miR-216a-5p调控XIAP对急性胰腺炎腺泡细胞增殖、凋亡的影响

背景重症急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是消化系统常见的危重急症,临床救治难度大,病死率高,严重危及患者生命.近几年来多种miRNA在AP中的差异表达,与其发生发展及诊断和预后密切相关,进一步探索其在AP发生发展、并发症等各环节的作用有助于为AP的诊断和治疗提供新的思路和方法.研究发现miR-216a-5p通过下调MMP16可抑制肺癌细胞的侵袭;miR-216a-5p通过靶向抑制PAK2基因可抑制膀胱癌细胞的增殖能力,促进细胞凋亡.miR-216a-5p可抑制小细胞肺癌的恶性进展,影响前列腺癌细胞的增殖、迁移和宫颈癌细胞的肿瘤发生.仅发现miR-216a在AP患者外周血中高表达,但miR-216a-5p在AP的增殖凋亡中的影响及作用机制尚不清楚.目的研究miR-216a-5p对AP腺泡细胞增殖、凋亡的影响及潜在的作用机制.方法用雨蛙素(caerulein,CAE)处理大鼠胰腺腺泡AR42J构建AP模型,设置miR-NC组(转染miR-NC)、miR-216a-5p组(miR-216a-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染antimiR-NC)、anti-miR-216a-5p组(转染anti-miR-216a-5p)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-XIAP组(转染pcDNA3.1-XIAP)、anti-miR-216a-5p+si-NC组(共转染anti-miR-216a-5p和si-NC)、anti-miR-216a-5p+si-XIAP(共转染anti-miR-216a-5p和si-XIAP)组,均用脂质体法转染.qRT-PCR检测AR42J细胞中miR-216a-5p的表达水平;Western Blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.结果CAE处理AR42J细胞后,miR-216a-5p的表达水平显著升高(P<0.05).抑制表达miR-216a-5p和过表达XIAP细胞活性显著升高,细胞凋亡率显著降低,Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平显著升高,P21、Bax蛋白的表达水平显著下降(P<0.05).miR-216a-5p靶向负调控XIAP;抑制XIAP表达逆转了抑制miR-216a-5p对CAE处理的AR42J细胞增殖促进、凋亡抑制的作用.结论抑制miR-216a-5p表达可以抑制胰腺炎腺泡细胞凋亡,促进细胞增殖,其机制可能与靶向调控XIAP有关.可为AP诊断和治疗提供新靶点和新思路.

益气化瘀豁痰方对动脉粥样硬化大鼠的抗炎抗氧化应激作用研究

目的:观察益气化瘀豁痰方对动脉粥样硬化(AS)大鼠的抗炎抗氧化应激作用。方法:将24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和给药组,每组8只。模型组和给药组大鼠喂养高脂饲料,并按2 mL/kg的剂量腹腔注射60 IU/kg的维生素D3,制备模型12周。给药组大鼠在模型制备过程中每天灌胃100 mg/kg的益气化瘀豁痰方,对照组和模型组灌胃相同剂量的生理盐水。12周后采集大鼠血清,HE染色观察大鼠主动脉形态结构;采用ELISA法检测各组大鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)的含量;采用蛋白免疫印迹法检测大鼠主动脉核因子κB(NF-κB)的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠主动脉病变部位出现内膜增厚破坏,内皮细胞排列不完整;LDL-C、TC、TG、CRP、TNF-α、IL-6、NF-κB、MDA和ROS水平明显升高(P<0.05);HDL-C、SOD、CAT水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,给药组血管内膜光滑平整;LDL-C、TC、TG、CRP、TNF-α、IL-6、NF-κB、MDA和ROS水平显著下降(P<0.05);HDL-C、SOD、CAT水平明显上升(P<0.05)。结论:益气化瘀豁痰方可通过抑制炎症反应和改善氧化应激来预防大鼠AS。

艾司洛尔联合真武汤加味治疗急性心肌梗死后急性左心衰竭的疗效观察

目的观察艾司洛尔联合真武汤加味治疗急性心肌梗死并发急性左心衰竭的临床疗效。方法 90例患者随机分为治疗组和对照组各45例。对照组给予西医常规治疗,包括充分给氧、静脉滴注硝酸甘油、利尿剂、强心苷等并给予艾司洛尔注射液治疗,治疗组在对照组基础上加用真武汤治疗。治疗2周后,比较两组临床疗效。结果治疗组总有效率95.56%高于对照组的80.00%(P<0.05)。两组治疗后心功能各项指标均较治疗前有明显改善(P<0.05),且治疗组CO、LVEDd、LVEDs及LVEF改善程度优于对照组(均P<0.05)。两组治疗期间均无明显不良反应出现。结论艾司洛尔联合真武汤加味治疗急性心肌梗死并发急性左心衰竭可改善心肌功能及预后,安全性较高。

miR-375-3p过表达调控Akt-eNOS信号通路促进心肌梗死大鼠心肌修复作用机制

目的探究miR-375-3p过表达调控丝氨酸-苏氨酸激酶(Akt)-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路促进心肌梗死(MI)大鼠心肌修复作用的机制。方法将大鼠分为假手术(sham)组、MI组、阴性对照(NC)组、miR-375-3p组,各10只。比较各组miR-375-3p相对表达、心功能指标[左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、短轴缩短率(FS)、左室射血分数(LVEF)]、心肌损伤标志物[乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白(cTnT)I、脑钠肽前体(Pro-BNP)]、心肌梗死面积、心肌组织病理学变化及Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS蛋白表达。结果与sham组比较,MI组、NC组miR-375-3p表达显著降低;miR-375-3p组miR-375-3p表达显著高于sham组及MI组(P<0.05)。与sham组比较,MI组、NC组及miR-375-3p组LVEDD、LVESD及LDH、cTnTI、Pro-BNP显著升高,FS、LVEF及Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS蛋白表达显著降低,MI面积显著增加(P<0.05)。与MI组比较,miR-375-3p组LVEDD、LVESD及LDH、cTnTI、Pro-BNP显著降低,MI面积显著减少,FS、LVEF及Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论miR-375-3p过表达可激活Akt-eNOS信号通路促进MI大鼠心肌修复。