苹果金属硫蛋白基因MdFjMT2克隆及生物信息学分析

以红富士苹果(Malus domesticaCV Red Fuji)浓红型芽变和其条红母株为试材,构建抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)文库,差异筛选SSH-cDNA文库,经过大量测序构建成红富士苹果EST序列本地数据库,对本地数据库进行Blastn检索,得到42条金属硫蛋白基因MdFjMT2的cDNA片段,通过序列拼接和逆转录PCR(RT-PCR)方法,获得了红富士苹果金属硫蛋白基因MdFjMT2全长cDNA序列(Gen-bank登录号为HQ730757),该基因全长684bp,其中5′非翻译区97bp,3′非翻译区347bp,编码区(Coding sequence,CDS)为240bp,编码79个氨基酸,推测蛋白分子量为7.7938kDa,理论等电点为4.75。该基因具有金属硫蛋白基因的典型结构域特征,编码的氨基酸序列中含有14个半胱氨酸残基Cys(C),Cys残基的排列特征是以CC、CXC和CXXC集中分布在肽链的N端和C端。系统进化分析表明MdFjMT2与砂梨(Pyrus pyrifo-lia)、苹果(Malus domestica)和小金海棠(M.xiaojinensis)等植物金属硫蛋白具有较近的亲缘关系,与扁桃(Prunus dulcis)、旱柳(Salixmatsudana)、美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)等植物的亲缘关系较远。生物信息学分析结果表明,MdFjMT2主要位于叶绿体中,没有信号肽,是非跨膜亲水性蛋白,其蛋白质二级结构的主要元件是无规则卷曲,没有功能结构域。这些结果为Md-FjMT2的结构与功能挖掘提供一定的参考。本研究结果有助于研究该基因在苹果着色中的作用,阐明苹果着色的分子机制。

一株抗铜根瘤菌的分离鉴定及其16S rDNA序列分析

为了发挥微生物和植物在重金属矿尾区铜污染土壤的共同修复作用,本研究从陕西省凤县矿尾区天蓝苜蓿根瘤中筛选分离到一株抗重金属铜的菌株,定名为CCNWSX0020。该菌株在YMA琼脂平板上抗铜浓度为3.0mmol/L,TY液体培养基中抗铜浓度为1.4 mmol/L,因此,它是研究根瘤菌抗铜机制的良好菌株。该菌株经生理生化分析、G+C mol%测定、DNA同源性分析及16S rDNA序列相似性比较,鉴定为苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium melilo-ti),它与苜蓿中华根瘤菌LMG6133的菌株(GenBank登录号为X67222)相似性为99.7%。由于根瘤菌具有独特的生物学地位,即能够与豆科植物形成共生体,这为进一步构建耐重金属的生物体系提供了良好的遗传基础,具有潜在的生态效益和社会效益。

黄河三角洲不同果园土壤理化状况及其对葡萄生长发育的影响

以葡萄品种“巨峰”为试材，研究黄河三角洲不同果园土壤盐分、pH值和养分等状况及其对葡萄生长发育的影响。结果表明，该地土壤含盐量与电导率有显著相关性。平地和台田果园不同深度土层的土壤含盐量和养分存在差异，表层土壤（0～20 cm）对盐分具有积聚作用，并呈现季节性变化。与平地果园相比，台田果园各层土壤容重相对较低，脱水后其最大值出现时间较迟，且增加幅度不同；土壤紧实度显著低于平地果园，但在水平方向连续性不强；pH值和氮磷钾等养分状况优于平地果园。在对葡萄树体生长发育和果实品质的影响方面，平地果园葡萄明显表现生长势偏弱，果实发育不良。

宁南霉素(16A-6)性质的初步鉴定

应用纸层析、抑菌性试验、紫外光谱法等,对分离纯化后的宁南霉素进行性质鉴定,为其基础研究和应用提供一定的理论依据。

遗传学网络课程平台的建设与实践

随着网络技术的发展,教学手段和教学方法日益丰富。在传统的教学基础上,网络技术为教学过程搭建了新的平台,网络教学平台的建设和有效利用直接影响教学效果。应用网络平台进行遗传学教学,不仅提高教学效率,而且也便于学生自主和延展性学习。经多年实践与探索表明,网络教学是遗传学教学有效的辅助手段之一,具有传统教学无法比拟的优势,它实现了"教与学"信息的电子化和网络化,强化了教学资源的共享,促进了师生互动。该文就遗传学网络教学平台的设计原则、内容框架和应用维护等进行了探讨,为遗传学理论教学的创新模式探索提供了新的思路。

