全耐药鲍氏不动杆菌耐药基因的检测及研究

目的研究全耐药鲍氏不动杆菌相关耐药基因的流行情况。方法对临床分离的17株鲍氏不动杆菌进行菌株鉴定和药敏试验,并运用PCR方法检测相关耐药基因。结果17株鲍氏不动杆菌对医院检测的抗菌药物全部耐药;17株菌中TEM-1、OXA-23、OXA-27、gyrA和AmpC基因的检出率为100.0%,2株菌携带aacC1基因(11.8%),9株菌携带PER-1基因(52.9%)。结论医院鲍氏不动杆菌流行株主要携带TEM-1、OXA-23、OXA-27、gyrA、AmpC、aacC1和PER-1等多个耐药基因,基因型与表型基本一致,临床工作中医生应重视全耐药鲍氏不动杆菌的诊断与治疗,减少交叉感染的发生,加强医院感染的控制。

人工合成高密度脂蛋白样颗粒测定血清胆固醇酯转运蛋白活性

目的建立血清胆固醇酯转运蛋白活性测定方法。方法用１４Ｃ标记的胆固醇酯合成高密度脂蛋白（ＨＤＬ）样颗粒作为胆固醇酯的供体，以低密度脂蛋白为受体测定血清中胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）活性，并对４０例健康人、４５例冠心病（ＣＨＤ）、２６例脑卒中患者血清ＣＥＴＰ活性进行分析。结果 该方法线性范围为０～３０％；高（２６％）、低（６．８％）活性批内变异系数（ＣＶ）分别为６．０％、７．５％，批间ＣＶ分别为１１．５％和１２．３％；４５例ＣＨＤ患者血清ＣＥＴＰ活性（ｘ±ｓ）为１７．６％±５．４％，２６例脑卒中患者为１５．２％±３．８％，均明显高于健康对照（１２．７％±３．９％）（Ｐ＜０．０１）。结论该法简便快速、精密度较高，为临床及科研工作中测定ＣＥＴＰ活性提供了一种有效的方法。

心脑血管疾病患者胆固醇酯转运蛋白活性测定

目的 :探讨胆固醇酯转运蛋白 (CETP)活性与心脑血管疾病的关系。 方法 :应用体外合成 1 4 C标记的高密度脂蛋白 (HDL )样颗粒 ,测定了 45例冠心病患者、2 6例脑卒中患者和 40例健康人 CETP活性。 结果 :冠心病患者、脑卒中患者 CETP活性分别为 (17.6± 5 .4) %、(15 .2± 3.8) % ,而健康人为 (12 .7± 2 .0 ) % ,两组患者与健康人比较均有显著差异 (P<0 .0 1)。 结论 :提示 CETP与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。

上调星形胶质细胞中PP2A对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为野生对照+慢病毒空载体组(Con组)、APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒空载体组(APP/PS1组)和APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒感染组(PP2A组),各组小鼠经侧脑室注射慢病毒4周后,采用脑片免疫荧光检测β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的水平,通过Golgi染色观察树突棘密度和形态学变化,电镜检测突触后致密物(postsynaptic density,PSD)的厚度,Morris水迷宫定位航行实验检测感染慢病毒后对学习和记忆的影响。结果:上调星形胶质细胞中PP2A降低APP/PS1双转基因小鼠Aβ的水平,增加树突棘密度、有突触功能的蘑菇状树突棘比例和PSD厚度,缩短寻找平台逃避潜伏期。结论:上调星形胶质细胞中PP2A改善APP/PS1双转基因小鼠AD样Aβ聚集的病理改变,具有重塑突触结构与功能和改善学习记忆能力的作用。

