一种印加果籽油组合物改善皮肤屏障功效研究

为了探究印加果籽油、神经酰胺和角鲨烷的组合物在皮肤屏障修复和保湿方面的作用,采用重组人表皮模型,通过测量跨膜电阻、测定皮肤屏障与保湿相关基因和蛋白的表达,评价组合物对皮肤屏障功能的改善和保湿效果。跨膜电阻试验结果显示,印加果籽油、神经酰胺和角鲨烷的组合物相较单独组分和双成分组合能够显著提升跨膜电阻(TER)值;相关基因和蛋白试验结果显示,组合物显著提高丝聚蛋白(FLG)、角蛋白10(K10)、转谷氨酰胺酶(TGM)和紧密连接蛋白(CLD)的mRNA和FLG蛋白的表达,显著提升水通道蛋白3(AQP3)的mRNA表达水平,优于单独组分和双成分组合。所以,印加果籽油、神经酰胺与角鲨烷的组合物具有改善皮肤屏障和保湿的效果。

驴腿肉与其他畜腿肉挥发性风味物质差异研究

利用气相电子鼻和气相色谱-质谱联用分析仪等对4种畜腿肉挥发性风味物质进行定性和定量检测,并通过气相色谱分析仪进行脂肪酸组成测定。气相电子鼻结果表明驴腿肉与猪腿肉风味差异最小,与牛腿肉差异最大。GC-MS共检出76种挥发性物质,以醛类为主,驴、猪、牛、羊腿肉中醛类占比分别为70.71%,75.36%,48.76%,55.94%,其中具有清香和青草气味的正己醛含量最高,贡献风味比例依次为29.89%,20.46%,12.74%,10.78%。驴、猪、牛、羊腿肉中的主要饱和脂肪酸总含量依次为30.01%,39.05%,36.34%,48.42%;不饱和脂肪酸总量依次为63.19%,57.10%,49.03%,43.71%。综上,影响驴腿肉风味特征的主要化合物为正己醛,其来源于亚油酸的氧化分解。

驴乳粉蛋白的特性、结构与组成分析

采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、圆二色谱和基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱法研究德州驴乳粉蛋白质的性质、结构和组成,为德州驴乳的深层次开发提供依据。结果表明,驴乳粉蛋白质量分数为16.10%,等电点均匀分布在4.5~6.5之间,分子质量主要集中在10~20 kDa和53~78 kDa的乳清蛋白区域,以及28~36 kDa酪蛋白区域。通过与马科蛋白图库进行对比,检索出386种可识别的蛋白,其中有139种蛋白首次在驴乳中发现,为揭示驴乳的生理功效提供理论基础。

阿胶对皮肤屏障损伤的修复作用

探讨阿胶在皮肤屏障损伤方面的作用。通过八肽胆囊收缩素(CCK-8)法测定细胞存活率,酶联免疫吸附检测方法(ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白和IL-1α含量水平,划痕法测定细胞迁移率,采用四唑盐比色法(MTT)法测定屏障指数(ET_(50)),评价阿胶在皮肤屏障损伤修复方面的作用。结果表明,1%以下浓度的阿胶对成纤维细胞无毒性作用,且可显著促进成纤维细胞增殖。阿胶能够显著促进成纤维细胞的迁移和I型胶原蛋白的表达。5%阿胶能够显著修复受损皮肤屏障、抑制IL-1α的表达,效果与地塞米松类似。阿胶能够有效修复和缓解十二烷基硫酸钠造成的皮肤屏障损伤和刺激。

