CD44表达增强促进胃腺癌组织上皮间质转化和肿瘤转移

目的探讨胃腺癌组织中CD44、上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学Envision染色法检测95例胃腺癌组织中CD44、E-cadherin和vimentin的表达,分析其与临床病理特征的关系,通过Spearman等级相关分析确定CD44与E-cadherin、vimentin的相关性。结果胃腺癌组织中CD44的表达明显高于癌旁正常组织,CD44的表达越强,肿瘤分化程度越低,越容易发生淋巴结转移。Spearman等级相关分析结果表明CD44的表达与E-cadherin水平呈负相关,与vimentin水平呈正相关。结论胃腺癌组织中CD44的表达增强促进癌细胞EMT,并与肿瘤的淋巴结转移密切相关。

LGR5 shRNA真核表达载体的构建及在MKN28细胞的干扰效果检测

构建并鉴定LGR5的shRNA真核表达载体,研究其对胃腺癌细胞LGR5基因表达的抑制作用.根据GenBank数据库提供的LGR5cDNA序列,选择设计一段靶向LGR5的shRNA序列,经退火成互补双链,克隆到质粒pGPU6/GFP/Neo中,构建重组载体并测序鉴定.将构建成功的特异性表达载体(pGPU6/GFP/Neo-LGR5)转染人胃腺癌细胞系后,应用荧光显微镜分析转染效率.利用荧光实时定量PCR对细胞内源性LGR5的表达进行检测.测序结果表明:靶向LGR5的重组pGPU6/GFP/Neo-LGR5载体构建成功.荧光实时定量PCR结果显示:与对照组相比,LGR5shRNA真核表达载体可以使胃腺癌细胞中LGR5的mRNA水平明显降低78.96%(P<0.01).本工作可以为进一步研究LGR5在胃癌发生发展中的作用提供帮助.