天然胰脂肪酶抑制剂的虚拟筛选及活性验证

为了快速筛选安全有效的天然胰脂肪酶(pancreatic lipase,PL)抑制剂,作者采用分子对接、分光光度法、正交t值法及荧光猝灭试验等技术,通过研究胰脂肪酶的构象、活性、动力学和热力学来探究酶与抑制剂之间的相互作用。结果表明,在筛选出的31种化合物中有28种对PL的抑制率超过了50%,其中11种半数抑制质量浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50)低于100μg/mL,特别是(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和辅酶Q9(coenzyme Q9,CoQ9),其半数抑制质量浓度低于奥利司他。作者设计的复合配方包括了木犀草素、杨梅素、槲皮素、异槲皮苷和柚皮苷,当质量浓度为0.5 mg/mL,且各组分的体积比为7∶15∶6∶17∶5时,其抑制率达到了(98.79±2.46)%,效果优于单一组分。配方中的5种物质通过自发键合静态猝灭PL的固有荧光,与PL之间存在疏水相互作用、氢键、离子键及π-π堆积等非共价相互作用。该研究为胰脂肪酶抑制剂提供了多种候选物质。

甘油对红曲霉CG-6莫纳可林K合成及相关基因表达的影响

研究甘油对红曲霉CG-6莫纳可林K合成及相关基因表达的影响,采用高效液相色谱和荧光定量PCR法测定莫纳可林K产量及相关基因表达量的变化。结果表明:甘油浓度在0～12%时,随其浓度增加,胞内和胞外总莫纳可林K积累量呈先增加后减少趋势,甘油浓度为8%时,胞内和胞外总莫纳可林K积累量均达到最大,分别为9 474. 4、7 005.8μg/(g干菌重);甘油浓度为8%,随着培养时间延长,莫纳可林K合成相关基因mokA、mokD、mokE、mokG、mokH、mokI表达量较对照组逐渐升高,mokB、mokC表达量变化不大,mokF表达量逐渐下降;甘油浓度大于8%培养9 d时,mokB、mokC、mokD、mokE、mokF、mokG、mokH出现下调趋势。实验结果为研究甘油等碳源对红曲霉次级代谢产物合成及相关基因表达影响提供了参考。