三种血清学方法和qPCR方法在鸡滑液囊支原体检测中的综合应用研究

为评价不同方法对鸡滑液囊支原体(MS)活疫苗免疫和非免疫状态鸡群的监测效果,研究分别采用HI、SPA与ELISA三种抗体检测方法和qPCR方法同步对某养殖场A、B和C三组鸡群进行MS感染和抗体水平监测,其中A鸡群23日龄免疫MS活疫苗(MS-H株),B、C鸡群不免疫MS疫苗。结果显示:三种血清学检测方法所测MS抗体阳性率趋势基本一致,HI抗体效价变化规律和ELISA抗体效价变化规律相似,但血清学方法相对于qPCR方法具有一定的滞后性,qPCR可以最早发现MS野毒感染,且在使用活疫苗免疫的情况下对疫苗和野毒进行鉴别检测。研究提示:在条件允许的情况下,qPCR可以作为MS首选的监测方法;当检测条件受限时,上述三种血清学方法同样也可以用于评估MS野毒感染状况,但对结果的判断受母源抗体水平、疫苗免疫状况、野毒感染时间等多重因素的影响,在结果判断时应进行综合分析。

新型限进色谱在临床药物分析中的应用

限进填料属于特殊萃取介质之一,允许复杂生物基质样品直接进样分析,结合液相色谱系统可以实现生物样品自动化直接进样,简化并加速了样品预处理过程。本文简要介绍了限进填料固相萃取原理及分类,并对该技术在临床药物分析及药代动力学领域中的应用现状及发展趋势作了详细的综述。

在线柱切换RP-HPLC测定人血清中卡马西平浓度

目的:通过在线样品预处理柱切换技术建立测定人体血清中卡马西平血药浓度的高效液相色谱法。方法:样品预处理采用 LiChroCART(25 mm×4 mm,25μm)预柱,分析柱为 Microsorb-MV C_(18) column(150 mm×4.6 mm,4μm);以水-乙醇(95:5,v/v)为血清蛋白冲洗流动相(流速2 mL·min^(-1)),水-乙醇(40:60,v/v)为分析流动相,流速0.8 mL·min^(-1);柱温:室温;检测波长285 nm。结果:本方法线性范围为2.0～40.0μg·mL^(-1),r=0.9997,定量下限为2μg·mL^(-1),日内、日间精密度 RSD 小于5%,方法回收率均大于95%。结论:该方法准确、稳定,灵敏度高,适用于卡马西平临床治疗药物监测的需要。

用RP-HPLC法测定不同产地独一味药材中山栀子苷甲酯的含量

目的:建立测定不同产地独一味药材中山栀子苷甲酯含量的RP-HPLC方法。方法:采用SymmetryC18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-水(25:75),流速:1.0ml/min,检测波长:238nm。结果:山栀子苷甲酯在5.0～50μg/ml(r=0.9998)线性关系良好,加样回收率为94.7%,RSD为2.8%。9批不同产地独一味药材中山栀子苷甲酯的含量为0.12%～1.30%,甘肃玛曲县所产独一味的除根以外的部分的山栀子苷甲酯的含量最高(1.30%)。结论:本方法准确、可靠,适于独一味药材中山栀子苷甲酯含量的测定。不同产地独一味药材中山栀子苷甲酯含量存在较大差异。

线粒体靶向抗氧化剂研究进展

线粒体是细胞呼吸的主要场所,在细胞的生命周期中扮演重要角色,三羧酸循环和氧化磷酸化都是在线粒体中进行。线粒体功能障碍可导致一系列疾病,如缺血-再灌注损伤、败血症和糖尿病等。线粒体是神经退行性病变的治疗靶点,也是药物转运策略研究的引人注目的靶位。虽然线粒体所介导的疾病进程的分子机制尚未完全阐明,但氧化应激是关键的环节。开发线粒体靶向的抗氧化应激保护药物具有诱人的前景。线粒体靶向抗氧化剂是指以线粒体为作用靶位的具有抗氧化作用的药物。该文介绍了现有的线粒体靶向抗氧化剂的概念、分类及其疾病治疗研究进展。

