贝伐珠单抗联合奥希替尼协同抑制非小细胞肺癌细胞增殖及机制

目的研究贝伐珠单抗(Bev)联合奥西替尼(Osi)对人非小细胞肺癌细胞株(A549)的增殖抑制作用、诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,并分成4组:空白对照组、Bev组、Osi组及联合处理组(Bev+Osi)。利用CCK-8实验检测各组处理后的细胞增殖情况;细胞凋亡情况、活性氧水平变化通过流式细胞术实验检测;细胞凋亡相关蛋白和信号通路相关蛋白的表达通过蛋白免疫印迹法进行检测。结果CCK-8结果显示,联合处理组对A549细胞的增殖抑制作用最强,对人胚肺成纤维MRC-5细胞几乎无毒副作用,与单独用药处理组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示,联合处理组对A549细胞的诱导凋亡作用更强,较2个单药处理组分别高出45.7%和42.6%;联合处理组能够上调A549细胞中的活性氧水平,加入N-乙酰半胱氨酸后,诱导凋亡能力恢复到2个单药处理组相近的水平。蛋白免疫印迹法结果显示,联合处理组能够抑制ERK的磷酸化水平,上调p38的磷酸化水平。结论Bev与Osi联合使用能够上调细胞中ROS水平,调控p38/ERK信号通路,降低线粒体膜电位,引发A549细胞凋亡,联合使用具有明显的优势,有望成为肺癌治疗领域的重要策略。

国有企业改革发展中践行社会主义核心价值观的研究

随着社会经济发展脚步的逐渐加快,各行各业的发展建设都有了新的突破和创新。在推进国家综合经济实力不断前进的过程中,也更加注重国民的思想教育,加强国民价值观念的培养。国有企业作为我国重要经济领域以及民生领域的坚实力量,其相关行为直接关系到国民的生活工作的方方面面。因此,在推进国有企业改革的过程中,更要注重国有企业内部思想意识以及价值观念的培养与建设。当前,如何在国有企业改革中践行社会主义核心价值观,是推进国企业改革创新需要重点思考的方向和内容。

楝酰胺对肝癌细胞的促凋亡作用及其机制

目的观察加入楝酰胺(Rocaglamide,Roc-A)培养的人肝癌细胞株HepG2凋亡情况,并探讨其可能作用机制。方法①加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞凋亡情况观察:取对数生长期HepG2细胞,分为5组,分别加入0(空白对照)、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时取各组细胞,采用YF488-AnnexinV/PI荧光双染法观察细胞凋亡情况。②加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞已糖激酶Ⅱ(HK2)、抑凋亡因子类似物(BCL2L1)mRNA检测:取对数生长期HepG2细胞,分为2组,分别加入0、100 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用RT-qPCR法检测细胞HK2及BCL2L1 mRNA。③加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白检测:取适量HepG2细胞,分为3组,分别加入0、100、200 nmol/L的Roc-A,培养24 h采用蛋白组学质谱分析法检测细胞HK2、BCL2L1蛋白。取对数生长期HepG2细胞分为5组,分别加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用WesternBlotting法检测HK2、BCL2L1蛋白。④癌组织HK2表达与肝癌患者的生存时间关系分析:采用KaplanMeierPlotter癌症数据库分析癌组织HK2表达与肝癌患者生存时间的关系。结果加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液HepG2细胞凋亡率分别为0.83%±0.21%、9.46%±2.34%、24.68%±4.22%、39.60%±2.16%及58.63%±1.62%,组间两两比较,Р<0.05。随Roc-A溶液浓度增加,细胞凋亡率也随之增加。与空白对照比较,培养24 h时加入100 nmol/L Roc-A溶液的HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA相对表达量均降低(Р均<0.05)。与空白对照比较,加入不同浓度Roc-A培养HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白相对表量均降低(P均<0.05)。与癌组织HK2高表达的肝癌患者比较,HK2低表达的肝癌患者的生存时间更长(Р<0.05)。结论Roc-A促进HepG2细胞的凋亡,200 nmol/L的Roc-A促进HepG2细胞凋亡能力最佳。Roc-A促HepG2细胞凋亡的机制可能为Roc-A抑制HepG2细胞HK2、BCL2L1 mRNA及蛋白的表达。

楝酰胺介导IGF1R对HepG2肝癌细胞的抗肿瘤活性

目的研究楝酰胺(Rocaglamide,Roc-A)介导Ras信号通路中IGF1R对人HepG2肝癌细胞的作用机制,并初步探讨其对HepG2肝癌细胞的抗肿瘤活性。方法将体外培养的人HepG2肝癌细胞经Roc-A处理,通过CCK-8法测定细胞增殖;采用蛋白组学(TMT法)方法进行质谱分析差异蛋白表达;Western blot检测各组细胞中IGF1R蛋白的表达;利用Kaplan Meier数据库分析癌症基因组图谱(TCGA)中IGF1R在肝癌细胞组织中的表达水平与LIHC患者预后的关系。结果 Roc-A可显著抑制人HepG2肝癌细胞增殖;通过蛋白组学质谱分析筛选出显著差异的Ras信号传导通路中IGF1R;Western blot法检测发现Roc-A处理的肝癌细胞中IGF1R蛋白的表达水平与对照组比较明显下降(P<0.05);用GEPIA及Kaplan Meier数据库分析癌症基因组图谱(TCGA)显示IGF1R高表达肝癌患者5年生存率明显低于IGF1R低表达肝癌患者(P<0.05)。结论 Roc-A显著抑制人HepG2肝癌细胞的体外增殖,Rocaglamide通过介导IGF1R可以抑制肝癌细胞的增殖,从而产生抗肿瘤活性,有望成为一种新型的治疗肝癌的药物。