下调miR-31抑制心肌细胞凋亡并防止心肌缺血再灌注损伤的机制研究

目的:探究microRNA-31(miR-31)在心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤及大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法:通过inhibitor-miR-31及空病毒载体构建miR-31低表达心肌细胞,采用H/R建立心肌细胞损伤模型,缺氧4 h再复氧2 h,采用定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞miR-31 mRNA相对水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶9(Cleaved Caspase-9)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、Bcl相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。将Wistar大鼠分为对照组、MIRI组、MIRI+inhibitor-NC组和MIRI+inhibitor-miR-31组,每组24只,MIRI+inhibitor-NC组和MIRI+inhibitor-miR-31组大鼠心肌内注射携带inhibitor-NC、inhibitor-miR-31的慢病毒载体,7 d后,采用左冠状动脉结扎法构建MIRI模型。慢病毒载体注射后14 d,超声仪检查大鼠心率(HR)、左心室壁厚度(LVWT)、左心室收缩末期容积(LVESV)和左室射血分数(LVEF),qRT-PCR检测心肌组织miR-31 mRNA相对水平,氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测心脏梗死面积百分比,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理损伤,缺口末端标记法(TUNEL)染色观察心肌组织凋亡率,酶联免疫吸附法检测血清心肌肌钙蛋白-I(cTnI)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,Western Blot检测心肌组织凋亡相关蛋白表达。结果:与对照组比较,H/R组心肌细胞miR-31 mRNA相对水平、细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与H/R组比较,H/R+inhibitor-miR-31组心肌细胞miR-31mRNA相对水平、细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组比较,MIRI组大鼠心肌组织miR-31 mRNA相对水平、梗死面积百分比、细胞凋亡率、LVESV和血清cTnI、CK、CK-MB水平升高(P<0.05),Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白表达升高(P<0.05),HR、LVWT、LVEF、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与MIRI组比较,MIRI+inhibitor-miR-31组大鼠心肌组织miR-31 mRNA相对水平、梗死面积百分比、细胞凋亡率、LVESV和血清cTnI、CK、CK-MB降低(P<0.05),Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bax蛋白表达降低(P<0.05),HR、LVWT、LVEF和Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。结论:抑制miR-31表达能通过增强心肌细胞抗凋亡作用,改善心肌缺氧再灌注损伤。

胸主动脉病变覆膜支架并“烟囱”技术疗效分析

目的：探讨胸主动脉覆膜支架并“烟囱”技术在近端锚定区不足时左锁骨下动脉（LSA）、左颈总动脉（LCCA）的处理方法及疗效。方法回顾分析近年收治的近端锚定区不足的21例胸主动脉病变患者（B型夹层11例，假性动脉瘤2例，动脉瘤1例，穿透性溃疡7例），18例病变位于LSA开口远侧，距LSA锚定区＜15 mm，3例病变破口位于LSA与LCCA之间。采用胸主动脉覆膜支架并LSA或LCCA“烟囱”技术治疗，观察脑及上肢缺血并发症发生情况。术后评价支架内漏、LSA或LCCA显影等。结果21例患者均成功地在主动脉内植入覆膜支架，“烟囱”支架同时分别植入在LSA 18例，LCCA 3例。术后患者均未出现神经系统并发症及左上肢严重缺血症状。术后随访1～38个月，主动脉覆膜支架形态良好，未发现Ⅰ型内漏，“烟囱”支架内血流通畅。结论胸主动脉病变近端锚定区不足时，“烟囱”技术可延长锚定区并保持LSA或LCCA通畅，更为安全地拓展了胸主动脉病变腔内治疗的适应证，达到了微创、安全、有效的目的。

