ELISA双抗体夹心一步法快速检测粪样中的轮状病毒

同时将酶标记 McAb与粪样加于抗体包被孔内孵育作 ELISA双抗体夹心一步法,以检测粪样中轮状病毒(RV),发现包被抗体采用兔抗 RV IgG 较抗 RV McAb更为敏感,粪样与酶标记 McAb混合物最适孵育时间为90分钟。经实际粪样测定显示,一步法测得A_(492)值与常规法(二步法)呈直线正相关,两法阳性检出率无显著差异,说明一步法完全可以取代二步法而应用于临床。

三种轮状病毒ELISA试剂的比较研究

作者用自制轮状病毒单克隆抗体ＥＬＩＳＡ试剂检测细胞培养和８８份粪样中轮状病毒，与丹麦Ｄａｋｏ公司和上海市卫生防疫站制备的轮状病毒ＥＬＩＳＡ试剂进行了比较。结果自制试剂的细胞培养中轮状病毒最低抗原检出量是０．０３ＴＣＩＤ５０；对低轮状病毒核酸含量粪样的阳性检出率为９５．７％，均高于另二种试剂；检测８８份粪样中轮状病毒，自制试剂的灵敏度、特异度及Ｙｏｕｄｅｎ指数分别为９８．３％、９０％及０．８８，与另二种试剂无显著性差别（Ｐ＞０．０５）。此外，自制试剂的阳性标本与阴性标本ＯＤ值均数之比约为另二种试剂的２．２倍。实验结果提示，本研究自制轮状病毒ＥＬＩＳＡ试剂检测轮状病毒的敏感性和特异性较高，可以替代同类轮状病毒多克隆抗体ＥＬＩＳＡ试剂，且易于目测判断结果，适于基层临床使用。

抗轮状病毒主要内壳蛋白Vp6单克隆抗体的研制

本文采用猴轮状病毒SA11株免疫的Balb/c小鼠脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合,用ELISA双抗体夹心法筛选出4株能稳定分泌抗SAll抗体的杂交瘤细胞株.4株单克隆抗体均针对SAll内壳蛋白Vp 6,而其中一株具有对人和动物轮状病毒的广谱反应性.利用此株单克隆抗体对62例婴幼儿腹泻样本作ELISA检测,并与PAGE结果比较,二者符合率为90.3%;且与电泳长型及短型的轮状病毒起反应,证明此株单克隆抗体具有抗轮状病毒群抗原决定簇的特性.

转移因子和免疫核糖核酸对LAK细胞抗肿瘤活性的影响

本研究用重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）联合转移因子（ＴＦ）或抗肿瘤免疫核糖核酸（ｉＲＮＡ）作用于外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），测定其对Ｋ５６２，Ｒａｊｉ及Ｈ７４０４细胞的杀伤活性。结果发现，高浓度ＴＦ（０．２５ｕ／ｍｌ）可抑制ＬＡＫ活性，ＴＦ进一步稀释（０．１２５ｕ／ｍｌ）可使其抑制作用消失。ＴＦ和抗肿瘤ｉＲＮＡ不能进一步提高最适剂量ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ活性，但能显著增强亚适剂量ｒＩＬ－２（２００ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ活性，诱导ＬＡＫ活性增高的ＴＦ最适剂量为０．０３１ｕ／ｍｌ。ＴＦ或抗肿瘤ｉＲＮＡ单独不能诱导出ＬＡＫ活性，而当两者联合应用可诱导ＰＢＭＣ产生ＬＡＫ活性。本文为ＴＦ及抗肿瘤ｉＲＮＡ协同ＬＡＫ细胞疗法在临床应用提供实验基础。

自制RV－McAb－ELISA试剂盒与进口及国产RV－ELISA试剂盒的比较

将自制的肠道病毒单克隆抗体ＥＬＩＳＡ（ＲＶ－ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）试剂盒与丹麦Ｄａｋｏ公司生产的及上海市卫生防疫站生产的ＲＶ－ＥＬＩＳＡ试剂盒对８８份粪样中ＲＶ的检测结果进行了比较。以ＰＡＧＥ结果为比较标准，自制试剂盒的灵敏度、特异度及Ｙｏｕｄｅｎ指数分别为９８．３％、９０％、及０．８８，明显高于丹麦Ｄａｋｏ及上海生产试剂盒；对ＲＶ核酸含量较低粪样的阳性检出率（９５．７％）也明显高于后二者；此外，自制试剂盒的阳性标本与阴性标本吸光度（Ａ，曾称光密度ＯＤ）均值之比值约是另二种试剂盒的２．２倍。结果提示，自制ＲＶ－ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ试剂盒检测ＲＶ的灵敏性和特异性优于国内外同类产品，并具有操作省时，易于目测判断结果等特点，有利于基层单位推广使用。