农业院校“遗传学”实验教学体系的构建与优化

"遗传学"实验是生物类专业学生知识结构体系的重要组成部分,在人才培养中占有极其重要的地位。在教学过程中,"遗传学"实验能验证遗传规律,加深对遗传基本理论的理解,帮助学生快速掌握相关实验技术,养成独立分析、解决问题的能力和严谨的科学态度。以培养学生创新意识和创新能力为导向的新一轮实验教学改革对"遗传学"的实验教学提出了更高的要求。因此,构建和优化实验教学体系是"遗传学"教学改革的重要组成部分,在具体实施时应重点从实验内容、教学手段、教学方法和实验平台等方面进行全面改革。

无纺布果袋(PP果袋)对红地球和玫瑰香葡萄果实品质的影响

以红地球和玫瑰香葡萄品种为试材,以小林果袋株式会社生产的葡萄专用纸袋(本文称XL果袋)作对照,研究自主研制的聚丙烯(PP)无纺布果袋(简称PP果袋)对葡萄果实外观品质和内在品质的影响。结果表明,PP果袋可以有效地改善葡萄果穗生长的微域环境,PP果袋内部温度和湿度的变化与XL纸袋相比较温和,极端温度与湿度持续时间短,平均分别为对照的22%到45%。同时PP果袋对自然光的透过率较对照高20%。田间试验表明,PP果袋显著提高了葡萄浆果的可溶性固形物、花青苷、维生素C等的含量(P<0.05),同比增长约20%;显著改善了葡萄的综合鲜食品质(P<0.05),品尝总评指数高于对照约15%;显著提高了葡萄果实果面亮度和着色程度(P<0.05);显著降低了葡萄水罐、日烧、炭疽、白腐等病害的发生(P<0.05),同比降低40%左右。认为与纸袋相比PP果袋因优良的防水透气透光性能可以明显提高葡萄浆果的综合品质。

重组CP多克隆抗体在马铃薯卷叶病毒DAS-ELISA检测中的应用

先经过饱和硫酸铵沉淀分离,再用Protein G亲和层析柱纯化,从马铃薯卷叶病毒(PLRV)重组CP作抗原制备的抗血清中获得了高纯度多克隆抗体(IgG),并用戊二醛法一步法进行碱性磷酸酶的标记获得了酶标抗体(IgG-AP)。将纯化的抗体与酶标抗体用于感染PLRV病叶的检测,DAS-ELISA反应呈阳性,结果表明,用重组CP制备的多克隆抗体可成功地用于PLRV的DAS-ELISA检测。本研究为PLRV重组CP多克隆抗体的大量制备及ELISA检测奠定了基础。

外源水杨酸处理对贮藏期桃果实褐变的影响

以中华寿桃果实为试材,研究在(1±0.5)℃、相对湿度(90±5)%冷藏条件下不同浓度水杨酸(SA)处理(1.25,2.50,5.00 mmol/L)对桃果实褐变的影响。试验分别测定了与褐变有关的果肉色泽、果实硬度、PPO和LOX活性、H2O2、·O2-、MDA和褐变指数及其值的变化。试验结果表明,SA能一定程度维持中华寿桃果肉色泽,减缓果实硬度下降速度,能降低果实中PPO和LOX活性。在活性氧代谢方面,SA能降低果肉组织中·O2-含量水平,提高贮藏前期果实组织中H2O2含量,维持活性氧较高代谢平衡。SA能够减轻MDA对细胞膜的伤害,维持细胞膜稳定性。与对照相比,水杨酸能显著降低果实褐变指数,抑制果肉褐变,但在对果实褐变指数的影响方面,水杨酸处理各水平间无极显著差异。

“果树栽培学”理论教学改革实践与探索

"果树栽培学"是农业院校园艺专业一门重要的专业课程,其理论教学应结合生产实际,优化课程内容,创新教学手段,多元化设计教学方法,改革教学效果评价体系,提升教师教学水平以及加强实践教学基地建设,以培养宽口径、厚基础的专业技术人才。

不同采收期对中华寿桃贮藏生理和品质的影响

以中华寿桃果实为试材,在(1±0.5)℃、相对湿度(90±5)%条件下对4个不同成熟度果实贮藏7周,通过对果实硬度、可溶性固形物、可滴定酸、乙烯生成速率、呼吸速率、细胞膜透性、褐变度等生理指标研究和果实感官品质评价,以确定适于低温冷藏的中华寿桃最佳采收期。结果表明:不同采收期对果实硬度、可溶性固形物含量和可滴定酸的保持,呼吸速率、乙烯释放及果实褐变度等方面的影响具有明显的差异,10月25日采收的果实贮藏效果明显优于其它处理。贮藏后期果实品质感官评价结果表明,低温冷藏条件下不同采收期对中华寿桃果实品质的影响依次是10月25日>10月20日>10月30日>10月15日。

