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结直肠癌组织中巨噬细胞表达胸苷磷酸化酶并与血管新生相关 被引量:19
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作者 张继民 刘明姬 +3 位作者 沟井贤幸 椎叶健一 佐々木严 松野正纪 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2003年第4期247-250,共4页
目的探讨结直肠癌组织中胸苷磷酸化酶(dThdPase)表达与血管新生的相互关系。方法采用抗dThdPase、抗巨噬细胞标记物CD68和抗血管内皮细胞标记物CD34的单克隆抗体,对40例结直肠癌手术切除标本进行免疫组织化学染色分析,对其中27例标本同... 目的探讨结直肠癌组织中胸苷磷酸化酶(dThdPase)表达与血管新生的相互关系。方法采用抗dThdPase、抗巨噬细胞标记物CD68和抗血管内皮细胞标记物CD34的单克隆抗体,对40例结直肠癌手术切除标本进行免疫组织化学染色分析,对其中27例标本同时测定其癌组织和周围正常组织的dThdPase活性(HPLC法)。并应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、Lovo、MIP101和类巨噬细胞系THP-1和U937的dThdPase蛋白含量。结果结直肠癌组织中的dThdPase活性明显高于周围正常肠组织(P<0.01)。dThdPase阳性细胞几乎都是癌巢周围的间质细胞,特别是肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。且TAM与dThdPase阳性细胞的分布区域几乎完全一致。癌巢周围新生血管数明显多于正常肠黏膜组织(P<0.01)。TAM计数、dThdPase阳性间质细胞计数和微血管计数3者互成正相关。除LS174T检出微量和Lovo检出少量dThdPase蛋白外,其他4株癌细胞未检出。而THP-1和U937的dThdPase蛋白含量分别为18.2U/mg和19.3U/mg。结论结直肠癌组织中增高的dThdPase活性主要由TAM表达,增多的TAM与结直肠癌的血管新生相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 巨噬细胞 胸苷磷酸化酶 血管新生 免疫组织化学
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类巨噬细胞增强5'-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性 被引量:7
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作者 张继民 刘明姬 +3 位作者 沟井贤幸 椎叶健一 佐々木严 松野正纪 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2004年第3期218-221,共4页
目的探讨类巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶(dThdPase)能否增强细胞内激活抗癌药物5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)抗结直肠癌细胞作用。方法应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、LOVO、MIP101和类巨噬细胞系T... 目的探讨类巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶(dThdPase)能否增强细胞内激活抗癌药物5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)抗结直肠癌细胞作用。方法应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、LOVO、MIP101和类巨噬细胞系THP-1、U937的dThdPase蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5'-DFUR在6株结直肠癌细胞的半数有效浓度(IC50)。把5-FU或5'-DFUR同THP-1或U937细胞一起培养24h,其上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析,测定IC50有无改变。并在培养THP-1或U937的培养基中加入定量5'-DFUR后检测5-FU的生成量。结果6株结直肠癌细胞中仅LS174T检出0.5U/mg、LOVO检出8.9U/mg的dThdPase蛋白,其他4株未检出。而THP-1和U937的dThdPase蛋白含量则分别为18.2U/mg和19.3U/mg。5'-DFUR对全部癌细胞的IC50高于5-FU的14.5~94.4倍(P<0.01)。5-FU和5'-DFUR同THP-1(或U937)细胞一起培养24h后,5-FU对6种癌细胞的IC50无明显改变(P>0.05),而5'-DFUR的IC50则分别下降到原来的5.4%~41.8%(P<0.001)。并从加入400μmol5'-DFUR的THP-1和U937的培养液中分别检出40.2μmol和32.9μmol的5-FU。结论6株结直肠癌细胞基本无dThdPase活性,不能在细胞内转化5'-DFUR为5-FU。类巨噬细胞表达的dThdPase可以转化5' 展开更多