驴乳粉修复皮肤屏障作用研究及安全性评价

初步探讨驴乳粉在皮肤屏障修复方面的作用与安全性。以驴乳粉为研究对象,通过细胞毒性试验、鸡胚绒毛尿囊膜试验、3D皮肤模型等评估驴乳粉的安全性与皮肤屏障修复效果。结果显示,10%以下浓度的驴乳粉对HaCaT细胞和NHDFs细胞无毒性,且能够促细胞增殖作用;驴乳粉无表皮细胞致炎性、无眼刺激性/腐蚀性作用和无皮肤刺激性/腐蚀性作用,但是两种光毒性预判模型对驴乳粉光毒性判定结果不一致,还需进一步的研究。2%驴乳粉能够显著修复受损皮肤屏障、抑制IL-1α的表达,效果与地塞米松类似。结果表明,驴乳粉基本具有皮肤用毒理安全性和修复皮肤屏障的效果。

驴油提升皮肤屏障功能及潜在作用机制研究

探讨驴油提升皮肤屏障功能的作用及其可能的作用机制。将十二烷基硫酸钠作用于体外重组三维表皮模型(EpiKutis)构建皮肤屏障损伤模型,采用四唑盐比色法(MTT)检测组织活力,利用酶联免疫吸附检测方法(ELISA)检测IL-1α的水平,考察驴油对人3D皮肤屏障损伤模型的屏障指数和IL-1α水平的影响。采用转录组高通量测序(RNAseq)技术揭示驴油对皮肤生理的机制,并揭示驴油提升皮肤屏障功能的可能机制。结果表明,驴油可显著提升人3D皮肤屏障损伤模型的屏障指数和降低IL-1α水平,效果与地塞米松类似。驴油作用于人3D皮肤模型后,筛选出1649个差异表达基因,其中619个基因上调,1030个基因下调。基因本体论(Gene Ontology,GO)功能富集分析表明差异表达基因与表皮发育、表皮细胞分化及皮肤发育有关;京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析结果表明差异基因参与TGF-β信号通路、IL-17信号通路、HIF-1信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、NF-κB信号通路等重要生物学通路,其中与驴油提升皮肤屏障功能有关的通路可能是TGF-β信号通路、HIF-1信号通路和NF-κB信号通路。

驴骨素蛋白质组学研究

采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、二维电泳和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF/MS)等技术手段揭示驴骨素蛋白的性质和组成,为具有特征生理活性的驴骨生物活性肽的深层次开发提供依据。结果表明,驴乳粉蛋白含量为47.82 g/100 g,分子量在10 kDa~250 kDa间呈弥散型分布,等电点均匀分布在4.5~6.5之间。通过与马科蛋白图库进行对比,检索出89种蛋白,对这些蛋白进行基因本体论(gene ontology,GO)分类和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集,发现这些蛋白参与间充质迁移、氨基酸刺激的细胞反应、核小体组装、视网膜稳态、软骨内骨形态发生中的软骨发育等生物过程,也参与血小板激活、黏附斑、蛋白质的消化与吸收等信号通路。

驴油与3种常见动物油脂品质比较研究

采用国标方法分析并比较了驴油以及3种常见动物油脂——羊油、猪油和牛油的化学性质、营养特性与脂肪酸组成及含量。结果表明:与3种常见动物油脂相比,驴油富含维生素A、K1和维生素E,含有微量的钾元素,不含钠元素;驴油胆固醇含量与羊油类似,显著低于猪油和牛油(p <0. 05);与羊油、猪油和牛油相比,驴油的饱和脂肪酸和硬脂酸含量低,不饱和脂肪酸和必需脂肪酸含量高,反式脂肪酸含量与猪油类似。因此,可认为驴油是一种优质的动物油脂。

阿胶低聚肽的成分分析及其抗氧化活性

采用复合酶解法制备阿胶低聚肽,分析阿胶低聚肽的营养成分、氨基酸组成和分子量分布,并比较阿胶与阿胶低聚肽清除自由基和防护H_2O_2诱导成纤维细胞氧化损伤的能力。结果表明,阿胶低聚肽含有8种人体必需氨基酸和2种半必需氨基酸,疏水性氨基酸占比较高,约占氨基酸总量的46.23%。阿胶低聚肽的相对分子质量主要集中在900 Da以下,约83.87%。阿胶和阿胶低聚肽对DPPH、ABTS自由基清除率的IC_(50)值分别为1.89和1.39、3.33和2.06 mg/mL。10 mg/mL阿胶和阿胶低聚肽的预处理可使H_2O_2诱导损伤的成纤维细胞存活率分别提高了6.72%和14.34%,SOD的活性分别提升了178.04%和497.88%,减少了细胞内ROS水平。表明,阿胶和阿胶低聚肽均可清除DPPH、ABTS自由基和减轻H_2O_2诱导的成纤维细胞的氧化损伤,且阿胶低聚肽的效果优于阿胶。

