抗鸡球虫药配合用药方案的优化及疗效测定

以 2 0日龄罗曼雏鸡随机分为 37组 ,分别于感染前 2d饲喂不同配伍的抗球虫药的饲料 ,每鸡一次经口感染 5× 10 4 孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊。根据试验鸡的增重、盲肠病变评分及抗球虫指数 (ACI)等指标 ,评定 9种抗球虫药经不同配伍后的抗球虫效果 ;将 5种抗球虫药按不同作用机制、不同试验目的及不同浓度配伍后 ,在海赛克斯鸡群中使用 30余d。根据试验鸡的增重和盲肠病变评分指标 ,评定配合用药的疗效。结果表明 :聚醚类抗生素与作用于球虫生活史后期的化学合成药配伍后 ,达到了抗球虫的增效作用和促进增重的目的 ,同时大大降低了单一药物的用药剂量 ,配合用药的增效作用同药物的作用机理、活性峰期及用药浓度有关。

艾美耳球虫弱毒虫株的返祖性

将柔嫩艾美耳球虫鸡胚及药物适应株（Ｐ２５、Ｐ３０）和巨型艾美耳球虫早熟选育株（Ｐ２２、Ｐ２８），分别连续回鸡６代，测定试验鸡的肠道病变及肠道内容物的卵囊密度。结果显示，试验鸡的肠道平均病变程度（１．０以下）明显低于对照组，而肠道内容物的卵囊密度则基本相似，表明弱毒虫株无返祖现象。

鸡球虫混合苗的实验室免疫研究

采用柔嫩文美耳球虫和巨型文美耳球虫的弱毒虫株，按不同的配比制成混合苗，免疫7日龄雏鸡，分别于免疫后第2、4、6、8周用强毒卵囊攻击。与对照组相比，免疫鸡肠道病变轻微，增重明显，肠道内容物卵囊密度显著降低，取得了较好的免疫效果。

鸡球虫适应性及早熟选育

将柔嫩艾美耳球虫与某些药物经鸡胚传代３２代及巨型艾美耳球虫经鸡体早熟选育３０代后．通过回鸡毒力试验，结果表明，实验虫株与亲本株相比，其毒力明显降低，具备用于制备球虫混合苗的必要条件．

不同给药方案对鸡现场球虫免疫的影响

20日龄海赛克斯雏鸡连续50余天经垫料自然免疫接种一定量的球虫卵囊，同时采用不同的给药方案，饲喂含抗球虫药的饲料，72日龄时用大剂量卵囊（8×10^4）攻击。根据试验鸡的增重、盲肠病变评分和盲肠卵囊数等指标，评定不同给药方案对鸡球虫免疫的影响，结果表明：单独使用作用于球虫生活史早期的聚醚类离子载体抗生素，会严重抑制鸡对球虫的免疫力，聚醚类离子载体抗生素与作用于球虫生活史后期的化学合成药联合用药或低剂量配合用药，则对免疫无影响。

鸡球虫病兔疫研究概况

人们发现,球虫病康复鸡对再感染有抵抗力,成年鸡很少有球虫病症状,在缺乏再感染时,鸡对球虫的免疫力随时间延长而衰落下去,而且用一定数量的卵囊免疫鸡时,小剂量反复接种比大剂量一次投予产生更为有效的免疫效果,因而鸡对球虫免疫具有不完全免疫,即带虫免疫的特点。研究表明,无性增殖阶段的艾美耳球虫似乎是诱导保护性免疫的抗原,尤其球虫发育至第二代裂殖生殖期是诱导鸡产生保护性免疫力所必需的.相反,仅感染配子体(第二代裂殖子所产生的)。

抗球虫药在鸡胚球虫感染中活性峰期测定方法的研究

用鸡胚感染柔嫩艾美耳球虫子孢子作为抗球虫药活性峰期测定的模型。每一鸡胚在接种５０００个子孢子后，分别于感染的当天、第２天、第３天和第４天注入测试药物，以不同注药时间对鸡胚卵囊所产生的抑制率的差异，判定药物的活性峰期。结果表明，氯甲吡啶酚和丁氧喹啉的活性峰期是球虫生活史的第１天，卵囊抑制率分别为１００％和９８％；莫能菌素、盐霉素、球Ｒ和加福的作用峰期是第２天，卵囊抑制率均为１００％；氨丙啉的峰期是第３天，卵囊抑制率为１００％；尼卡巴嗪的峰期是第４天，卵囊抑制率为１００％；速丹则在球虫生活史的整个无性阶段均呈现活性作用。加福＋氨丙体＋乙氧乙胺苯甲酯、球Ｒ＋氨丙啉＋乙氧乙胺苯甲酯、加福＋速丹、加福＋尼卡巴嗪及加福＋乙氧乙胺苯甲酯等合剂亦在球虫生活史的整个无性阶段发挥高峰作用，其印囊的抑制率均为１００％；尼卡巴嗪＋氨丙啉合剂则在球虫生活史的第２～４天发挥最大作用，卵囊抑制率为１００％。作者认为，本方法具有操作简单，结果可信及成本低廉的特点，可作为抗球虫药的筛选方法。