关键词 类巨噬细胞 5′-脱氧氟尿苷 结直肠癌 癌细胞活性 抗癌药 检测
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单核-巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶增强去氧氟尿苷抗结肠癌细胞活性 被引量:14
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作者 张继民 刘明姬 +3 位作者 溝井賢幸 椎葉健一 佐佐木巌 松野正纪 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期718-724,共7页
目的 探讨结肠癌组织中胸苷磷酸化酶 (dThdPase)的表达 ,检定单核 巨噬细胞表达的dThdPase对抗癌药物 5′ 脱氧氟尿苷 (5’ DFUR)的转化调控作用。方法 对 4 0例结肠癌标本进行免疫组织化学染色 ,分析其细胞的dThdPas表达 ,并测定癌... 目的 探讨结肠癌组织中胸苷磷酸化酶 (dThdPase)的表达 ,检定单核 巨噬细胞表达的dThdPase对抗癌药物 5′ 脱氧氟尿苷 (5’ DFUR)的转化调控作用。方法 对 4 0例结肠癌标本进行免疫组织化学染色 ,分析其细胞的dThdPas表达 ,并测定癌组织和周围正常组织的dThdPase活性。应用ELISA法分别检测 4株结肠癌细胞LS174T、CloneA、Colo32 0、MIP10 1和 2株类巨噬细胞THP 1、U937的dThdPase蛋白含量。MTT法测定 4株结肠癌细胞对 5 Fu和 5′ DFUR的半数有效浓度 (IC50 )。把定量5′ DFUR加入培养基中同类巨噬细胞或单核细胞一起培养 2 4h后 ,取其上清液二倍稀释加入大肠癌细胞中测定IC50 有无改变。并在加入定量 5′ DFUR的类巨噬细胞培养液中检测 5 Fu的生成。结果 结肠癌组织中dThdPase活性明显高于周围正常肠组织 ,表达dThdPase阳性细胞主要是肿瘤相关巨噬细胞 (TAM)。 4株结肠癌细胞中仅LS174T检出 0 5单位 /mg的dThdPase蛋白 ;而THP 1和U937则分别为 18 2单位 /mg和 19 3单位 /mg。全部大肠癌细胞对 5′ DFUR的IC50 均明显高于 5 Fu(P <0 0 0 0 1)。但同THP 1、U937或单核细胞一起培养 2 4h后 ,其IC50 明显下降 ,仅相当于原来的 5 4 %~4 1 8% (P <0 0 0 1)。从含定量 5′ DFUR的THP 1、U937的培养? 展开更多
关键词 单核-巨噬细胞表达 胸苷磷酸化酶 去氧氟尿苷 结肠癌 细胞活性 巨噬细胞 单核细胞
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单核细胞增强5′-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性 被引量:7
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作者 张继民 刘明姬 +3 位作者 溝井贤幸 椎葉健一 佐々木嚴 松野正纪 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2003年第6期405-408,共4页
目的 探讨巨噬细胞在结直肠癌化疗中的调控作用。方法 应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、Clone A、Colo320、MIP101的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)对上述... 目的 探讨巨噬细胞在结直肠癌化疗中的调控作用。方法 应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、Clone A、Colo320、MIP101的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)对上述4种癌细胞的半数有效浓度(IC50)。然后把5’-DFUR加入培养基中同人血单核细胞一起培养24 h,其培养上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析测定其IC50有无改变。同时测定单核细胞在不同浓度5’-DFUR中的存活率。结果 4种结直肠癌细胞仅LS174T检出0.5 U/mg的dThdPase蛋白,其它3种未检出。4种癌细胞对5-DFUR的IC50均明显高于5-FU(P<0.01)。同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR对4种癌细胞的IC50明显下降,仅相当于处理前的11.6%~34.3%(P<0.05),同时发现5’-DFUR对人血单核细胞无明显生长抑制作用。结论 被检结直肠癌细胞因缺乏dThdPase活性,不能在细胞内转化抗癌药物5’-DFUR为5-FU发挥细胞毒作用;同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR在单核细胞内dThdPase的催化下,可转化成5-FU并释放到培养基中发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 单核细胞 细胞活性 结肠癌 5′-脱氧氟尿苷 5’-DFUR 直肠癌
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