miR-301通过激活Wnt/β-catenin信号通路改善冠心病大鼠心肌细胞凋亡

[目的]探讨miR-301影响冠心病大鼠心肌细胞凋亡的机制。[方法] SD大鼠随机分为对照组、模型组、miR-301激动剂组(agomir miR-301组)、miR-301激动剂对照组(agomir NC组)、Wnt/β-catenin通路抑制剂组(Dkk1组)及agomir miR-301+Dkk1组,每组10只。除对照组外,其余各组均高脂喂养建立大鼠冠心病模型,连续给药1周后,超声检测大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)、左心室舒张期末内径(LVEDD)和左心室收缩期末内径(LVESD)等心功能指标。HE染色观察大鼠心肌组织形态,TUNEL检测心肌细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测心肌组织miR-301表达,Western blot检测大鼠心肌组织Caspase-3、Bax、Wnt3a及β-catenin蛋白表达。[结果]与对照组相比,模型组大鼠LVEF、FS降低49.2%、49.1%,心肌组织miR-301表达水平降低69.0%,Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平降低60.7%、39.7%(P<0.05),LVEDD、LVESD升高32.2%、99.6%,心肌细胞凋亡率升高1362.6%,心肌组织Caspase-3、Bax蛋白表达水平升高100.0%、114.6%(P<0.05);与模型组相比,agomir miR-301组大鼠LVEF、FS升高71.4%、71.8%,心肌组织miR-301表达水平升高1935.5%,Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平升高102.4%、45.1%(P<0.05),LVEDD、LVESD降低15.6%、39.2%,心肌细胞凋亡率降低65.0%,心肌组织Caspase-3、Bax蛋白表达水平降低70.2%、78.4%(P<0.05),而Dkk1可逆转这种现象。[结论] miR-301通过激活Wnt/β-catenin信号通路改善冠心病大鼠心肌细胞凋亡。

血浆白细胞介素-18、硫化氢水平对先天性心脏病患儿术后并发急性肺损伤的诊断价值

目的探讨先天性心脏病(CHD)患儿血浆白细胞介素-18(IL-18)、硫化氢(H 2S)水平变化及其对术后并发急性肺损伤(ALI)的诊断价值。方法选择2018年3月至2020年3月于郑州大学第一附属医院行手术治疗的CHD患儿85例作为CHD组,根据术后是否出现ALI将CHD组患儿分为ALI组(n=13)和非ALI组(n=72);另选择同期体检健康儿童85例作为对照组。采用酶联免疫吸附实验检测各组儿童血浆IL-18水平,采用亚甲基蓝法测定血浆H 2S水平,比较各组儿童血浆IL-18、H 2S水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆IL-18、H 2S水平对CHD患儿术后ALI的诊断价值。结果CHD组患儿术前、术后3 d血浆IL-18水平均显著高于对照组,H 2S水平均显著低于对照组(P<0.05);CHD组患儿术后3 d血浆IL-18、H 2S水平均显著高于术前(P<0.05)。术前,ALI组与非ALI组患儿血浆IL-18和H 2S水平比较差异无统计学意义(P>0.05);术后,ALI组患儿血浆IL-18和H 2S水平显著高于非ALI组(P<0.05)。血浆IL-18和H 2S水平联合预测CHD患儿术后并发ALI的准确度、特异度、敏感度均显著高于IL-18和H 2S单独检测(P<0.05)。结论CHD术后并发ALI患儿血浆IL-18、H 2S水平呈上升趋势,联合检测血浆IL-18和H 2S水平是预测CHD患儿术后并发ALI的可靠指标。

应用"四步法"修复风湿性二尖瓣疾病的疗效

目的探讨应用"四步法"修复风湿性二尖瓣疾病的临床效果。方法回顾性分析2016年6月至2019年7月间136例应用"四步法"行风湿性二尖瓣成形术患者的临床资料,总结其临床结果。并与同期行风湿性二尖瓣置换术患者的临床结果进行对比。结果二尖瓣修复成形患者围手术期病死率2.94%。术后1周及随访期间与术前相比,左心房直径显著缩小,二尖瓣口舒张早期前向流速(E峰)显著降低,随访期间房颤消除率80.7%。成形组与置换组具有相同的早期临床效果及相关并发症,两组超声心动图主要指标对比差异均无统计学意义。结论应用"四步法"修复风湿性二尖瓣疾病的早期临床结果满意,"四步法"风湿性二尖瓣成形术具有可行性、安全性和有效性。