山奈酚通过上调miR-340-5p减轻脊神经结扎大鼠的神经性疼痛

目的探讨山奈酚(kaempferol,KAE)对脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)大鼠神经性疼痛的作用机制。方法采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠星形胶质细胞建立炎症模型,用山奈酚单独或与miR-340-5p抑制剂共同处理细胞,RT-qPCR检测miR-340-5p表达,ELISA检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;荧光素酶报告基因实验验证AKT3与miR-340-5p的靶向关系;Western blotting检测自噬标志蛋白的表达。此外,建立SNL大鼠模型,山奈酚口服给药后,检测miR-340-5p表达,炎症因子以及自噬标志蛋白水平,并测定大鼠机械缩爪阈值和缩爪潜伏期。结果在LPS诱导的星形胶质细胞中,山奈酚上调miR-340-5p表达,抑制IL-1β和TNF-α分泌,转染miR-340-5p抑制剂则逆转山奈酚对miR-340-5p表达的促进作用以及对炎症因子分泌的抑制作用。AKT3被确定是miR-340-5p的靶基因。山奈酚上调miR-340-5p表达,进而阻断AKT3/mTOR信号通路,增强星形胶质细胞自噬。山奈酚给药的SNL大鼠表现出miR-340-5p表达上调,炎症因子分泌减少,自噬相关蛋白表达增加,机械缩爪阈值增加,缩爪潜伏期延长。结论山奈酚通过上调miR-340-5p靶向抑制AKT3/mTOR信号通路,抑制星形胶质细胞炎症反应,增强自噬,减轻SNL大鼠神经性疼痛。

miR-132-3p靶向调节Ptch1减轻慢性压迫性神经损伤小鼠神经性疼痛

背景:神经病理性疼痛的发病机制复杂,病理过程繁多,miR-132在神经病理性疼痛传导通路中异常表达,影响疼痛的发生、发展过程。目的:探讨miR-132-3p在慢性压迫性神经损伤小鼠神经性疼痛中所发挥的作用及机制。方法:①小鼠小胶质细胞BV2经100μg/L脂多糖刺激建立活化模型,采用Western blot检测小胶质细胞激活标记物IBA1的表达,RT-qPCR检测miR-132-3p的表达。将miR-132-3p mimic或inhibitor分别转染至BV2细胞,采用Western blot检测IBA1以及P2X4R的表达。预测并验证miR-132-3p的靶向调节作用,将Ptch1表达载体pcDNA-Ptch1或si-Ptch1转染BV2细胞24 h后用脂多糖刺激培养24 h,采用Western blot检测IBA1、P2X4R以及Shh信号通路标记蛋白的表达。BV2细胞共转染miR-132-3p-mimic和pcDNA-Ptch124 h后用脂多糖刺激培养24 h,采用Western blot检测上述蛋白的表达。②30只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6),假手术组(n=6),模型组(n=6),NC-mimic组(n=6),miR-132-3p-mimic组(n=6),后两组经鞘内注射NC-mimic和miR-132-3p-mimic,检测各组小鼠机械缩足反射阈值和热阈值,行为学检测后取背根神经节,采用RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测Ptch1、P2X4R和Shh通路标记蛋白的表达,进一步验证miR-132-3p在慢性压迫性神经损伤小鼠神经性疼痛中发挥的作用及机制。结果与结论:①与对照组比较,脂多糖刺激促进BV2细胞的激活(P<0.05),下调miR-132-3p的表达(P<0.05);②miR-132-3p通过靶向调节Ptch1抑制Shh信号通路的激活,并进一步抑制BV2细胞的激活以及P2X4R的表达,过表达Ptch1可以逆转miR-132-3p-mimic的作用(P<0.05);③成功建立慢性压迫性神经损伤模型,与注射NC-mimic组相比,鞘内注射miR-132-3p-mimic下调Ptch1的表达(P<0.05),抑制Shh信号通路的激活(P<0.05),减少P2X4R的表达(P<0.05),并显著提高慢性压迫性神经损伤小鼠的机械缩足反射阈值和热阈值(P<0.01);④结果表明,miR-132-3p通过靶向调节Ptch1抑制Shh信号通路的激活,减轻慢性压迫性神经损伤小鼠的神经性疼痛。

布托啡诺复合依托咪酯在无痛胃镜检查中的麻醉效果

目的:探讨布托啡诺复合依托咪酯在无痛胃镜检查中的麻醉效果。方法:行无痛胃镜诊疗术的患者160例随机分组为对照组(n=80)与观察组(n=80);对照组予以芬太尼复合依托咪酯麻醉,观察组予以布托啡诺复合依托咪酯麻醉。记录2组围手术期一般指标;记录2组入室时、意识消失时、退镜结束即刻和检查结束后5 min的平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、心率(heart rate,HR)和血氧饱和度(blood oxygen saturation,SpO2)。记录2组不良反应发生情况;记录2组患者和医师满意度。结果:与对照组相比,观察组依托咪酯用量显著减少(P<0.05),苏醒时间和复苏室停留时间显著缩短(P<0.05);2组麻醉起效时间、胃镜检查时间对比差异均无统计学意义(均P>0.05)。在意识消失和退镜结束即刻时,2组MAP、HR相比入室时均显著降低(均P<0.05),但观察组高于对照组(P<0.05);2组各时间点SpO2对比差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比,观察组恶心呕吐、呼吸抑制以及肌阵挛发生率均显著降低(均P<0.05)。与对照组相比,观察组患者、麻醉医师及检查医生的满意度均显著提高(均P<0.05)。结论:布托啡诺复合依托咪酯用于无痛胃镜检查安全有效,相比芬太尼复合依托咪酯苏醒快,血流动力学波动小,不良反应少。

