石斛碱对糖尿病肾病大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路及足细胞功能障碍的影响

目的研究石斛碱对糖尿病肾病大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路及足细胞功能障碍的影响。方法建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、石斛碱低剂量组、石斛碱中剂量组、石斛碱高剂量组、二甲双胍组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组,分组处理后,检测大鼠生化指标血糖、血脂、尿微量白蛋白(UMA)水平;以苏木精-伊红(HE)染色检测6组大鼠肾组织病理变化;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠尿中足细胞标志蛋白nephrin、PCX含量及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;以蛋白免疫印迹法检测肾组织PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠肾组织出现肾小球基底膜局部增厚,足状突起排列紊乱呈带状结构,局部突起融合、变平,贴敷于基底膜等病理损伤,大鼠血糖、血脂、UMA、TNF-α及IL-6水平、尿中nephrin、PCX蛋白含量显著升高(P<0.05),肾组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR显著降低(P<0.05)。与模型组相比,石斛碱低、中、高剂量组及二甲双胍组大鼠血糖、血脂、UMA、TNF-α及IL-6水平、尿中nephrin、PCX蛋白含量降低(P<0.05),肾组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05),且石斛碱各组呈剂量依赖性,石斛碱高剂量组与二甲双胍组比较,各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论石斛碱可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路,减轻糖尿病肾病大鼠足细胞功能障碍,改善其临床症状。

金钗石斛多糖对多柔比星肾病大鼠肾纤维化及PI3K/Akt/HIF-1α通路的影响

目的:探讨金钗石斛多糖对多柔比星肾病大鼠肾组织纤维化及磷脂酰肌醇3激酶/丝氪酸-苏氪酸蛋白激酶/缺氧诱导因子-1α(PI3K/Akt/HIF-1α)信号通路的影响,并分析其可能的作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(依那普利,4 g·kg-1·d-1)、金钗石斛多糖低(5 g·kg-1·d-1)、中(10 g·kg-1·d-1)、高(20 g·kg-1·d-1)剂量组,每组各8只。除正常对照组外,其余各组大鼠制备多柔比星肾病大鼠模型。造模成功后灌胃给药,1次/d,连续给药4周,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。采用Masson染色观察多柔比星肾病大鼠肾脏纤维化程度;检测各组大鼠肾功能指标;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾组织中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达水平;Western blot法检测α-SMA、FN、CTGF、PI3K及磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt及磷酸化Akt(p-Akt)、HIF-1α蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平、24 h尿蛋白含量、胶原纤维阳性区占观察视野面积比、肾组织中α-SMA、FN、CTGF及p-PI3K、p-Akt、HIF-1α表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组与金钗石斛多糖不同剂量组大鼠Scr、BUN水平、24 h尿蛋白含量、胶原纤维阳性区占观察视野面积比、肾组织中α-SMA、FN、CTGF及p-PI3K、p-Akt、HIF-1α表达水平均显著降低(P<0.05),且金钗石斛多糖高剂量组与阳性对照组均显著低于金钗石斛多糖低、中剂量组(P<0.05),阳性对照组与高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组PI3K、Akt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:金钗石斛多糖可改善多柔比星肾病大鼠肾功能并减缓肾纤维化,其机制可能与抑制PI3K/Akt/HIF-1α信号通路有关。