他汀类药物对于阿尔茨海默病的疗效

流行病学和药理学研究结果显示,胆固醇在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的发生中起着重要作用,他汀类药物对于AD具有潜在的治疗作用,今后这类药物可能被用来治疗AD。本文综述了目前他汀类药物对AD的研究报道,并对他汀类药物、胆固醇、AD之间的作用机制进行了探讨,为AD的治疗和他汀类药物的新应用提供参考。

用RP-HPLC法同时测定含丹参中药制剂中3种丹参酮的含量

目的：建立同时测定含丹参的中药制剂中隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ。含量的RP-HPLC法。方法：采用Microsorb—MV C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相：甲醇-四氢呋喃-水（25：30：45），流速：1．0mL／min，检测波长：254nm，柱温为室温。结果：隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA在0．5～30μg／mL浓度范围内线性关系均良好，平均加样回收率分别为94．8％、100．8％和91．1％（n=5）。结论：本研究方法简便快速，灵敏度和重复性均符合含丹参中药制剂质量控制研究的要求。

缺氧环境对PC12细胞损伤及HIF-1 mRNA表达水平的影响

目的探讨缺氧环境对PC12细胞的损伤作用及其初步机制。方法建立PC12细胞缺氧模型;倒置相差显微镜观察细胞形态;MTT法检测正常及缺氧环境对PC12细胞的增殖;PC12细胞缺氧培养0,2,4,8,12,24和48 h后测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);用Real-time RT-PCR检测HIF-1 mRNA的表达水平。结果缺氧培养24 h,48 h后PC12细胞增殖受到抑制(P<0.05,P<0.01);PC12细胞缺氧培养2、4、8 h后培养液中的LDH活性从2～8 h逐渐增高,8 h达到最高值(P<0.01),8 h后逐渐下降;PC12缺氧培养0～4 h HIF-1 mRNA的表达水平逐渐增高,4 h达到最高,4～48 h逐渐降低。结论缺氧环境可引起PC12细胞损伤,缺氧8 h损伤最严重。缺氧导致HIF-1基因表达水平提高,4 h时达到峰值。

藏药镰形棘豆的研究进展

目的:传统藏药镰形棘豆为青藏高原豆科棘豆属多年生无茎草本植物,资源丰富且药用价值高,近年来有关该植物的研究十分广泛。作者通过查阅相关文献,从镰形棘豆的化学成分、药理作用、临床应用、提取工艺及含量测定5个方面进行总结,以期为该植物的进一步研究利用提供参考。

藏紫菀醇提物的抗氧化与抗缺氧作用研究

目的:对藏紫菀乙醇提取物(EEAS)的体外抗氧化及抗缺氧作用进行研究。方法:采用DPPH·、羟自由基、超氧阴离子清除和还原力检测方法考察EEAS的抗氧化作用,并对其总黄酮和总多酚含量进行测定;利用缺氧PC12细胞模型对其抗缺氧作用进行评价。结果:EEAS富含黄酮和多酚化合物,对3种自由基均表现出一定的清除活性,其中对超氧阴离子的清除活性优于VC,同时表现出一定的Fe3+还原能力。EEAS能显著增加缺氧PC12细胞的活力,降低缺氧PC12细胞LDH活性和MDA含量,提高SOD、CAT、GSH-Px及T-AOC活性。结论:EEAS是一种活性优异的天然抗氧化剂,同时对缺氧导致的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用。