球虫感染与鸡体内外各种因素的相互作用

本文旨在概述鸡与球虫的关系、鸡体内外各种因素的相互作用及其对球虫病的发生、发展及转归的影响。 1.鸡对球虫感染的临床表现由于各球虫虫种对鸡的致病力不同,所以鸡呈现不同的临床表现。就堆型艾美耳球虫(E.acervulina)而言,球虫病主要对鸡产生营养性影响,

鸡球虫耐药性的基础及实用研究

自从Chapman(1982)总结早期诱导球虫耐药性的实验室工作以来,在鸡群中已产生耐药性的药物有氟腺呤(Arprinocid),常山酮(Halofuginone)和莫能菌素(Monensin)。因此,普遍认为艾美耳球虫的获得耐药性是药物防制鸡球虫病失败的一个重要原因,各国研究人员也为之进行了大量研究。本文旨在综述鸡球虫耐药性的研究概况,引起同行的兴趣。

鸡球虫病的药物防治研究现状

鸡球虫病是一种分布很广的原虫病,它主要由艾美耳属的九种球虫所引起.在生产中,鸡球虫病不仅引起雏鸡大批死亡,更为严重的是会明显降低鸡的生产性能,造成重大的经济损失,尤其对集约化养鸡业更是如此.目前在养鸡业中,防治鸡球虫病的主要手段是使用抗球虫药,它对控制鸡球虫病的严重爆发和流行起了十分有效的效果,有人曾认为“鸡场使用抗球虫药进行球虫病预防是一种化学保险”.

抗球虫药对鸡球虫免疫影响的探讨

17组15日龄来航鸡,连续20天递增经口免疫接种一定量的卵囊,并同时饲喂有两种不同浓度的抗球虫药的饲料,49日龄时用大剂量卵囊(10万/羽)攻击。根据每克粪便卵囊数(O.P.G.)、盲肠病变评分和增重等指标,评定8种抗球虫药对鸡球虫免疫的影响。由两次结果可知:严重抑制免疫的有氯甲吡啶酚(250ppm)、丁氧喹啉(175ppm)、莫能菌素(150ppm)和盐霉素(120ppm)。轻度抑制免疫的有氨丙啉(250ppm)和尼卡巴嗪(250ppm)。各低剂量药物均对免疫无影响。

抗鸡球虫药配合用药的潜在毒性──致突变性

应用小鼠骨髓微核试验及骨髓细胞染色体畸变试验，研究抗球虫药配合用药对体细胞的致突变作用。各药物组小鼠的ＰＣＥ微核率及染色体畸变率与阴性对照（吐温）组及单一药物对照组均无显著差异（Ｐ＞０．０５），但极显著低于阳性对照（环磷酰胺）组（Ｐ＜０．０１）。结果表明，配合用药对体细胞无致突变作用；而且，微核及染色体畸变的发生率与药物剂量无依赖关系。

鸡球虫弱毒虫株的临床前应用

以不同剂量的柔嫩艾美耳球和巨型艾美耳球虫的弱毒虫株免疫7日龄雏鸡，测定虫株的最小有效免疫剂量、免疫力产生时间、免疫有效期及虫株的保存期。结果表明，柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫的弱毒虫株最小有效免疫剂量分别为500个卵囊／鸡和200个卵囊／鸡。免疫后一周即可产生坚强的免疫力，免疫有效期达8周以上。弱毒虫株在4℃环境中的有效保存期为7个月。

鸡球虫混合苗免疫程序优化及在集约化鸡场的应用

研究了不同免疫程序下鸡球虫混合苗的免疫效果。结果表明,饮水接种与混料接种所获得的免疫效果无明显差别。应用1次免疫和2次免疫程序的鸡肠道病变、肠道内容物卵囊密度和增重等指标均不如应用3次免疫和4次免疫程序的结果,而3次免疫和4次免疫程序均可使鸡获得理想的保护力,效果基本一致。因此,在临床上,采用3次免疫程序最为经济有效。应用优化程序,共在集约化鸡场免疫肉鸡267.858万羽,蛋鸡33.104万羽。抽查结果表明,免疫鸡群的平均发病率为0.4%,死亡率为0%。

数种抗球虫药配合用药的疗效测定

将15种抗球虫药按不同作用机制、不同试验目的及不同浓度配伍后,在海赛克斯鸡群中使用30余天.根据试验鸡的增重和盲肠病变评分指标,评定配合用药的疗效.结果显示:聚醚类抗生素与作用于球虫生活史后期的化学合成药配伍后,达到了抗球虫的增效作用和促进增重的目的,同时大大降低了用药剂量.

