组合乙肝标志物联合ALT对判断肝损害和HBV-DNA复制状态789例调查分析

目的调查789例乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性人群的肝损伤及外周血中乙型肝炎病毒复制情况。方法用统计学方法分析HBsAg阳性者789例,同时进行的乙肝标志物五项、ALT和HBV-DNA检验结果分布。结果HBsAg阳性者中ALT异常率为27.8%,而HBV-DNA复制率为49.3%。乙肝标志物组合间的ALT异常率和HBV-DNA复制率存在差异。HBeAg阳性且ALT异常时,HBV-DNA复制率达到93.1%。结论组合乙肝标志物配合ALT可较好地了解肝损伤和HBV-DNA复制情况,有助于判断病情。

乙型肝炎病毒复制阳性417例的ALT、乙肝标志物和HBV DNA临床分析

目的调查417例乙型肝炎病毒复制阳性患者的肝损伤、乙肝标志物(HBV Markers,HBVM)和外周血HBV DNA水平及抗病毒治疗适应证符合情况。方法对乙型肝炎病毒复制阳性的417例患者的ALT、乙肝标志物(5项)和HBV DNA进行定量分析。结果HBVDNA阳性者中,性别间ALT各组例数比例不同,但在ALT≥2ULN组,性别间ALT例数相同,而HBV DNA拷贝数差异有统计学意义。ALT各组的HBeAg阴、阳性分布无差异,ALT各组HBV DNA拷贝数随ALT升高而升高。乙肝标志物组的13、145、15组的抗病毒治疗适应证符合率是一致的,135组高于其他三组,且13、135组HBVDNA拷贝数无差异,高于其他两组。结论监测ALT、乙肝标志物和HBVDNA,有助于了解本地区HBV感染情况,节约医疗资源,及时治疗,延缓病程。

基于综合评价法的各种无量纲化方法的比较和优选——以兰州市永登县的土地开发为例

目前各种评价指标无量纲化的方法多种多样,而各种方法在无量纲化的处理上又有极大的不同,为了选择一种科学合理的无量纲化方法,就常见的各种指标无量纲化处理方法进行了整理和归类,并以兰州市永登县土地开发的相关基础数据为材料,进行分析和对比,以无量纲化方法所做的等级排序与合理等级排序的等级相关系数来进行无量纲化方法的优选,得出平均化和比重化的处理方法是比较科学合理的数据无量纲化的方法。

TPIN对HepG2肝癌细胞生物学特性的影响

目的研究重组减毒沙门菌菌株TPIN对HepG2细胞生物学性能的影响。方法 TPIN转染HepG2细胞36 h时收集细胞表达上清,MTT法检测表达产物对HepG2细胞生长的作用;Transwell迁移实验观察TPIN表达产物对HepG2细胞迁移的影响;将不同剂量表达产物分别加入甲基纤维素小碟,并将小碟小心放入鸡胚绒毛尿囊膜,37.8℃继续孵化3 d,观察IL-2/NK4表达产物体外对鸡胚绒膜尿囊膜血管的效应。结果 TPIN表达上清显著抑制HepG2细胞增殖的活性,且有一定剂量依赖效应;表达产物可明显抑制肿瘤细胞迁移,且明显抑制鸡胚绒膜尿囊膜血管形成。结论 TPIN在体外能高效转染肿瘤细胞,表达目的蛋白IL-2及NK4,且表达产物能够抑制HepG2细胞的增殖和迁移,对鸡胚绒膜尿囊膜血管的形成有抑制效应。

HSA-sTRAIL融合蛋白的表达质粒pPICZαA-HSA-sTRAIL的构建

目的:构建pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。方法:用PCR方法扩增sTRAIL基因,然后克隆入pPICZαA载体,构建pPICZαA-sTRAIL质粒,然后将HSA基因克隆入pPICZαA-sTRAIL质粒,构建pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。重组子均进行酶切鉴定和PCR鉴定,最后进行DNA测序验证。结果:PCR方法克隆出目的基因,并成功构建了pPICZαA-HSA-sTRAIL质粒。酶切鉴定、PCR鉴定和DNA测序均证明构建的表达质粒完全与预期一致。结论:成功构建了pPICZαA-HSA-sTRAIL真核表达质粒。