维持性血液透析患者血清转铁蛋白饱和度与透析导管相关性感染及预后的相关性分析

目的检测维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者血清转铁蛋白饱和度(transferin saturation,TSAT)水平,探讨TSAT与透析导管相关性感染及预后的相关性。方法选取2017年9月至2019年9月陕西省人民医院收治的行静脉置管血液透析治疗的肾衰竭患者183例作为研究对象,根据是否发生导管相关性感染(catheter-related bloodstream infection,CRBSI)将研究对象分为感染组(42例)和非感染组(141例),选取同期入院体检的健康志愿者50名作为对照组。采用Ferene法检测血清铁(serum iron,SI)、总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC)水平,并计算TSAT值;根据患者30 d预后情况,好转为预后良好组(26例),拔管或死亡为预后不良组(共16例),比较两组患者血清TSAT水平;Logistic回归分析MHD合并CRBSI患者预后不良的危险因素;受试者工作特性曲线(receiver operator characteristic curves,ROC)分析血清TSAT水平对MHD合并CRBSI患者预后不良的诊断价值。结果感染组患者血清SI、TSAT水平显著低于对照组、未感染组(P<0.05),TIBC水平显著高于对照组、未感染组(P<0.05),未感染组患者血清SI、TSAT水平显著低于对照组(P<0.05),TIBC水平显著高于对照组(P<0.05)。预后不良组患者糖尿病比例、白细胞(white blood cell,WBC)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)水平均显著高于预后良好组(P<0.05),血清TSAT、SI水平显著低于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,糖尿病、WBC、CRP水平为MHD合并CRBSI患者预后不良的危险因素,TSAT水平为保护因素。ROC结果显示,血清TSAT水平对MHD合并CRBSI患者预后不良诊断的曲线下面积(area under the cure,AUC)为0.853,敏感度为87.5%,特异性为76.9%。结论MHD合并CRBSI患者血清TSAT水平显著降低,且血清TSAT水平是MHD合并CRBSI患者预后不良的保护因素,对其预后情况具有一定诊断价值,可作为预测预后情况的潜在生物学指标。

红景天苷预处理对大鼠移植肾缺血再灌注损伤的保护

目的探讨红景天苷预处理对移植肾缺血再灌注损伤的保护机制。方法建立近交系雄性SD大鼠同基因肾移植模型。共设3个组,假手术组、红景天苷预处理组、移植缺血再灌注模型组,每组24只。观察红景天苷预处理对大鼠移植肾缺血再灌注过程中血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、过氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平变化的影响;取移植肾组织HE染色后光镜观察肾组织病理学改变;荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)含量;采用免疫组织化学染色和放射免疫法分别检测肾组织中核转录因子κB(NF-κB)阳性细胞数目和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1(IL-1)、白介素-6(IL-6)的表达。结果红景天苷预处理组大鼠BUN、SCr、MDA在术后轻度升高,与假手术组比较无统计学差异(P>0.05),与模型组比较有统计学差异(P<0.01);SOD在术后24 h增加最明显,与假手术组比较有统计学差异(P<0.05),与模型组比较有统计学差异(P<0.05)。ROS含量在红景天苷预处理组术后上升,与假手术组比较有统计学差异(P<0.05),但不如模型组升高明显,两组比较有统计学差异(P<0.01)。红景天苷预处理组肾脏病理表现损伤较轻,与模型组比较有统计学差异(P<0.05)。NF-κB阳性细胞数目在红景天苷预处理组术后表达略增加,在模型组表达明显增加,两组比较有统计学差异(P<0.01)。肾组织匀浆中TNF-α、IL-1和IL-6含量在假手术组和红景天苷预处理组各时间段均未见明显变化,两组间比较无统计学差异(P>0.05),而模型组含量明显增加,与其他两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论红景天苷预处理通过抑制氧化应激和减轻炎性因子对大鼠肾脏移植缺血再灌注后损伤具有一定的预防和保护作用。

环孢素联合糖皮质激素治疗特发性膜性肾病的临床研究

目的探讨环孢素联合糖皮质激素治疗特发性膜性肾病(IMN)的临床有效性及安全性。方法收集经肾活检确诊的89例IMN患者,41例采用环孢素联合糖皮质激素治疗(环孢素组),48例采用环磷酰胺联合糖皮质激素治疗(环磷酰胺组),观察两组患者治疗后24 h尿蛋白、血清白蛋白、甘油三酯、胆固醇、白细胞计数、血糖和血肌酐水平变化,比较两组患者两年内不良反应发生及疾病复发情况。结果治疗6、12个月后,两组24 h尿蛋白、甘油三酯、胆固醇水平较治疗前下降,血清白蛋白较治疗前升高(P均<0.05)。环孢素组患者治疗6个月、12个月的总有效率分别为73.17、87.80%,均高于环磷酰胺组的58.33、72.92%(P均<0.05)。随访至24个月,环孢素组和环磷酰胺组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05);环孢素组两年复发率(4.88%)低于环磷酰胺组(16.67%)(P<0.05)。结论在特发性膜性肾病的治疗中,环孢素A联合糖皮质激素效果肯定,与环磷酰胺相比,缓解率高、复发率低,并未增加不良反应的发生。