抗球虫药在鸡胚球虫感染中活性峰期测定方法的初探

引言据现有抗鸡球虫药研究的资料阐述,各种抗球虫药,均有在球虫生活史的特定时期发挥最大作用的活性峰期.因此,在研究开发新药时,用简便、经济的实验方法测定其活性峰期,具有重要的实用意义.国外一般应用体外细胞培养的方法测定抗球虫药的活性峰期,用鸡胚培养的方法测定抗球虫药的药效。而对于鸡胚感染球虫技术能否用于测定抗球虫药的活性峰期,尚不清楚.为此,本文选用鸡胚感染球虫子孢子作为实验模型,探讨了其用于测定抗球虫药活性峰期的可能性。

囊素和法氏囊超滤物对杂交瘤细胞抗体分泌的影响

以分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞为对象,通过间接ELISA法测定抗体的OD490值。结果表明,随着囊素和法氏囊超滤物浓度的增加,细胞抗体分泌逐渐增加,当囊素浓度为50μg/mL、超滤物浓度为2.5mg/mL时,OD490值达到最高,分别比对照组增加8.83％和5.72％（P<0.01）;随着浓度的继续增加,OD490值开始下降。同时观察到,处理48h后,500μg/mL囊素组和5mg/mL法氏囊超滤物组有部分细胞死亡,1000μg/mL囊素组及40,20,10mg/mL法氏囊超滤物组细胞全部死亡,其它组细胞正常。动态试验表明,加入50μg/mL囊素后3h,OD490值增加最高,达24.93％（P<0.01）。因此,囊素和法氏囊超滤物能直接与杂交瘤细胞作用,并提高其抗体分泌水平。

信号转导抑制剂对囊素刺激杂交瘤细胞抗体分泌及其mRNA表达的影响

以杂交瘤细胞为模型 ,在培养液中加入不同的信号转导抑制剂和囊素 ,用间接ELISA法测定抗体分泌水平 ,用定量RT PCR法检测抗体mRNA的表达水平。结果表明 ,加入Gα 蛋白选择性抑制剂NF 0 2 3、蛋白激酶C抑制剂GF10 92 0 3X、磷脂酰肌醇 3激酶抑制剂heparin、Ca2 + /calmodulin依赖蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN 6 2、磷脂酶C抑制剂U 7312 2和蛋白激酶G抑制剂后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响明显 (P <0 0 1)。而加入蛋白激酶A抑制剂 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、酪氨酸蛋白激酶抑制剂 genistein和丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响不明显 (P >0 0 5 ) ,这 3种抑制剂对杂交瘤细胞抗体分泌速度的抑制率分别为 74 5 5 % ,91 13%和80 6 9%。加入 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、genistein和PD 980 5 9后 ,囊素处理组与对照组γ1mRNA的表达水平差异不显著 (P >0 0 5 ) ,说明这 3种抑制剂阻断了囊素刺激的杂交瘤细胞抗体mRNA的表达。以上结果表明 ,蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶和丝裂原活化的蛋白激酶参与了囊素在杂交瘤细胞中的信号转导。

一株新城疫病毒新强毒株(NL)的分离鉴定及F基因序列测定

1996年 5月以来 ,我国各地鸡群暴发鸡新城疫 ,其发病特征是常规疫苗免疫无效。为研究此病毒的特征 ,对从华东某地分离的新城疫病毒毒株 (NL株 )进行了生物学研究。利用RT PCR技术扩增出NL株融合蛋白基因 (F基因 )全序列 ,并测序。结果表明 ,NL株平均致鸡胚死亡时间 (MDT)为 2 8 2h ,是目前所有公开报道的NDN毒株中致鸡胚死亡时间最短的 ,其尿囊液中病毒滴度可达 2 9,表明病毒繁殖速度快。F基因测序结果表明 ,NL株为一强毒株 ,与现今国外已发表的NDV株F基因同源性在 84%～ 91%之间。氨基酸同源性为 82 %～ 93%。紧靠裂解位点附近的氨基酸与其它NDV毒株均不相同。据此认为 ,该新城疫病毒是一个新型毒株。