β-连环蛋白在人毛囊发育形成中的表达

目的 :研究 β -连环蛋白 ( β -catenin)在人毛囊从胚胎到成熟发育过程中的表达及意义。 方法 :采用SP免疫组化技术(IHC)对不同胚胎龄及成年期的正常人头皮标本进行染色 ,分析比较不同时期毛囊 β -catenin表达及其差异。 结果 :β -catenin蛋白的表达与毛囊发育的不同阶段具有相关性 ,早期形成的毛芽中未见 β -catenin表达 ,而胚胎毛囊发育后期的外根鞘及膨突区中出现β -catenin表达 ,在成人发育成熟的毛囊中 ,β -catenin表达明显增强 ,阳性细胞集中于毛囊外根鞘内侧。结论 :β -catenin在毛囊不同发育阶段表达与分布的差异 ,提示 β

血清TSGF检测对于肺癌诊断的临床应用评价

目的:评价肿瘤特异生长因子(TSGF)在肺癌诊断中的临床应用价值。方法:测定92例肺癌和63例肺部感染患者、41例肺结核及256例正常人的血清TSGF水平。结果:①肺癌患者血清TSGF水平高于健康对照组(P<0.01)。TSGF诊断肺癌的敏感性为78.3%,特异性为98.0%;②肺部感染患者TSGF水平高于健康人(P<0.01),其假阳性率可达到65.1%,而与肺癌组则无明显差异(P>0.05);③肺结核患者血清TSGF水平与正常对照组无显著差异(P>0.05);④肺部感染患者经抗感染治疗后,血清TSGF下降至正常水平,与正常对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论:肺癌患者血清TSGF水平明显增高,在排除炎症后,可作为肺癌辅助诊断的良好指标。

人源抗破伤风毒素单链二硫键稳定抗体的重组设计与表达

目的构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并进行原核表达和生物学特性鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,获得二硫键稳定的抗破伤风毒素重链C端(TeNT-Hc)单链抗体基因(27G-scdsFv)。连接pET22b(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE、Western blot法鉴定表达产物。ELISA检测27G-scdsFv体外抗原特异结合活性和抗体相对稳定性;非竞争酶免法检测抗体亲和力。采用免疫荧光法检测27G-scdsFv体外中和活性。结果测序结果显示获得正确的27G-scdsFv基因。原核表达scdsFv以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的50%。复性后的27G-scdsFv保持了与TeNT-Hc的特异结合活性,亲和力较其scFv形式略有提升,KD=0.93×10-7mol/L,1 L培养物可获得5 mg scdsFv蛋白。27G-scdsFv的稳定性较scFv形式明显增强。27G-scdsFv在体外可以明显抑制TeNT-Hc与神经元细胞的结合。结论成功构建人源抗破伤风毒素重链C端单链二硫键稳定抗体原核表达载体,并获得有活性的目的蛋白,为27G-scdsFv的进一步生物学功能研究奠定基础。

辛基酚影响MCF-7细胞凋亡及bcl_2、caspase3表达

目的观察辛基酚(OP)对乳腺癌MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。方法以流式细胞分析、DNA断端末端标记(TUNEL)试验、DNA片断率分析、流式细胞仪免疫荧光和荧光定量PCR等方法观察OP对MCF-7细胞凋亡、bcl2、bax、caspase3表达的影响。结果8、16μmol/LOP作用MCF-7细胞,TUNEL细胞阳性率和DNA片断百分率增加,48h时的凋亡率分别为(6.6±1.32),(16.3±3.48)[对照(4.3±1.18)];bcl2荧光量分别为(63.5±5.84),(30.3±2.49)[对照(57.2±4.07)]。4μmol/LOP明显上调MCF-7细胞中bcl2 mRNA表达;16μmol/LOP则明显降低细胞中bcl2 mRNA表达,且bax、caspase3 mRNA表达明显增加。结论8、16μmol/LOP能明显诱导MCF-7乳腺癌细胞的凋亡,增加DNA片断百分率,其机制可能是通过下调细胞中bcl2的表达、上调bax、caspase3的表达来实现。

