基于转录组数据挖掘藏羊立毛肌发生的关键基因

旨在探究调控藏羊皮肤内立毛肌发生的分子机制,挖掘影响立毛肌发生的关键基因。本研究采集了30个75~110日龄健康情况良好的藏羊胚胎,收集背部皮肤组织,制作石蜡组织切片,利用HE染色观察背部皮肤内不同日龄立毛肌的形态学变化特征,推测出立毛肌发生的关键时期为胚龄75~85天(E75~E85);分别挑选胚龄大约在75和85天各3个背部皮肤组织样品,分样品提取RNA,利用Illumina Hiseq平台进行转录组测序,对测序数据进行质控、过滤、比对,筛选得到差异表达基因,并对差异基因进行功能注释、富集分析、蛋白网络互作和RT-qPCR验证,挖掘调控立毛肌早期发育的关键候选基因。测序结果共得到1159个差异表达的基因(P<0.05),其中900个基因上调,259个基因下调。随机选择6个差异表达的基因进行RT-qPCR验证,表达趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果可靠。通过对差异基因进行GO功能注释和KEGG富集分析,筛选到与立毛肌发育相关的5个生物学过程条目和5个信号通路共47个非冗余基因(如BAMBI、TNNI3、HOXA9等)。本研究表明,藏羊立毛肌开始发育的关键时期约为E75~E85天,该时期内SPP1、BAMBI、TNNI3、HOXA9、SOX15可能为影响藏羊立毛肌发生的关键候选基因。

不同精液冷冻程序对杏花鸡精液冷冻效果的影响

本试验选择BPSE(Blesville Poultry Semen Extender)作为精液稀释液,以二甲基乙酰胺(dimethylacetamide,DMA)和乙二醇(ethylene,EG)2种试剂作为抗冻剂,分别以不同的质量浓度进行组合,对杏花鸡精液冷冻保存的平衡时间、冷冻方式和解冻温度以及时间等影响精液冷冻效果的关键因素进行了研究。结果如下:(1)质量浓度分别为4%DMA和6%EG的抗冻剂对精液保护效果较好,精子冻后活力分别为0.466和0.464,两者之间差异不显著;(2)选择质量浓度为6%EG为抗冻剂,平衡8 min后的精子活力最高,为0.542;(3)在(2)的基础上,选用颗粒冷冻和细管冷冻2种方式冷冻,分别在水浴锅里以40℃、55℃、70℃3个温度解冻。结果表明,用颗粒冷冻在55℃水浴锅里解冻的精子活力最高,为0.482;(4)采用颗粒冷冻和细管冷冻2种方式对新鲜精液冷冻解冻后与新鲜精液一起进行人工授精,捡蛋入孵后统计受精率,细管冷冻、颗粒冷冻以及鲜精的受精率为0、0和92.52%。结论:在本试验中,以6%EG为抗冻剂,在5℃下平衡8 min,用颗粒冷冻的方法在55℃恒温水浴箱内解冻可以使解冻后的精子达到最大的存活率;授精试验效果不佳,表明该程序虽然可以使精子存活,但是对精子有损害作用。

雌性动物生殖道内精子储存的研究进展

雌性的精子储存是一类自然界广泛发生的生理现象,主要包括精子进入雌性生殖道、暂时储存于雌性生殖道以及重新激活释放等过程。雌性精子储存是体内受精的动物异步交配与排卵的生殖基础,在不同物种之间存在一定的差异性。影响雌性动物精子储存的因素众多,其中最重要的是不同物种间形态各异的精子储存结构,这是导致不同动物精子储存时间差异的直接原因。此外,还有很多生理过程和生物因子调控雌性生殖道内的精子储存时长,包括脂质的代谢、抗氧化水平的调节、微酸性pH微环境的维持、免疫反应的抑制等,面对类似的生理需求,雌性储存精子的机制在物种之间可能具有一定的保守性。该文综述不同物种雌性精子储存的结构差异和调控机制,解读生物精子储存的多样性,为进一步探索雌性精子储存机制提供思路。