天山雪莲抗缺氧活性成分研究

目的：对天山雪莲抗缺氧活性成分进行研究。方法：利用硅胶柱色谱并结合现代波谱技术对天山雪莲的化学成分进行分离纯化与结构鉴定。利用常压密闭缺氧小鼠模型,对分离得到的化合物进行抗缺氧活性评价。结果：从天山雪莲石油醚部位中分离得到12个化合物,分别鉴定为：二十八烷（1）、1-十一烷醇（2）、1-十七烷醇（3）、1-二十七烷醇（4）、肉豆蔻醚（5）、欧芹脑（6）、β-谷甾醇（7）、羽扇豆醇（8）、苏荠苎黄酮（9）、荠苎黄酮（10）、7-甲氧基黄芩素（11）、5,6-二羟基-7,8-二甲氧基黄酮（12）。结论：除化合物7、8外,其余均为首次从该植物中分离得到。抗缺氧活性实验表明：化合物1、5、8~12具有较好的抗缺氧活性。

天山雪莲乙醇提取物对模拟高原缺氧小鼠生化指标的影响

目的:观察天山雪莲乙醇提取物(Ethanol Extract from Saussurea involucrata,EES)对模拟高原缺氧小鼠生化指标的影响,从自由基代谢和能量代谢的角度探讨其抗缺氧作用机制。方法:测定模拟高原缺氧小鼠心肌和脑组织自由基代谢相关生化指标MDA含量、SOD活性;能量代谢相关生化指标LD含量、LDH活性、ATP含量、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果:与模型组比较,EES能显著提高缺氧小鼠心肌和脑组织SOD、LDH活性,降低MDA、LD含量,增加ATP含量和Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结论:EES能提高机体抗氧化能力,减少自由基对机体的损伤,并在一定程度上缓解缺氧所致的能量代谢障碍。

矮垂头菊乙醇提取物的体外自由基清除活性及其对高原缺氧小鼠的保护作用研究

本文对矮垂头菊乙醇提取物(Ethanol extract of Cremanthodium humile,EECH)中总黄酮与总多酚含量,体外自由基清除活性以及对高原缺氧小鼠的保护作用进行研究。结果显示:EECH中总黄酮与总多酚的含量分别为378.35±7.04 mg芦丁/g提取物和114.58±0.99 mg没食子酸/g提取物。其对DPPH、羟自由基、NO自由基均表现出一定的清除活性,IC50值分别为80.90±0.47、263.54±6.82和285.26±4.45μg/m L,但均弱于Vc,然而其对超氧阴离子的清除作用优于Vc。此外,EECH能够显著延长缺氧常压密闭缺氧小鼠的存活时间,减少低压低氧小鼠心脑组织中MDA含量,提高抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px的活力。以上结果表明:EECH是一种活性优异的天然抗氧化剂,对高原缺氧诱导的小鼠心脑组织损伤具有明显的保护作用。

低压氧舱模拟急性高原缺氧动物模型建立的初探

目的模拟高原低压低氧环境建立小鼠急性缺氧模型,探讨不同缺氧时间对小鼠缺氧损伤程度的影响。方法采用国产低压低氧动物实验舱模拟海拔6000 m高原缺氧环境,观察6 h、12 h、24 h、36 h、2 d、3 d、5 d、7 d不同缺氧时间小鼠组织病理学变化情况,并测定血浆LD、LDH和4种ATP酶的变化规律。结果 LD、LDH、T-AOC和ATP酶随缺氧时间的延长而呈波浪式变化,6 h后可见组织形态发生明显改变,LD显著升高,T-AOC显著下降,12 h后LDH显著升高,ATP酶显著下降,说明在此条件下缺氧6～12 h即可复制出急性高原病动物模型。结论该模型为下一步研究急性高原病发病机制提供了有利条件,在高原病防治研究中具有重要意义。