植物雌激素对MCF-7乳腺癌细胞DNA损伤的影响

目的:观察植物雌激素三羟异黄酮(Gen)、二羟异黄酮(Dai)、五羟黄酮(Que)和姜黄素(Cur)对MCF-7乳腺癌细胞增殖和DNA损伤的影响。方法:以3、9、27、54μmol/L的植物雌激素与MCF-7细胞共培养24、48或72h,用四唑盐(MTT)试验和单细胞凝胶电泳(SCGE)观察环境雌激素影响细胞增殖和DNA损伤程度。结果:Que和3μmol/L的Gen、Dai、Cur使MCF-7细胞增殖明显增加,但54μmol/L的Gen、Cur却明显抑制细胞的增殖。27、54μmol/L的Gen和Cur使DNA分子迁移长度(CTL)明显增加,且呈剂量-效应和时间-效应关系。Dai、Que对细胞中DNA分子迁移长度无影响。结论:27μmol/L和54μmol/L的Gen和Cur引起MCF-7细胞中DNA分子损伤,抑制细胞增殖。Que和Dai对细胞中DNA分子无损伤,Que和低浓度的Dai促进细胞增殖。

辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞周期及周期蛋白表达的影响

目的观察辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞周期及周期蛋白表达的影响。方法以MTT试验、流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞增殖、细胞周期相和细胞凋亡、CDK2和CDK4 mRNA表达、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达的影响。结果4、8、16μmol/LOP作用MCF-7乳腺癌细胞72h时,细胞增殖率分别为107.31%、168.06%、62.00%,G0/G1期细胞分别为(52.46±6.67)%、(50.19±7.39)%、(67.31±5.47)%,对照组(55.27±7.53)%,细胞凋亡率分别为(4.84±1.12)%、(6.48±1.36)%、(19.26±3.57)%,对照组(5.56±1.125)%,16μmol/LOP减少了细胞中CDK2、CDK4、Cyclin D1 mRNA及Cyclin D1的表达。结论4、8μmol/LOP促进MCF-7乳腺癌细胞增殖,16μmol/LOP则抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,这可能与OP影响细胞中CDK2、CDK4、Cyc-lin D1 mRNA及Cyclin D1表达有关。

TSGF与AFP对原发性肝癌的诊断特异性、灵敏度分析

分析探讨TSGF与AFP检测在原发性肝癌诊断中的特异性和灵敏度,以及对原发性肝癌的早期诊断价值.采用分光光度法检测TSGF,包括87例原发性肝癌(男性54例、女性33例、平均年龄67岁)、67例继发性肝癌(男性42例、女性25例、平均年龄63岁),同时用化学发光法检测AFP.对照检测179例肝病患者的TSGF、AFP(肝硬化患者74例、慢性乙型肝炎105例).其结果TSGF对原发性肝癌的敏感性(86.2%)高于AFP(71.4%)有显著性差异(P<0.05);TSGF对继发性肝癌的敏感性(88.1%)高于AFP(35.8%)有显著性差异(P<0.05);二者联合检测敏感性提高至94.3%.由此证明TSGF对恶性肿瘤的检测兼有早期性和广谱性,对原发性肝癌其灵敏度高于AFP,特异性低于AFP.二者联合检测显著提高对原发性肝癌诊断的特异性和灵敏度,对原发性肝癌早期诊断有重要的参考价值.

急性冠脉综合征患者血浆肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性测定意义

目的:通过测定急性冠脉综合征(ACS)患者血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)水平,探讨其在ACS发生发展过程中的意义及对预后的影响。方法:采用放射免疫法分别检测22例不稳定性心绞痛(UA)、18例非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)及28例ST段抬高型心肌梗死患者(STEMI)、11例健康者的血浆PRA、AngⅡ、Ald浓度,记录4周内所有患者的病情转归情况。结果:UA、NSTEMI、STEMI三组PRA、AngⅡ、Ald水平均明显高于健康对照组(P<0.05),组间相互比较均有统计学差异(P<0.05)。结论:肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性水平与ACS的发生发展有关,并且与病情的严重程度呈正相关,对预后有重要的预测价值。

检验危急值快速报告方式的研究

目的:快捷、准确地获取检验危急值结果。方法:制定实验室信息系统(laboratory information system,LIS)报告和双通道报告(即LIS和电话同时报告)检验危急值的标准、流程并进行监管。采用χ2检验、Pearson相关系数、数据差Shapiro-Wilk检验及秩和检验法对LIS报告和双通道报告结果获取时间、回复率进行比较。结果:与LIS报告相比,双通道报告13 min即可完成检验危急值由检验科发出,经护士工作站再到医生无误获取结果的过程,比LIS报告时间显著缩短(P<0.05);双通道报告护士回复率及医生回复率也显著增高(P<0.000 01)。结论:双通道报告检验危急值回复时间、回复率都优于LIS报告检验危急值,缩短了报告时限,提高了报告准确性。