黄芪改善腹透患者腹腔巨噬细胞功能的临床研究

目的 :研究黄芪对尿毒症患者腹腔巨噬细胞功能的影响。方法 :对 43例尿毒症初始行腹膜透析的患者在腹透液中不加 (对照组 )和加入黄芪注射液 (用药组 )治疗 1周 ,用ELISA法检测观察前后腹腔巨噬细胞分泌TNF-a能力和吞噬功能的变化。结果 :黄芪用药组腹腔巨噬细胞噬菌率、吞噬指数、杀菌率和巨噬细胞分泌TNF -a水平和对照组相比均明显上升 (P <0 .0 1) ,巨噬细胞分泌TNF -a水平与用药前自身对比也显著提高 (P <0 .0 5 )。结论

磷霉素联合中药对产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的体外药敏实验

目的：研究磷霉素联合5种中药单、复方对产KPC肠杆菌科细菌体外药敏实验的抑菌效果。方法：2012年7月-2013年6月从杭州市中医院分离到的20株碳青霉烯不敏感的肠杆菌科细菌,其中有11株肺炎克雷伯菌,7株大肠埃氏菌,2株摩根摩根菌。改良Hodge实验及特异性PCR扩增和序列分析细菌KPC碳青霉烯酶的产生情况。琼脂稀释法分别测定亚胺培南、厄他培南、磷霉素、大黄、黄芪、黄连、金银花、鱼腥草及磷霉素联合中药单复方对待检菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果：20株对碳青霉烯不敏感的肠杆菌科细菌均产KPC-2型碳青霉烯酶。体外药敏试验显示敏感率,亚胺培南为5%（1/20）、厄他培南为10%（2/20）、磷霉素为65%（13/20）（根据EUCAST标准≤32μg/mL）;中药中黄芪的抑菌效果最好,MIC为25-50 mg/mL,黄连其次,MIC为50-100 mg/mL;大黄、鱼腥草、金银花抑菌效果最差,但金银花、金银花加黄连黄芪复方、鱼腥草加黄连黄芪复方对摩根摩根菌抑菌效果明显,MIC为12.5-25 mg/mL;磷霉素联合中药后,除高度耐药株外,大部分菌株MIC值均降低了1-3个稀释度。尤其是磷霉素抗菌活性不佳的摩根摩根菌株,联合除鱼腥草外其他中药后磷霉素的MIC下降可达6个稀释度。结论：通过琼脂稀释法测定的中药抑菌效果有限且与菌株是否产KPC酶无关。联合中药抗碳青霉烯不敏感的肠杆菌细菌感染可降低磷霉素MIC,提高药物效能。

16SrRNA实时荧光定量PCR检测肠道菌群的研究

目的:应用细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌(Bifidobacterium)、乳酸杆菌(Lactobacillus)、大肠杆菌(E.coli)、肠球菌(Enterococcus)的引物并对肠道的这4种细菌菌属进行定量测定,绕过分离培养环节,以微生物rRNA/rDNA基因作为种属鉴别序列,确定肠道菌群的情况。方法:采用腹腔注射链脲菌素(STZ)的方法建立小鼠糖尿病模型,分别检测小鼠肠道主要的菌群。结果:造模成功小鼠血糖升高(>12.3mmol/L,P<0.05)时,肠道益生菌(双歧杆菌,乳酸杆菌)数量降低(P<0.05),而大肠杆菌、肠球菌数量增加(P<0.05)。结论:小鼠糖尿病模型可引起肠道菌群失调,荧光定量PCR是一种特异性高、敏感性强的定量方法,可正确定量肠道中的细菌菌群数量。

医用床垫拍晒控螨的效果观察

尘螨是重要的室内致敏原，活螨、死螨、螨的蜕皮、甚至其排泄物均具有较强烈的抗原性／变应原性，可引起过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎和慢性荨麻疹等疾病，计80％婴幼儿哮喘和40％～50％成人哮喘由尘螨引起，严重危害人类健康。住院患者室内居留时间较长，甚至24h卧床，患者如在住院期间继发这些由尘螨引起的疾病，可导致病情加重。作者于2012年8月（气温33～37℃，相对湿度65％～70％）通过比较几种不同处置措施，对医用床垫尘螨数量的影响，初步探讨控螨策略，

