微量标本Western blot在诊断肢带型肌营养不良2A型中的应用

目的探讨微量标本Western blot在诊断肢带型肌营养不良2A型中的应用。方法对73例以肢体近端肌肉受累为首要临床表现的进行性肌营养不良患者行开放式骨骼肌活体组织检查，标本行组织化学染色以及抗dystrophin-N、C、R，α、β、γ、δ-sarcoglycan，dysferlin，caveolin-3单克隆抗体免疫组织化学染色。对其中已经除外dystrophin、sarcoglycans、dysferlin、caveolin-3蛋白异常的29例患者再行骨骼肌Western blot抗calpain-3、caveolin-3单克隆抗体免疫反应。结果共有10例患者被确诊为肢带型肌营养不良2A型，其临床特点均为肢体近端肌无力起病，血清肌酸激酶不同程度升高，肌电图呈肌源性改变。组织化学染色见肌纤维大小不一，可见不同程度肌纤维变性、坏死和再生，结缔组织增生，6例见分叶状肌纤维；免疫组织化学染色见肌纤维中dystrophin、sarcoglycan、dysferlin、caveolin-3蛋白均正常表达。Westernblot发现该10例患者相对分子质量94000条带（calpain-3）与Duchenne／Becker型肌营养不良对照相比，呈完全（8例）或部分（2例）缺失；30000区域附加条带均呈弱表达，22000区域条带（caveolin-3）均正常表达。结论骨骼肌微量标本Western blot是诊断LGMD2A的有效方法，适用于临床LGMD的分型诊断。

硒蛋白-P在线粒体疾病患者不整红边纤维中的特异表达及相关作用

目的研究硒蛋白P与琥珀酸脱氢酶、细胞色素C氧化酶的关系及它们在线粒体疾病患者不整红边纤维(raggedredfiber,RRF)中的表现和作用。方法(1)研究对象:线粒体疾病患者14例,其中Kearns Sayre综合征患者1例,线粒体脑肌病、乳酸酸中毒伴卒中样症状者4例,肌阵挛癫伴RRF1例,慢性进行性眼外肌麻痹6例,肢带型线粒体病2例;5例对照,其中多发性肌炎2例,其他神经肌病3例。全部患者均经临床、病理、分子生物学DNA分析确诊。(2)开放式肌肉活检。(3)连续切片,经组织化学、免疫组织化学染色分析。结果患者RRF的肌浆中硒蛋白-P显著表达,琥珀酸脱氢酶活性增强,细胞色素C氧化酶活性增强、减弱或缺陷。结论硒蛋白-P在对抗线粒体氧化损伤、保护线粒体机能方面可能充当了重要角色,可以作为病理学评价线粒体机能和诊断RRF的指标。