143例系统性红斑狼疮的自身抗体和常规检查分析

系统性红斑狼疮（SLE）是一种常见的自身免疫性疾病．研究探讨自身抗体及常规实验室检查对SLE的诊断及临床意义．间接免疫荧光法检测ANA抗体和抗ds-DNA抗体，斑点法检测抗ENA抗体，透射比浊法检测免疫蛋白，生化检查方法按试剂说明．143例SLE患者中，女性121例，ANA、dS-DNA、SS-A、n-RNP／Sm、Sm、SS-B阳性率分别为97．6％、57．8％、52．4％、48．9％、21．5％、11．7％，未检出Scl-70和Jo-1抗体．SLE患者血清抗ds-DNA抗体与抗Sm阳性有显著差别（P〈0．05）．在143例SLE患者中，IgG（35．66％）、IgA（36．36％）、RF（29．37％）升高，C3（85．3％）、C4（68．5％）降低．常规检查中，血红蛋白量（71．33％）、血钾（34．27％）、ALB（89．51％）降低，尿潜血和尿蛋白阳性率分别为28．67％和41．96％，ESR（83．22％）加快，肝功酶谱（30％-40％）升高．自身抗体检测结合常规检查有利于SLE的诊断和治疗．

角质生长因子、缺氧诱导因子修饰的骨髓间充质干细胞对大鼠脊髓损伤修复的影响

目的探讨角质生长因子(KGF)与缺氧诱导因子(HIF)修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法全骨髓贴壁法分离培养骨髓MSCs;携带重组KGF和HIF-1基因的腺病毒感染修饰MSCs,自由落体法制备大鼠SCI模型,分为MSCs组、KGF-MSCs组、HIF-1-MSCs组及KGF/HIF-MSCs组,分别于损伤部位移植无修饰、KGF因子修饰、HIF-1因子修饰及KGF/HIF双修饰的骨髓MSCs,应用联合行为学评分评价大鼠运动能力恢复情况,观察脊髓组织病理学变化及神经细胞修复情况,并测定SRY及腺病毒基因Adeno的表达水平。结果KGF-MSCs、HIF-1-MSCs及HIF-MSCs组联合行为学评分均高于MSCs组,且KGF/HIF-MSCs组效果最明显(P<0.05)。4组大鼠脊髓组织中细胞数目增加,神经细胞坏死减少,均高表达SRY及Adeno基因。结论细胞因子KGF、HIF可增强骨髓MSCs移植后SCI修复作用。

血清CGA、NT-proBNP、Hs-CRP水平与冠心病的相关性研究

目的探讨血清嗜铬粒蛋白(CGA)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、高敏C-反应蛋白(Hs-CRP)水平与冠心病的相关性。方法选取2011年11月-2012年11月间于我院接受检查和治疗的冠心病患者64例作为观察组;选取排除了冠心病的64例患者作为对照组。检测两组患者的血清CGA、NT-proBNP、Hs-CRP水平,分析其与冠心病发病的相关性。结果观察组患者血清的CGA、NT-proBNP、Hs-CRP水平及Gensini评分均明显高于对照组(P<0.05)。观察组患者血清CGA水平与Gensini评分呈正相关(r=0.313,P<0.05);观察组患者血清NT-proBNP水平与Gensini评分呈正相关(r=0.269,P<0.05);观察组患者血清Hs-CRP水平与Gensini评分呈正相关(r=0.587,P<0.05)。血清CGA、NT-proBNP、Hs-CRP三者联合检测的诊断阳性例数与单独检测的诊断阳性例数比较有统计学差异(P<0.05)。结论血清CGA、NT-proBNP、Hs-CRP水平与冠心病密切相关,作为冠心病发病的检测指标三者均具有很高的预测价值。

辛基酚对MDA-MB-231细胞中bcl2和caspase3表达的影响

目的:观察辛基酚(OP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响。方法:以流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察OP对MDA-MB-231细胞凋亡、bcl2、bax和caspase3表达的影响。结果:4μmol/L、8μmol/L-OP作用MDA-MB-231细胞48 h,其凋亡率分别为26.93±6.76、42.48±8.21(对照4.05±1.14);bcl2表达量荧光值分别为78.05±9.47、42.74±6.49(对照103.12±11.26)。OP降低细胞中bcl2 mRNA表达,增加caspase3 mRNA及其蛋白的表达。结论:OP能诱导MDA-MB-231细胞凋亡,其机制可能是通过上调细胞中caspase3的表达,下调bcl2的表达来诱导细胞凋亡。