉血压、左室内压、左室等容期压力最大变化速率,降低心率、左室舒张末期压的作用。结论:参附注射液对失血性休克犬血流动力学有良好改善作用。

龙血竭总酚滴丸对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的观察龙血竭总酚滴丸对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法采取线栓法制造大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型。将大鼠分为假手术组、模型组、对照组、龙血竭原料药组及龙血竭总酚滴丸高、中、低剂量组,各给药组ig给药,qd,连续4 d,第5天上午继续给药1次,1 h后进行手术,术后24 h时,对各组大鼠分别进行神经功能评分,处死并测定梗死体积。结果龙血竭总酚滴丸各剂量组均可显著降低大鼠脑缺血后神经功能的评分(P<0.05或P<0.01),缩小脑梗死体积(P<0.05或P<0.01)。结论龙血竭总酚滴丸对大鼠局灶性脑缺血损伤具有较好的保护作用。

注射用黄芪冻干粉对麻醉犬心肌梗死的影响

目的研究注射用黄芪冻干粉(LRAPI)对犬心肌梗死的影响。方法冠状动脉结扎法造成心肌缺血模型。将麻醉犬分为模型组、丹参阳性对照组及LRAPI大、中、小剂量组,分别静脉给药,观察LRAPI对结扎所致犬心肌梗死范围、心电图、心肌耗氧量、血清酶学的影响。结果 LRAPI及丹参注射液均能显著降低心外膜心电图ST段偏移的总和,其中,LRAPI大剂量较丹参更为明显;同时,LRAPI高剂量组和丹参组大鼠的动脉血氧含量和心肌耗氧量呈显著降低趋势;而中、高剂量组的心肌氧摄取率于药后30～180min亦显著降低。此外,各药物均可显著降低心肌缺血犬的磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;其中,LRAPI降低CK作用较丹参显著,LRAPI低剂量还显著降低LDH;其次,药物均可显著降低心肌梗死犬的心梗面积,其中,LRAPI大剂量降低心梗死面积作用明显强于丹参组。结论 LRAPI对犬心肌梗死有明显的改善作用。

金关片对大鼠痛风性关节炎的药效作用研究

目的探讨金关片对大鼠痛风性关节炎的药效作用。方法采用尿酸钠晶体制备大鼠痛风性关节炎模型,分别测量大鼠足肿胀度,血清中尿酸(UA)和一氧化氮(NO)的水平及大鼠踝关节软组织中炎症因子(IL-1、IL-6、TNF-α)的含量。结果金关片能显著降低痛风性关节炎模型大鼠踝关节的容积(P<0.05、P<0.01),降低血清中UA、NO的水平(P<0.05、P<0.01)以及关节软组织中IL-1、IL-6、TNF-α的水平(P<0.05、P<0.01)。结论金关片对大鼠痛风性关节炎具有防治作用,其抗炎的机制可能与其降低炎症组织中IL-1、IL-6、TNF-α的含量,减轻其炎症损害有关。