肾移植术后并发带状疱疹的临床分析

目的分析肾移植术后患者并发带状疱疹的发病特点,探讨诊治方法。方法回顾性分析陕西省人民医院肾病血透中心2014年6月至2017年12月期间29例肾移植术后带状疱疹病例的临床资料,分析发病特点,对其诊治进行临床总结。结果 29例带状疱疹患者发病时间为肾移植术后4～84个月,平均(45. 2±30. 6)个月,其中术后36个月内发病者为22例(占75. 86%)。出疱疹前病变部位有不同程度针刺样或烧灼样疼痛感24例(占82. 76%),伴轻度发热7例(占24. 14%)。23例表现为寻常型(占79. 31%),6例为特殊型(占20. 69%),4例合并局部细菌感染(占13. 79%)。根据患者的临床表现及体征即可诊断带状疱疹,必要时可取水疱液检查。所有患者均应用更昔洛韦注射液抗病毒治疗,并应用维生素C注射液协助抗病毒感染、维生素B12营养神经及外用炉甘石洗剂辅助治疗,20例给予减少免疫抑制剂用量,4例同时应用抗感染药物治疗。所有患者皮肤疱疹恢复良好,随访6个月无复发。结论肾移植术后患者免疫力低下,带状疱疹病毒感染多发生在术后3年内,多数患者出疱疹前感病变部位不适,少数伴轻度发热,疱疹以寻常型表现为主,诊断以临床表现和体征为主,治疗上以静脉使用更昔洛韦注射液,适当调整免疫抑制剂剂量,辅以对症治疗,可有效治疗肾移植术后带状疱疹。

早期糖尿病肾病患者血清LncRNA TUG1表达及临床意义

目的:检测糖尿病肾病(DN)患者血清中长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(LncRNA TUG1)水平,并探讨其临床意义。方法:选取在本院就诊的125例糖尿病患者,分为T2DM组(65例);早期DN组(60例);另选取在本院体检的健康人61例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测受试者血清中LncRNA TUG1表达水平;全自动生化分析仪检测尿液UAER水平。Pearson法分析LncRNA TUG1表达水平与临床指标相关性;ROC曲线分析血清LncRNA TUG1及尿液UAER对DN的诊断价值;Logistic回归分析DN的影响因素。结果:LncRNA TUG1在对照组、T2DM组及早期DN组血清表达水平依次升高(P<0.05);与HbA1c、TG、eGFR、Scr、BUN、UAER呈正相关(P<0.05)。血清LncRNA TUG1、尿液UAER水平诊断DN的曲线下面积(AUC)分别为0.923、0.861。Logistic回归分析显示LncRNA TUG1、UAER水平偏高是DN的独立危险因素。结论:LncRNA TUG1在DN患者血清中高表达,对DN临床诊断具有重要参考价值,可能作为潜在的诊断DN的标志物。

肾移植术后远期贫血的发病及其相关危险因素

目的探讨肾移植术后贫血（PTA）的发病率及可能的相关危险因素。方法回顾性分析2007-12~2015-12在本院规律随访的189例肾移植术后患者资料,根据PTA诊断标准将患者分成PTA组（n=51）及非PTA组（n=138）。记录可能引起PTA的各项参数,将可能引起PTA的危险因素进行统计学分析,对P〈0.05的参数进行Logistic多因素分析。结果189例肾移植术后患者,共有51例诊断为PTA,发病率为26.98%。统计学分析显示：患者年龄、免疫抑制剂类型、降压药物、移植术后糖尿病（PTMD）、血清铁蛋白、乙型病毒性肝炎与PTA的发生无相关性（P〉0.05）;性别、血清肌酐水平、急性排斥反应、肺部感染、更昔洛韦、伏立康唑、复方新诺明、血促红素（EPO）水平与PTA的发生呈明显相关性（P〈0.05）。将各变量再纳入多因素非条件Logistic回归分析表明：女性（OR=1.104,95%CI 1.019-2.635,P=0.041）,血清肌酐水平（OR=3.942,95%CI 2.011-5.722,P=0.001）,急性排斥（OR=6.305,95%CI 3.897-9.243,P=0.004）,更昔洛韦（OR=2.115,95%CI1.652-7.346,P=0.042）,血清EPO（OR=3.207,95%CI 0.410-6.051,P=0.001）5项因素与PTA的发生密切相关。结论PTA是肾移植术后一项常见的并发症,女性、移植肾功能降低、急性排斥反应、使用更昔洛韦以及血清EPO减少是发生PTA的危险因素。

