产氢菌AUH-BG208的分离鉴定与产氢特性

从白冠长尾雉粪样中分离出一株产氢量高的细菌菌株,命名为AUH-BG208。通过革兰氏染色和耐氧性测定,菌株AUH-BG208为革兰氏阴性兼性厌氧菌株。菌株AUH-BG208形态学及生理生化特征与克雷伯氏属一致,通过菌株16S rDNA序列分析,发现该菌株与肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae(AJ233420)相似性为100%。此外,对菌株AUH-BG208在不同条件下的产氢特性进行了测定。结果表明:该菌株在起始pH值为7.0,葡萄糖浓度为40 g/L,以酵母粉和硝酸钾为氮源时产氢能力最强,产氢量为1 900 mL/L。

不同抗生素对ICR小鼠肠道微生物体外转化黄豆苷原的影响

目的:探讨不同抗生素对ICR小鼠肠道微生物菌群体外转化黄豆苷原为雌马酚的影响,确定敏感抗生素抑制雌马酚合成的临界点浓度.方法:取ICR小鼠新鲜粪样于BHI液体培养基中,加入底物黄豆苷原,同时加入正常成人剂量的抗生素在厌氧工作站中培养3d,采用高效液相色谱检测黄豆苷原被转化情况.根据转化结果依次降低所挑选的敏感抗生素浓度,确定各种不同抗生素抑制ICR小鼠肠道微生物菌群转化黄豆苷原为雌马酚的临界点浓度.结果:当使用正常成人剂量时,11种供试抗生素均完全抑制ICR小鼠肠道微生物菌群体外转化黄豆苷原为雌马酚能力;当加入正常成人剂量1/32浓度时,阿莫西林(amoxicillin,AMX)、氧氟沙星(ofloxacin,OFLX)、诺氟沙星(norfloxacin,NOR)几乎不产生抑制作用,多西环素(doxycycline,DOX)、利君沙(erythromycin ethylsuccinate,EES)和头孢拉定(cefradine,CED)使培养基中雌马酚浓度降低了87.7%,80.5%和65.2%,其余5种抗生素阿奇霉素(azythromycin,AZI)、吉他霉素(leucomycin,LM)、土霉素(oxytetracycline,OTC)、利福平(rifampicin,RFP)和甲硝唑(metronidazole,MNZ),则完全抑制黄豆苷原向雌马酚的转化;当使用剂量为正常成人剂量1/256时,AZI、RFP和MNZ完全抑制了ICR小鼠肠道微生物菌群体外转化能力,继续降低抗生素浓度,测得AZI、RFP和MNZ有效抑制黄豆苷原转化为雌马酚的临界点浓度分别为1/512,1/800和1/1024.结论:不同种类抗生素对ICR小鼠肠道微生物菌群中大豆异黄酮转化菌株的抑制作用不同,11种抗生素中抑制作用最小的是AMX、OFLX和NOR;抑制作用最强的是MNZ,其次为RFP和AZI.

肠道肠球菌AUH-HM195原生质体制备与再生条件初探

应用正交试验研究菌龄、酶浓度、酶解时间和渗透压稳定剂种类对肠道肠球菌(Enterococcus hirae)AUH-HM195原生质体制备与再生的影响。结果表明:菌龄与酶浓度的交互作用对原生质体的制备和再生影响最大。最优组合为:菌龄6 h,溶菌酶浓度5 mg/mL,酶解时间1 h,渗透压稳定剂在制备时使用0.7 mol/L KCl,再生时使用17%蔗糖,制备率为93.2%,再生率为14.5%。

不同动物肠道优势需氧菌对黄豆苷原转化菌株转化能力的影响

【目的】探讨不同动物肠道优势需氧菌对黄豆苷原转化菌株转化能力的影响。【方法】有氧条件下,采用稀释涂布法分别从ICR小鼠、芦花鸡、长白猪和獭兔等4种健康动物肠道中分离优势需氧菌,将不同动物的优势需氧菌分别与不同类型黄豆苷原转化菌株进行厌氧混合培养,高效液相色谱检测培养液中黄豆苷原的转化情况。【结果】16S rRNA基因序列分析,结合形态学及相关理化特性分析表明,分离的22株优势需氧菌分属埃希氏菌属(10株)、变形菌属(5株)、肠球菌属(4株)、芽胞杆菌属(2株)和假单胞菌属(1株)五个属。混菌培养结果显示,兔源蜡样芽胞杆菌(R1)和铜绿假单胞菌(R5)与转化菌株混合并连续转接2-3次后,转化菌株的转化活性完全丧失,而其它用于混合培养的肠道优势需氧菌对转化菌株转化能力均无明显影响。菌株R1和R5分别与30只ICR小鼠肠道菌群在人工模拟肠道营养液中混合并连续5次转接培养后,约90%的ICR小鼠肠道菌群完全丧失将黄豆苷原转化为雌马酚的能力。【结论】不同动物肠道优势需氧菌对黄豆苷原转化菌株转化能力有不同影响,兔源蜡样芽胞杆菌R1和铜绿假单胞菌R5对转化菌株的转化能力有明显抑制作用。