拮抗胡萝卜软腐欧文氏杆菌的放线菌的分离和筛选

采用平板稀释法进行了土壤中放线菌的分离,以胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovora var. carotovora)为拮抗对象,筛选拮抗放线菌。根据抑菌圈的大小,初步筛选出F10、F4、F5、F11等有较强的拮抗作用的12株放线菌。分别对这12个菌株进行发酵,根据发酵液和菌丝破碎稀释液的拮抗活性复筛。复筛结果表明,12个菌株中,发酵液的拮抗活性F11最强,F1、F9次之;菌丝体破碎稀释液的拮抗活性F12最强,F3、F11、F1、F10次之。不同菌株产生的拮抗物质在细胞内外的分布不同。

水稻秧苗抗立枯病性与主要生化指标的相关分析

通过水稻秧苗体内各主要生化特性指标与发病率及反映秧苗素质的各主要形态指标的相关分析,结果表明接种12h后,秧苗体内SOD、POD、PPO、PAL活性与发病率呈显著负相关,与各形态指标呈显著正相关;而可溶性蛋白含量则与发病率呈显著正相关,与各形态指标呈显著负相关。进一步用逐步回归统计方法建立一个三元线性回归式,表明SOD、POD与PAL是决定秧苗抗病性的最主要因素,为可能成为水稻抗病育种的生化指标提供依据。

红肉桃果实总RNA提取方法的研究

以红肉桃果实为材料,采用Unizol总RNA提取试剂盒、CTAB法、冷酚法和改良SDS法4种方法分别提取果皮和果肉中总RNA,以期获得提取红肉桃果肉中总RNA的最适方法。比较,发现改良后的SDS法更适合于红肉桃果实总RNA的提取。此方法所得RNA完整性好,纯度和浓度均较高,可用于RT-PCR分析研究及后续实验。

马铃薯卷叶病毒缺失突变CP基因酿酒酵母表达载体的构建

以重组质粒pBAD-LRCP-126为模板,经PCR扩增获得了PLRV缺失突变CP基因的特异性条带。目的片段与pYES2.1/V5-His/-TOPO的连接产物转化大肠杆菌TOP10F′获得了氨苄青霉素抗性菌落,酶切与DNA测序结果确认了酵母表达载体的正确性,该表达载体命名为pYES-LRCP-126。在30℃,酿酒酵母工程菌株INVSc1(pYES-LRCP-126)经2%半乳糖诱导培养16h,SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条23kDa的诱导表达的蛋白条带,其大小与预期的重组CP大小相符,表明PLRV缺失突变基因在酵母菌中实现了表达。

青岛百合高效离体快速繁殖体系的建立

以青岛百合及麝香百合的鳞片和茎尖为试验材料,研究了外植体的放置方式、鳞片的不同部位、不同的激素浓度及活性炭对百合再分化的影响,成功建立了青岛百合的高频再生体系。结果表明两种百合的最佳外植体部位为中层鳞片的基部,放置方式为凸面接触培养基,青岛百合的最适再生培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,麝香百合的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,两种百合的最高再生率均达到100%。

葡萄砧木的应用及其研究进展

葡萄砧木品种类型多样,抗性各异,在生产中起着重要的作用,对接穗品种的生长发育和浆果品质产生重要影响;葡萄砧木的嫁接效应也与砧木类型、接穗品种、立地条件、土壤和肥水管理措施有关。本文根据近年来国内外葡萄砧木的研究成果,介绍了葡萄砧木的主要种类品种,并对葡萄砧木的抗性研究方法和砧木选择性应用做了简要的综述;进一步概述了葡萄砧木对接穗生长发育、产量和果实品质的影响;各地需根据土壤和气候等特点因地制宜地进行葡萄砧木品种区域化研究与应用,以促进我国葡萄产业的健康和可持续性发展。

果树栽培学实践技能培养方法与实施技巧

根据果树栽培学课程实践性极强的特点和发展趋势,对专业人才实践技能培养模式进行了探讨,提出了切实可行的培养方法与实施技巧,为实施有效教学、提高教学水平、提高学生创新精神和实践能力提供参考。

无纺布果袋对‘寒露蜜’桃品质的影响

研究了应用新开发的防水透气的无纺布果袋对‘寒露蜜’桃果实品质的影响。结果表明,黑色无纺布果袋与目前生产上使用的优质纸质果袋相比,能显著提高果实品质,单果重高出11%,维生素C含量高出56.5%,果实硬度增加9.3%,可溶性固形物含量增加4.75个百分点,可滴定酸含量增加0.08个百分点,品尝总评指数高38.4%。

新教育形势下实验教学改革的思考

我国教育的重点是培养学生的创新精神和实践能力 ,实验教学作为学生获取知识的重要方式之一 ,应围绕教育重点 ,从教学理念的转变、实验教学目的和内容的转变、实验教学方法和手段的转变、实验教学考核方法的转变着手进行改革。