汉黄芩苷对IgA肾病大鼠NF-κB/NLRP3通路及系膜增生的影响

目的:探讨汉黄芩苷(wogonoside,WG)对免疫球蛋白A肾病(immunoglobulin A nephropathy,IgAN)大鼠系膜增生及核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)通路的影响。方法:牛血清白蛋白灌胃联合四氯化碳与脂多糖注射建立IgAN大鼠模型。模型成功后随机分为模型组、WG(低、中、高)剂量组、地塞米松组,每组8只;另设对照组。检测血清肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,24 h尿蛋白(24 hour urinary protein,24-UTP)和24 h尿红细胞数,肾脏组织形态,肾脏组织中NF-κB、NLRP3、接头蛋白ASC(apoptosis-associated speck-like proteincontain a caspase activation and recruitment domain,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酶原(cysteine-containing aspartate-specific-3 proteases,pro-caspase-1)、血清中白介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。结果:与对照组相比,模型组肾小球系膜及基质细胞增生严重、炎症明显、荧光聚集,SCr、BUN、24-UTP水平、24 h尿红细胞数、肾脏组织中核内NF-κB、核内NF-κB/总NF-κB、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白、血清中IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05);肾脏组织中核外NF-κB蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组相比,WG剂量组肾小球系膜及基质细胞增生减弱,荧光强度减弱,肾脏组织中核外NF-κB蛋白水平升高(P<0.05),SCr、BUN、24-UTP水平、24 h尿红细胞数、肾脏组织中核内NF-κB、核内NF-κB/总NF-κB、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1蛋白、血清中IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05),呈剂量依赖效应。结论:WG可抑制NF-κB/NLRP3通路实现对IgAN系膜增生的缓解。

狼疮性肾炎患者LncRNA-Gm4419与肾纤维化的关系

目的:分析狼疮性肾炎患者长链非编码RNA-Gm4419(LncRNA-Gm4419)的表达水平及其与肾纤维化的关系,明确LncRNA-Gm4419对狼疮性肾炎肾纤维化的可能作用机制。方法:选择2017年7月至2019年4月本院确诊的狼疮性肾炎患者76例作为实验组,并将实验组患者依据肾组织病理活检结果分为有肾纤维化组和无肾纤维化组,选择同期本院体检的健康人员59例作为对照组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测受试者血清LncRNA-Gm4419水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血肌酐、尿素、β2-微球蛋白、胱抑素C(CysC)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、转化生长因子-β1(TGFβ1)、Ⅳ型胶原(CⅣ)表达水平,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA-Gm4419的表达水平对狼疮性肾炎肾纤维化的诊断价值,用Logistic回归分析法分析影响狼疮性肾炎肾纤维化的危险因素。结果:实验组血清血肌酐、尿素、β2-微球蛋白、LncRNA-Gm4419、CysC、TIMP-1、TGF-β1、CⅣ均比对照组高(P<0.05),有肾纤维化患者上述指标明显高于无肾纤维化患者(P<0.05)。ROC曲线显示,血清LncRNA-Gm4419诊断狼疮性肾炎肾纤维化的曲线下面积(AUC)为0.900,截断值为2.571,此时对应的灵敏度为78.9%,特异度为93.0%。LncRNA-Gm4419与CysC、TIMP-1、TGF-β1、CⅣ均呈正相关,差异有统计学意义(r=0.598、0.680、0.718、0.834,P<0.001)。LncRNA-Gm4419、CysC、TIMP-1是狼疮性肾炎肾纤维化的危险因素。结论:狼疮性肾炎患者血清LncRNA-Gm4419呈高表达,血清LncRNA-Gm4419诊断狼疮性肾炎肾纤维化特异度较好,且LncRNA-Gm4419与肾纤维化指标密切相关,是狼疮性肾炎肾纤维化的危险因素,可作为肾脏纤维化的参考指标。