驴骨胶原蛋白成分分析及促进皮肤修复活性的研究

为从分子水平探究驴骨胶原蛋白的功效物质基础和驴骨胶原蛋白对受损皮肤屏障的修复作用,本实验采用超高效液相色谱综合高分辨率轨道分析质谱(UPLC-Orbitrap MS)技术定性分析驴骨胶原蛋白的有效成分,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine, BrdU)渗入法和细胞划痕实验检测驴骨胶原蛋白对角质形成细胞增殖和迁移的影响,以探究其对皮肤的修复作用。结果表明:驴骨胶原蛋白的蛋白含量为57.5%,具有典型的胶原氨基酸组成。驴骨胶原蛋白含有较为丰富的氨基酸、维生素、糖类和脂质等活性成分。0.15 g/mL的驴骨胶原蛋白促进人表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)增殖和迁移的效果与5%胎牛血清类似,显著优于空白对照组(P<0.05)。最终推断驴骨胶原蛋白能够加速表皮屏障修复,其机制可能与促进角质形成细胞增殖和迁移有关。

朝鲜蓟茎叶副产物青贮过程中多酚及其功能活性的研究

朝鲜蓟是一种具有保肝、抗癌、抗氧化、抗菌等活性的蔬菜,其茎叶等副产物也具有一定的生理活性,然而其含水量大、易腐,难以实现精深加工。本研究采用低能耗的青贮方式贮藏朝鲜蓟茎叶副产物,探究青贮期间其多酚类功能成分及抗氧化、抑制α-葡萄糖苷酶等生理活性的变化。采用HPLC-QQQ-MS检测单体酚的变化,用福林酚法测定其青贮期间总酚含量的差异,以抗氧化能力及抑制α-葡萄糖苷酶作为功能活性指标,对朝鲜蓟副产物青贮期间多酚的功能活性进行分析。结果表明:青贮能较好地保存朝藓蓟茎叶副产物中的咖啡酰奎宁酸、芦丁和山奈酚-3-O-葡萄糖苷,其总酚保留率达96.8%。对朝鲜蓟多酚活性的研究表明,青贮较好地维持了朝鲜蓟多酚粗提物的抗氧化活性,朝鲜蓟多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用显著,较好地保留了朝鲜蓟茎叶副产物中的多酚成分,且不破坏其抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶的生理活性,是一种低能耗、高效的朝鲜蓟茎叶副产物保存方式,具有推广潜力。

阿胶蛋白质组学研究

为探究阿胶药理活性相关蛋白组分,采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE)和三合一高分辨质谱等技术手段揭示阿胶蛋白质的组成。结果表明,阿胶蛋白在10~250 kDa间呈弥散型分布,通过与马科蛋白图库进行对比,检索出316种可识别的蛋白。研究发现,阿胶含有核心蛋白聚糖、双糖链蛋白聚糖、Lumican、纤调蛋白等富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖和免疫球蛋白、胶原蛋白等多种活性蛋白。进一步对阿胶蛋白进行生物信息学的分析,发现阿胶蛋白主要参与系统性红斑狼疮、蛋白质消化吸收、ECM受体相互作用、病毒致癌、肥厚型心肌病、扩张型心肌病等信号通路,这为阿胶药理活性成分的筛选及深层次开发提供了理论基础。

