副猪嗜血杆菌试验感染KM小鼠及在其体内的分布

为了研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)河南分离野毒株对昆明(KM)小鼠的致病性以及在感染KM小鼠体内组织器官的分布,将Hps血清5型标准菌株和河南分离野毒株采用灌胃和腹腔感染KM小鼠,观察2个Hps菌株对小鼠的致病性并测定Hps在感染小鼠体内组织器官的分布。结果显示,Hps河南分离野毒株和血清5型标准菌株腹腔、灌胃感染KM小鼠,在不同时间均出现发病,以腹腔感染发病症状严重、死亡率高,其中河南分离野毒株腹腔感染死亡率为2/7,血清5型标准菌株腹腔感染死亡率为1/7,死亡集中在攻毒后43~50 h;剖检死亡小鼠肉眼可见肺脏出血点、胸腔积液等病理变化。表明河南分离野毒株和标准菌株5型对KM小鼠均有致病性,为深入研究副猪嗜血杆菌的致病机制、免疫及防控该病提供科学依据。

基于网络药理学探究乌梅散加减方治疗猪传染性胃肠炎的作用机制

【目的】借助网络药理学手段探究乌梅散加减方治疗猪传染性胃肠炎(TGE)的作用机制。【方法】利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Swiss TargetPrediction获取乌梅散加减方的活性成分与作用靶点,应用公共比较毒理基因组学数据库(CTD)获取TGE的相关靶点,使用STRING数据库绘制乌梅散加减方与TGE交集靶点的蛋白互作(PPI)网络图,利用DAVID对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,探究乌梅散加减方治疗TGE的作用机制。【结果】从乌梅散加减方中共筛选到槲皮素、山柰酚、芒柄花素等125种活性成分和JUN原癌基因(JUN)、肿瘤坏死因子(TNF)、信号传导与转录激活因子3(STAT3)等58个作用靶点。GO功能富集分析显示,共得到生物过程138个条目,涉及免疫反应、血管内皮因子生成、RNA聚合酶Ⅱ启动子对pri-miRNA转录的正调控等;细胞组分13个条目,涉及胞外区、细胞外空间、膜筏等;分子功能32个条目,涉及细胞因子活性、生长因子活性、白细胞介素2(IL2)受体活性等。KEGG通路富集分析显示,共得到135条信号通路,其中IL17信号通路、Th17细胞分化、TNF信号通路、HIF-1信号通路是乌梅散加减方治疗TGE的主要信号通路。【结论】乌梅散加减方主要通过槲皮素、山柰酚、芒柄花素等多个活性成分调控JUN、TNF、STAT3等靶点,通过参与IL17信号通路、Th17细胞分化等治疗TGE。

板芪发酵液对断奶羔羊肠道菌群及生长性能的影响

【目的】探究板芪(板蓝根、黄芪)发酵液对断奶羔羊肠道菌群及生长性能的影响。【方法】选用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、DY芽孢杆菌、混合菌株[v(枯草芽孢杆菌)∶v(地衣芽孢杆菌)=1∶1]发酵板芪提取液饲喂羔羊,未发酵组饲喂板芪提取液,对照组饲喂基础日粮,试验期28 d,统计生长指标并制备肠道组织切片,对表现良好的处理组进行高通量测序分析发酵中药对肠道菌群的影响,初步探究发酵中药的作用机制。【结果】发酵Ⅰ组(枯草芽孢杆菌发酵板芪提取液)显著提高羔羊的平均日增重(P<0.05),可能与肠绒毛长度的增加有直接关系。肠道菌群测序结果显示,发酵Ⅰ组显著提高十二指肠菌群的丰度与多样性(P<0.05);发酵Ⅰ组提高放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Fimicutes)、丁酸弧菌属(Butyrivibrio)的相对丰度,同时降低变形菌门(Proteobacteria)和贪铜菌属(Cupriavidus)的相对丰度;Lefse(LDA>3)分析显示,发酵Ⅰ组显著提高放线菌门(Actinobacteria)、蓝藻菌门(Tenericutes)、小杆菌属(Mogibacterium)、L7A-E11菌属的相对丰度(P<0.05);未发酵组显著提高迷踪菌门(Elusimicrobia)相对丰度(P<0.05);不动杆菌属(Acinetobacter)则在对照组中显著富集(P<0.05)。【结论】枯草芽孢杆菌发酵板芪提取液可以提高断奶羔羊小肠绒毛长度与菌群多样性进而提高羔羊的平均日增重,为发酵中药在断奶羔羊上的应用提供理论支持。

板蓝根多糖在3D4/21/CD163细胞上对PRRSV感染过程的影响

以永生化的传代猪肺泡巨噬细胞(3D4/21/CD163)作为靶细胞,研究板蓝根多糖(IRPS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抗病毒效果。研究IRPS的最佳给药方式及其抑制病毒增殖的环节,分别以预防作用、直接杀灭作用和治疗作用来测定IRPS抑制PRRSV增殖的最佳作用方式和药物浓度;从IRPS对PRRSV的吸附、入侵环节的影响确定IRPS抑制病毒感染的具体环节,用荧光定量PCR和间接免疫荧光对IRPS的抗PRRSV作用进行验证。结果显示,当药物浓度为0.062 5 mg/mL时对PRRSV的直接杀灭作用和预防作用效果最好,显著降低PRRSV在细胞中的拷贝数;IRPS主要是在病毒入侵细胞的环节发挥作用。

板蓝根多糖对PRRSV-JXA1株体外增殖的影响

为研究板蓝根多糖(Radix isatidis polysaccharide,IRPS)体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)增殖的作用方式、复制环节和途径,通过荧光定量PCR进行了最佳计量和给药方式的筛选,确定了IRPS作用于病毒复制的环节,通过荧光定量PCR、间接免疫荧光、蛋白质印迹等试验探讨了TLR4/NF-ΚB途径对IRPS抑制PRRSV-JXA1株增殖的影响。结果显示,IRPS抑制PRRSV-JXA1株增殖的最佳剂量为0.015625 g/L,最佳给药方式和最佳阻断环节为预防作用和吸附环节,分别使病毒载量减少了91.34%(P<0.0001)和88.83%(P<0.0001);IRPS在多个时间点促进了PRRSV感染细胞TLR4表达;当TLR4/NF-ΚB途径被阻断时IRPS不能抑制PRRSV的增殖作用,反而促进其增殖(P<0.0001)。结果表明,IRPS主要作用于PRRSV-JXA1株感染的吸附环节,TLR4下游NF-ΚB信号通路是IRPS体外抑制PRRSV-JXA1株增殖的关键通路。