姜黄素改善七氟烷致老年大鼠认知功能障碍的机制

目的 探讨姜黄素对七氟烷致老年大鼠认知功能障碍及海马神经细胞凋亡的改善作用及可能的作用机制。方法 选取48只SD雄性大鼠建立术后认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction,POCD)模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组(12只)、姜黄素低剂量组(12只)和姜黄素高剂量组(12只),另设对照组(12只)。姜黄素低、中、高剂量组分别用50、150、300 mg·kg^(-1)姜黄素混悬液(用生理盐水配制)灌胃,对照组及模型组用等量生理盐水灌胃,连续处理4周。用Morris水迷宫实验评定各组大鼠认知功能损伤程度及改善情况;用ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平;用HE染色观察各组大鼠海马组织CA1区的病理变化;用TUNEL法检测大鼠海马组织CA1区神经细胞凋亡情况;分别用RT-qPCR和Western blot检测海马组织中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK3β)mRNA和蛋白的表达情况。结果 与模型组比较,3个给药组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期、TNF-α、IL-1β、IL-6、海马组织细胞凋亡率、GSK3β mRNA和p-GSK3β蛋白的表达水平降低,跨台次数及PI3K、AKT mRNA和p-AKT蛋白的表达水平升高(P<0.05)。与低剂量组比较,姜黄素中、高剂量组上述指标均明显降低,以高剂量组的变化最明显(P<0.05)。结论 姜黄素能够改善七氟烷所致POCD大鼠认知功能障碍,减轻炎症反应,降低海马神经细胞凋亡率,可能是通过激活PI3K/AKT/GSK3β信号通路发挥作用的。

鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制

目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组(于术后第7天鞘内注射NC shRNA)和pSNL+TRPA1 shRNA组(于术后第7天鞘内注射TRPA1 shRNA)。检测注射前和注射后l、7、12和24 h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值(MWT)和热阈值(TWL)。最后一次检测后2 h处死小鼠,采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节(DRG)中TRPA1蛋白激酶Cε型(Prkce)和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平。分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞,过表达或敲低TRPA1,检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。采用STRING数据库和免疫共沉淀(Co-IP)法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。将TRPA1 shRNA单独转染或与AdPrkce共转染星形胶质细胞,分为sh-TRPA1+empty vector组(转染空载体)、sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染TRPA1过表达载体)和sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染Prkce过表达载体)。采用Western blotting法检测各组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。结果:与对照组比较,pSNL组小鼠MWT和TWL降低(P<0.01);与pSNL+NC中shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠MWT和TWL升高(P<0.01)。与假手术组比较,术后第7天pSNL组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.05),血清中TNF-α和MCP-1水平升高(P<0.05)。与pSNL+NC shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平及血清中TNF-α和MCP-1水平降低(P<0.05)。与空质粒组比较,Ad-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。与sh-TRPA1+empty vector组比较,sh-TRPA1+Ad-Prkce组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。结论:TRPA1通过与Prkce相互作用参与pSNL模型小鼠星形胶质细胞的激活以及神经病理性疼痛发生发展过程。

老年泌尿手术应用两种麻醉深度对术后的影响

目的:观察老年泌尿外科手术患者应用七氟醚全麻中两种麻醉深度对术后认知功能的影响。方法:选取2017年5月~2019年5月收治的行泌尿外科手术老年患者160例,按随机数字表法分成A组与B组,各80例。其中A组接受深浓度七氟醚麻醉(BIS值35~45),B组接受浅浓度七氟醚麻醉(BIS值50~60)。对比两组不同手术时段呼吸功能及认知功能。结果:两组不同麻醉时段呼吸功能及术前中文版简易精神状态检查表评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后A组不同时间段CMMSE评分均高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同深度麻醉对患者不同手术时间段的呼吸功能均不造成影响,其中深浓度七氟醚麻醉的麻醉期间并发症发生率较低,术后不同时间段的认知功能影响更小。

腰硬联合麻醉时不同注药速度对妇科手术麻醉效果的影响

目的:探讨腰硬联合麻醉时不同注药速度对妇科手术麻醉效果的影响。方法:选取本院2017年1月至2018年1月62例妇科手术行腰硬联合麻醉患者,根据随机分表法分为A组与B组,每组31例。A组给予10s注射0.75%罗哌卡因2mL,B组给予20s注射0.75%罗哌卡因2mL,对比麻醉效果。结果:A组T6镇痛平面出现时间、最高平面出现时间显著短于B组(P<0.05),而最高平面明显高于B组(P<0.05);首剂后5min Brmage评分与B组比较无显著差异(P> 0.05);A组最低血压值明显高于B组,最低血压出现时间短于B组(P<0.05);B组并发症发生率6.45%显著低于A组的25.81%(P<0.05)。结论:腰硬联合麻醉时20s注药速度对妇科手术麻醉效果较好。

七氟醚与异丙酚全身麻醉在腹腔镜胆囊切除术中的应用效果及对患者术后认知功能的影响

目的 探讨七氟醚与异丙酚全身麻醉在腹腔镜胆囊切除术(LC)中的效果及对患者术后认知功能的影响。方法 90例LC患者随机分为两组,A组给予七氟醚全麻,B组给予异丙酚全麻,比较两组的术后恢复指标、血压、认知功能。结果 B组的术后自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间及定向力恢复时间均短于A组(P <0.05)。插管后2 min、气腹后5 min,B组的收缩压、舒张压均高于A组(P <0.05)。术后2 h、 6 h,B组的MMSE评分均高于A组(P <0.05)。结论 与七氟醚全麻相比,异丙酚全麻可更有效地促进LC患者的术后苏醒与早期认知功能恢复,且对患者血压的影响更小。