驴脂组成成分及其油脂的品质指标分析

研究了驴脂的元素谱库、营养成分组成,测定了驴脂提取分离产物驴油的品质指标。以电感耦合等离子体质谱技术(ICP-MS)对驴脂中37种金属元素进行扫描分析,形成样本的元素谱库,结果表明驴脂中各金属元素均未达到检出限。以多质量分析器组合式质谱仪对驴脂进行MSn级扫描,最终获得驴脂中主要成分信息,发现驴脂主要成分中包含16种氨基酸及其衍生物类、11种有机酸、46种脂质以及糖类、维生素类等多种成分。采用超声辅助溶剂提取法得到的驴油相对密度为0.908,水分含量为0.68%,酸价(KOH)为0.58 mg/g,过氧化值为0.018 g/100 g,碘值(I)为85g/100 g。研究储存温度对驴油过氧化值的影响,结果表明驴油常温下即可储存。驴脂可作为食品、化妆品的研发原料,具有广阔的应用前景。

驴乳延缓皮肤衰老的研究

使用驴乳溶液处理正常人原代真皮成纤维细胞(HDFn细胞)和人永生化表皮细胞(HaCaT细胞),检测了驴乳对细胞活性、细胞增殖、损伤修复的影响。研究了驴乳溶液处理HDFn细胞后细胞外基质(胶原蛋白、基质金属蛋白酶)含量的影响。质量浓度为0.63~10 mg/mL驴乳作用于HDFn细胞和HaCaT细胞,细胞安全无毒性。通过BrdU法检测不同质量浓度的驴乳对HDFn细胞和HaCaT细胞的增殖能力,5、10 mg/mL驴乳具有显著的促进细胞增殖的作用(p<0.01)。与阴性对照相比,5、10 mg/mL驴乳可促进HDFn细胞中ColⅠ合成(p<0.01),抑制MMP-1分泌。5、10 mg/mL驴乳作用HDFn细胞24 h后,与阴性对照相比,细胞愈合率显著提高(p<0.01)。驴乳可促进细胞增殖、增加胶原蛋白含量、抑制MMP-1分泌、促进损伤修复,发挥延缓皮肤衰老的作用,为其在护肤品中的应用提供科学依据。

水解驴胎盘提取物对UV诱导皮肤细胞损伤的保护作用

[目的]探究水解驴胎盘提取物防护光损伤的效果与作用机制,旨在填补水解驴胎盘提取物在防护UV光损伤方面的研究空白,实现驴胎盘的高值化利用。[方法]采用CCK-8方法探究水解驴胎盘提取物对HS68和HaCaT细胞增殖率的影响,利用UVA和UVB分别诱导HS68和HaCaT细胞建立体外光损伤模型,研究水解驴胎盘提取物对UV损伤HS68和HaCaT细胞的保护作用。[结果]0.10%~10.00%(V/V)的水解驴胎盘提取物可显著促进HS68和HaCaT细胞生长;1.00%和0.50%(V/V)水解驴胎盘提取物可显著减弱UVB对HaCaT细胞的损伤,显著减少细胞内ROS的产生和MDA的分泌,显著增加细胞内SOD活性;1.00%(V/V)水解驴胎盘提取物可显著降低UVA辐射HS68细胞造成的MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA表达上升,但不能改善COLⅠ和COLⅢmRNA表达的减少。[结论]水解驴胎盘提取物能够防护UVA和UVB造成的皮肤光损伤,可能与提高抗氧化酶活性、降低脂质过氧化程度、抑制金属蛋白酶的异常分泌有关。