子宫内膜癌端粒酶催化亚单位表达与DNA含量的相关性研究

目的探讨子宫内膜组织中端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTRT)表达与DNA含量对子宫内膜癌的诊断意义以及二者之间的关系。方法采用原位杂交法对子宫内膜癌40例、子宫内膜不典型增生20例及正常子宫内膜组织8例的hTRT表达进行检测;用流式细胞仪检测3种组织细胞的DNA含量。结果子宫内膜癌组织hTRT表达阳性率为87.5%,明显高于正常子宫内膜与子宫内膜不典型增生组织(P<0.01);而且子宫内膜不典型增生组织hTRT表达阳性率(40.0%)高于正常子宫内膜(12.5%)。从正常子宫内膜到子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌,DNA指数值与S期细胞百分比值逐渐增高(P<0.05)。hTRT阳性肿瘤组织中异倍体肿瘤(28/35)明显高于hTRT阴性肿瘤组织(1/5)。结论从正常子宫内膜到子宫内膜不典型增生及子宫内膜癌,hTRT表达阳性率及DNA含量逐渐增高,提示hTRT阳性表达和DNA含量的增高与子宫内膜癌的发生发展高度相关,对子宫内膜癌的诊断具有重要意义。

小豆蔻明诱导K562细胞凋亡及其相关凋亡蛋白的表达

目的探讨小豆蔻明诱导K562细胞凋亡与PTEN、p-Akt、NF-κB、Bcl-2等抑凋亡蛋白及促凋亡蛋白表达量的关系。方法 1普通光镜观察小豆蔻明作用K562细胞48 h后的细胞形态学变化。2采用MTT法检测小豆蔻明作用K562细胞48 h后的凋亡情况,计算IC50。3应用流式细胞仪检测小豆蔻明作用K562细胞48 h后的细胞凋亡率。4采用RT-PCR技术检测小豆蔻明作用K562细胞48 h后Bcl-2、Bax的mRNA表达量。5采用Western blot技术检测小豆蔻明作用K562细胞48 h后PTEN、p-Akt、NF-κB、Bcl-2的蛋白表达量。结果小豆蔻明作用K562细胞48 h后,形态学出现明显凋亡现象。MTT提示K562细胞增殖抑制明显且呈量效和时效关系。早期凋亡率与空白组比有显著增加(P<0.05),呈剂量依赖关系。Bcl-2 mRNA的表达较空白组明显下降(P<0.05),Bax mRNA的表达较空白组明显升高(P<0.05),呈现浓度依赖性。PTEN蛋白表达量随小豆蔻明的浓度增加明显增加,而p-Akt、NF-κB、Bcl-2蛋白表达量则减少。结论小豆蔻明通过增加PTEN蛋白的表达量,同时下调p-Akt、NF-κB、Bcl-2蛋白的表达量促进K562细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。

门诊与住院患者尿路感染病原菌分布及耐药性比较

目的：探讨门诊与住院患者尿路感染常见病原菌的分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物，有效控制感染提供依据。方法收集2015年诊断为尿路感染的门诊及住院患者的尿液标本进行细菌培养。应用法国生物梅里埃公司Vitek-2鉴定仪对菌株进行鉴定，采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验，采用WHONET5.6软件进行分析。结果共检出病原菌320株，门诊组共检出11种病原菌，住院组共检出22种病原菌。其中革兰阴性菌均以大肠埃希菌为主，分别占81.7%、48.6%；革兰阳性菌以屎肠球菌为主，分别占43.8%、50.0%。药敏结果显示：大肠埃希菌敏感率较高的是替加环素、头孢替坦、阿米卡星、呋喃妥因和亚胺培南。屎肠球菌敏感率较高的是万古霉素、利奈唑胺。结论尿路感染最常见的病原菌是大肠埃希菌。了解病原菌的临床分布，重视病原菌的耐药性分析，对指导临床合理使用抗生素，控制尿路感染具有重要意义。

