二甲双胍经Nrf2-Gpx4通路抑制铁死亡并减轻非酒精性脂肪性肝病大鼠的肝损伤

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)介导的铁死亡通路探究二甲双胍(Met)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝损伤发挥保护作用的分子机制。方法:SPF级雄性SD大鼠给予高脂饲料喂养建立NAFLD模型,对照(control)组大鼠给予普通饲料喂养。喂养12周后,将模型大鼠随机分为NAFLD组、Met低剂量(Met-L)组、Met高剂量(Met-H)组和Met+brusatol(Nrf2抑制剂)组,每组8只。Met-L、Met-H组大鼠分别给予100、200 mg/kg Met灌胃,每天1次;Met+brusatol组大鼠在给予200 mg/kg Met灌胃的同时隔天腹腔注射2 mg/kg brusatol;control组和NAFLD组大鼠给予等量生理盐水灌胃和腹腔注射,连续6周。给药结束后,检测血清中肝功能相关指标[天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转氨酶(ALT)]、血脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]及炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)]的水平;比色法检测肝组织匀浆中铁离子含量,TBA法检测丙二醛(MDA)含量,微量酶标法检测谷胱甘肽(GSH)含量,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧(ROS)含量;HE染色检测肝组织病理学变化;油红O染色检测肝细胞脂质积累情况;普鲁士蓝染色检测肝脏中铁沉积情况;Western blot和RT-qPCR检测肝组织中Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、Gpx4及胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(xCT)的蛋白和mRNA的表达。结果:与control组相比,NAFLD组血清ALT、AST、TNF-α、IL-6、TC、TG和LDL-C水平、肝组织铁离子含量、MDA和ROS水平、肝组织NAS评分、油红O染色及普鲁士蓝染色阳性面积百分比显著升高(P<0.05),血清HDL-C水平、肝组织GSH含量及Nrf2、HO-1、Gpx4和xCT的蛋白和mRNA表达显著降低(P<0.05),肝细胞排列紊乱、肿胀,细胞内存在脂滴空泡,有明显的炎症细胞浸润、脂质蓄积和铁沉积;与NAFLD组相比,Met-L和Met-H组血清ALT、AST、TNF-α、IL-6、TC、TG和LDL-C水平、肝组织铁离子含量、MDA和ROS水平、肝组织NAS评分、油红O染色及普鲁士蓝染色阳性面积百分比显著降低(P<0.05),血清HDL-C水平、肝组织GSH含量及Nrf2、HO-1、Gpx4和xCT的蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.05),肝细胞脂肪变性减轻,炎症细胞浸润、脂质蓄积和铁沉积减少;Nrf2抑制剂brusatol能明显逆转Met对Nrf2/Gpx4通路的激活作用以及NAFLD大鼠肝脏的保护作用。结论:二甲双胍可能通过激活Nrf2/Gpx4通路,抑制铁死亡,减轻脂质过氧化程度,从而对NAFLD大鼠肝脏发挥保护作用。

D-二聚体对缺血性肠病及其严重程度的临床早期诊断价值

目的探讨D-二聚体对缺血性肠病及其严重程度的临床早期诊断价值。方法回顾近13年来该院消化科收治的缺血性肠病患者59例为观察组,及同期收治的内镜下证实的反流性食管炎、消化性溃疡(合并出血者除外)、胃肠道息肉患者共59例为对照组,比较两组入院后24h内D-二聚体水平之间的差异,并进一步比较观察组中有溃疡与无溃疡者、单发溃疡与多发溃疡者之间D-二聚体的差异。结果入院后24h内D-二聚体水平,观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但仍在正常范围内。观察组中,有溃疡组与无溃疡组之间差异无统计学意义(P>0.05),单发溃疡组与多发溃疡组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论该研究不支持D-二聚体可用于缺血性肠病的临床早期诊断,且其与病情的严重程度无明显相关。

近端胃切除术后并发腹腔感染外周血TLR2、TLR4和Th1/Th2表达及其与临床转归的关系

目的探讨近端胃切除术后并发腹腔感染患者Toll样受体(TLR)2、TLR4和辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2表达及其与临床转归的关系。方法选取2020年1月-2022年12月邢台市人民医院行近端胃切除术后并发腹腔感染的83例胃癌患者为感染组,另选取同期行近端胃切除术后无腹腔感染的83例胃癌患者为未感染组。对比两组外周血TLR2 mRNA、TLR4 mRNA及Th1/Th2比值。对患者以电话、门诊复查形式随访1年,根据临床转归将感染组患者分为转归良好组和转归不良组,分析TLR2 mRNA、TLR4 mRNA、Th1/Th2与近端胃切除术后并发腹腔感染患者转归不良的关系及对近端胃切除术后并发腹腔感染患者临床转归不良的预测价值。结果感染组外周血TLR2 mRNA、TLR4 mRNA高于未感染组(P<0.05);Th1/Th2比值低于未感染组(P<0.05)。外周血TLR2 mRNA、TLR4 mRNA及Th1/Th2比值与近端胃切除术后并发腹腔感染患者临床转归有关(P<0.05)。外周血TLR2 mRNA、TLR4 mRNA及Th1/Th2比值联合预测近端胃切除术后并发腹腔感染患者临床转归不良的曲下线面积为0.965,高于三指标单独检测(P<0.05)。结论外周血TLR2、TLR4、Th1/Th2在近端胃切除术后并发腹腔感染患者中异常表达,三指标异常表达与患者转归不良有关。