高通量测序技术探究驴乳粉对皮肤细胞的影响

基于RNA-seq技术探究驴乳与角质形成细胞和成纤维细胞的相互作用。驴乳分别与角质形成细胞、成纤维细胞共孵育后,采用RNA-seq筛选差异表达基因(DEGs),进行GO和KEGG富集分析。驴乳作用角质形成细胞后共筛选出819个DEGs,其中420个上调基因,399个下调基因。GO富集分析显示,差异表达基因参与与表皮发育、角质细胞分化、角化等生物学过程。KEGG富集分析显示,驴乳作用角质形成细胞涉及的分子机制包括IL-17信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用、金黄色葡萄球菌感染等。驴乳作用成纤维细胞后共筛选出507个DEGs,其中298个基因上调,209个基因下调。GO富集分析显示,驴乳参与成纤维细胞的细胞黏附的正调控、脂质定位的调节、脂质转运的调节等生物学过程;KEGG结果显示,驴乳作用成纤维细胞涉及的分子机制包括细胞因子-细胞因子受体相互作用和cGMP-PKG信号通路等。为阐明驴乳对皮肤细胞功能的分子作用机制提供了科学依据。

驴胎盘蛋白的组成分析

采用蛋白质传统分离技术结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF/MS)揭示驴胎盘蛋白质的性质和组成,结果表明,驴胎盘蛋白含量为(15.62±1.04)%,等电点均匀分布酸性和碱性区域,分子量主要集中在7~19、36~78 kD 2个区域。通过与马科蛋白图库进行对比,检索出3865种可识别的蛋白,进一步对驴胎盘蛋白进行生物信息学分析,发现驴胎盘蛋白主要参与了内质网蛋白质加工、ECM-受体相互作用、内质网应激反应等生物学过程,为驴胎盘药理活性成分的筛选提供了理论基础。

驴骨胶原蛋白开发为化妆品原料的安全与功效性评价

初步探究驴骨胶原蛋白开发为化妆品原料的安全性与功效性。以驴骨胶原蛋白作为研究对象,通过细胞毒性试验、鸡胚绒毛尿囊膜试验、3D皮肤模型、自由基清除试验等对驴骨胶原蛋白的安全性、功效性进行分析。结果显示,10 mg/mL以下浓度的驴骨胶原蛋白对HaCaT细胞和NHDFs细胞无毒性,且有一定促细胞增殖作用;驴骨胶原蛋白无光毒性作用,无眼刺激性/腐蚀性作用,无皮肤刺激性/腐蚀性作用。1.5%驴骨胶原蛋白能够显著修复受损皮肤屏障、抑制IL-1α的表达,效果接近于地塞米松。驴骨胶原蛋白对DPPH自由基具有良好的清除作用,IC50为3.83%。结果表明,驴骨胶原蛋白具有开发为化妆品原料的安全性与功效价值。

驴肝与猪肝、鸡肝和鹅肝之间的营养成分比较

目的探究驴肝与猪肝、鸡肝和鹅肝之间的营养成分差异。方法测定驴肝、猪肝、鸡肝和鹅肝的水分、灰分、蛋白质、粗脂肪、氨基酸、脂肪酸、矿物质元素、维生素的含量,并将驴肝与其他3种肝脏的营养成分作对比分析。结果驴肝蛋白质含量比猪肝、鸡肝和鹅肝高,不饱和脂肪酸含量和占总脂肪酸的比例均优于猪肝、鸡肝和鹅肝,矿物质元素中Zn含量明显高于其他3种肝脏。胆固醇含量、总脂肪酸含量均低于其他畜禽肝脏。结论从营养学角度看,驴肝是较优的动物性食品原料。

阿胶活性肽的结构鉴定及活性筛选

利用液相色谱-串联质谱联用技术鉴定阿胶模拟胃肠道消化产物中肽的结构,并通过分子对接技术从中筛选潜在的降血压、抗老年痴呆和抗肿瘤的活性肽。结果表明,从阿胶消化产物中获得519种活性肽,其分子质量在661.4~2851.4 Da之间,主要为胶原蛋白和血红蛋白的酶解产物;获得最具潜力的降血压肽KGETGLR、抗老年痴呆肽SGLDGAKG和抗肿瘤肽ADGVAGPK;氢键相互作用和静电相互作用在阿胶肽发挥降血压、抗老年痴呆和抗肿瘤活性中都起着重要的作用。