褪黑素通过激活Nrf2抑制铁死亡改善随意皮瓣存活

目的:探讨褪黑素(MLT)是否能通过减轻随意皮瓣的铁死亡促进随意皮瓣存活。方法:将20只6~8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和MLT组,观察术后3、7 d各组皮瓣存活情况及血流动力学。取皮瓣组织评估水肿情况,通过病理学染色、透射电子显微镜观察、免疫印迹等检测方法探讨MLT对随意皮瓣存活的作用及对铁死亡的调节作用。为探讨核红细胞因子2相关因子2(Nrf2)在MLT抑制随意皮瓣铁死亡中起到的作用,使用Nrf2抑制剂ml385作为抑制剂,随机将45只6~8周龄的C57BL/6小鼠分为对照组、MLT组和MLT+ml385组,观察形态学变化并检测相关生化指标变化。结果:各组在术后第3、7天都出现远端皮瓣坏死。MLT组较对照组增加了皮瓣存活面积(P<0.05)及皮瓣血流灌注(P<0.05)。HE染色可见MLT组皮瓣内小血管含量多;Masson染色见真皮层纤维排列规整;免疫组织化学染色可见MLT组较对照组CD34阳性小血管增多(P<0.05),凋亡相关蛋白减少(P<0.05),抗氧化蛋白含量增加(P<0.05)。透射电镜可见皮瓣组织中铁死亡特征性改变。组织脂质过氧化物(LPO)检测、组织Fe含量检测、谷胱甘肽(GSH)水平以及Western blot结果表明,与对照组相比,MLT组GSH上调(P<0.05),组织Fe积累降低(P<0.05),LPO减少(P<0.05)。联合使用ml385后,Western blot结果表明,与MLT组比,MLT+ml385组中Nrf2下调(P<0.05),抗氧化指标HO-1下调(P<0.05),抗脂质过氧化指标GPX4下调(P<0.05),Fe结合蛋白轻链(FTL)下调(P<0.05)。结论:MLT治疗有利于小鼠随意皮瓣的存活;铁死亡是影响随意皮瓣存活的因素之一,抑制铁死亡能够促进随意皮瓣存活;MLT抑制铁死亡依赖于激活Nrf2提高抗氧化能力减轻脂质过氧化并促进Fe代谢。

依达拉奉右莰醇通过抑制氧化应激和提高自噬流促进周围神经损伤修复

目的:探讨依达拉奉右莰醇(C-EDA)对氧化应激以及自噬流的调控在周围神经损伤(PNI)中的作用。方法:PNI模型的建立和分组:将大鼠按照随机数字表法分为Sham组、PNI组、C-EDA组(C-EDA+PNI)、3MA(3-甲基腺嘌呤)组(PNI+C-EDA+3MA),每组10只。术后第4周对所有大鼠进行步态印记检测,神经电生理检测,腓肠肌湿重测量,肌肉组织HE染色,神经组织NF-200+MBP免疫荧光染色。用Western blot法检测体内的氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1,自噬相关蛋白LC3II/LC3I、p62,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达情况。结果:与PNI组相比,C-EDA+PNI改善后足畸形,改善神经传导功能以及减轻腓肠肌萎缩。与PNI组相比,CEDA治疗上调体内的氧化应激相关蛋白Nrf2、HO-1、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,下调自噬底物蛋白p62、促凋亡蛋白Bax的表达(P<0.05)。3MA逆转了C-EDA改善损伤后的神经功能的效应。结论:C-EDA能够通畅自噬流,从而发挥改善PNI后神经结构修复与功能恢复的作用,是治疗PNI的一种潜在有效的方法。