儿童呼吸道嗜血杆菌感染耐药性分析

嗜血杆菌（haemophilus）是一种苛养革兰氏阴性杆菌，主要存在呼吸道中，引起上呼吸道感染、脑膜炎及菌血症等感染性疾病。呼吸道标本分离到的嗜血杆菌主要为流感嗜血杆菌（haemophilus influenzae，Hi）和副流感嗜血杆菌（haemophilus parainfluenzae，HP），在儿科病例中尤为常见，

我院2005—2011年无乳链球菌的药物敏感性分析

无乳链球菌（streptococcus agalactiae）又称为B 群链球菌（group B strep tococcus ,GBS） ,通常可定植在人体肠道和女性的泌尿生殖道内 ,健康人群携带率可高达30%.目前普遍认为GBS 是围生期严重感染性疾病的主要致病菌之一 ,对孕妇可导致胎膜早破、晚期流产、早产、胎儿生长受限、绒膜羊膜炎、产后子宫内膜炎、败血症等可造成母婴不良后果.母婴垂直传播也可导致新生儿的脑膜炎和菌血症 ,

黄连解毒汤对腹透患者感染病原菌的作用研究

目的:研究黄连解毒汤对腹透患者感染的病原菌的作用。方法:对腹透患者感染的病原菌进行鉴定和药敏分析,采用连续倍比试管稀释法测定黄连解毒汤对腹透液中常见病原菌的最小抑菌浓度(MIC),结合抗菌药物的耐药情况为临床用药提供参考依据。结果:送检的208例腹膜透析液中共检出病原菌59株,其中革兰阳性球菌占69.5%,对喹诺酮类敏感性较高;革兰阴性杆菌占23.7%,对三代头孢菌素、碳青霉烯类和喹诺酮类敏感性较高。黄连解毒汤对金黄色葡萄球菌的MIC为250mg/ml,对表皮葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、肠球菌和大肠埃希菌的MIC均大于1000mg/ml。结论:黄连解毒汤在体外对腹膜透析患者感染的金黄色葡萄球菌有显著的抗菌活性。

小儿湿疹特异性IgE测定与分析

目的了解小儿湿疹接触变应原的情况以及常见变应原特异性IgE的阳性检出率。方法对50例患儿进行血清变应原特异性IgE检测。结果小儿湿疹总IgE阳性检出率96.0%,食入变应原中检出率蛋白蛋黄32.0%,牛奶、鱼各12.0%,虾蟹2%。吸入变应原中检出率粉尘螨34.0%,蟑螂10.0%,桑柳梧桐树花粉8.0%,霉菌及狗猫皮屑各6.0%。结论螨虫、鸡蛋、牛奶、鱼是小儿湿疹常见的变应原。变应原特异性IgE测定对防治小儿湿疹有重要意义。

网织红细胞血红蛋白含量及血清铁蛋白在慢性乙型病毒性肝炎伴缺铁性贫血患者诊断中的价值

目的探讨外周血网织红细胞血红蛋白量(CHr)及血清铁蛋白(SF)在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)伴缺铁性贫血(IDA)患者早期诊断及疗效观察中的价值。方法比较56例CHB伴IDA患者(实验组)、50例IDA患者(IDA组)及50例正常人群(对照组)外周血CHr和SF值。结果 IDA组外周血CHr、SF均低于对照组(P<0.05),实验组外周血CHr低于对照组,而SF高于对照组(均P<0.05)。讨论CHr、SF两项指标均可以作为IDA的早期诊断指标及疗效观察指标,但对于缺铁性贫血合并慢性感染者使用CHr作为缺铁性贫血的诊断及疗效评价指标优于SF。