2019-2021年来宾市重点职业病危害因素监测结果分析

目的 了解近年来宾市重点职业病危害状况,明确职业病防治工作重点,为完善职业病防治策略提供参考和科学依据。方法 依托“职业病及健康危害因素监测信息系统”“工作场所职业病危害因素监测系统”与全国放射卫生信息平台收集数据,对接害劳动者职业健康检查及职业病报告情况、工作场所职业病危害因素检测情况以及职业性放射性疾病监测情况进行统计分析。结果 2019-2021年,来宾市开展职业健康检查的企业372家次,检查劳动者22 062人次,检出职业禁忌证748例(3.39%)、疑似职业病94例(0.43%)、职业病11例(0.05%,其中尘肺病8例、物理因素所致职业病2例、职业性眼病1例),职业病报告率随年份呈波动下降趋势。2020-2021年,工作场所职业病危害因素监测岗位/工种数1 763个,总超标率为12.08%,监测工作场所点数2 254个,总超标率为11.67%。2019-2021年,放射诊疗机构工作人员个人剂量监测率分别为90.91%、93.23%和100.00%,职业健康检查率分别为87.32%、82.95%和22.19%,无新增报告职业性放射性疾病。结论 近三年来宾市重点职业病危害因素以噪声、煤尘(煤矽尘)为主,职业病报告以煤工尘肺为主,应重点关注噪声、煤尘(煤矽尘)作业劳动者职业健康检查结果,规范开展工作场所职业病危害因素检测,积极进行职业健康宣教。同时,提高放射工作人员职业健康检查覆盖率,早期预防和发现职业性放射性疾病。

PC12细胞在缺氧条件下的自噬现象

目的:考察PC12细胞内自噬发生与缺氧时间的关系,探讨自噬对缺氧细胞的影响作用。方法:以PC12细胞为模型,将对数生长期的细胞加入96孔培养板,37℃、5%CO_2培养24 h后,放入0.5%O_2、94.5%N_2和5%CO_2的培养箱缺氧1 h、3 h、6h、9 h、12 h、24 h、36 h和48 h,用MTT法检测细胞存活率,透射电镜观察细胞内自噬体,Westen blot法检测自噬相关蛋白(LC3B、Atg5和Beclin1)的表达,用试剂盒检测细胞内乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧自由基(ROS)和线粒体膜电位(MNP)水平,探究缺氧不同时间自噬对PC12细胞的作用。结果:在缺氧3~12 h,PC12细胞自噬明显增加,自噬相关蛋白(LC3B、Atg5和Beclin1)表达增加,尤其是缺氧9 h,PC12细胞存活明显增加,表明短时间缺氧自噬对细胞起保护作用,而随着缺氧时间的延长细胞存活明显降低,自噬相关蛋白表达水平减少,细胞LHD和ROS水平明显增加。MMP水平显著下降,细胞凋亡明显增加。结论:在缺氧早期自噬对PC12细胞起保护作用,但缺氧时间较长,超过了细胞自身调节能力导致细胞死亡。

乙酰唑胺对PC12细胞缺氧损伤的保护作用及其机制研究

目的研究乙酰唑胺对缺氧PC12细胞的保护作用及其机制。方法用三气培养箱建立缺氧模型培养PC12细胞,筛选乙酰唑胺作用于缺氧PC12细胞的最佳浓度,观察细胞形态,测定细胞活力、LDH的含量、细胞周期,实时荧光定量PCR法检测HIF-1α及Caspase-3 mRNA的表达。结果与缺氧模型组相比,乙酰唑胺可明显提高缺氧PC12细胞存活率、降低培养基中LDH的含量,降低G1期、提高S期细胞百分比、提高HIF-1αmRNA的表达、降低Caspase-3 mRNA的表达水平。结论乙酰唑胺具有保护PC12细胞缺氧损伤的作用。

天山雪莲乙醇提取物对缺氧小鼠肝脏线粒体的保护作用研究

目的:研究天山雪莲乙醇提取物对缺氧小鼠肝脏线粒体的保护作用。方法:将BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺阳性对照组、天山雪莲提取物组,给药后将小鼠放入低压氧舱,减压至模拟海拔8 000 m高度,小鼠保持在此高度下缺氧12 h后处死小鼠,提取肝脏线粒体。测定线粒体膜电位、线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和苹果酸脱氢酶、顺乌头酸酶、α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶的活性。结果:与缺氧模型组比较,天山雪莲提取物能够保护线粒体膜电位,提高顺乌头酸酶、α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶和线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的活性。结论:天山雪莲乙醇提取物能够保护缺氧小鼠肝脏线粒体功能。