大鼠嗅球乙酰胆碱酯酶阳性传入纤维起源的实验研究

本文应用荧光素逆行标记与乙酰胆碱酯酶(AchE)组织化学相结合技术,探索了嗅球AchE阳性传入纤维的起源。经观察在注射区同侧的下列核(区)可发现荧酶双标记细胞:嗅前核后部、斜角带核、屏状核、中缝背核、中央上核和蓝斑。

大鼠嗅球传入联系的起源

用荧光逆行标记技术,探索大鼠嗅球传入纤维起源。一侧嗅球注入DAPI后,可在下列核(区)内找到DAPI逆行标记细胞:嗅前核、伏隔核、斜角带核、梨状皮质,视前大细胞核、中缝背核、中央上核和蓝斑.以DAPI-PI配对分别注入两侧嗅球后,可在嗅前核和中缝背核找到DAPI-PI逆行双标记细胞。

树鼩中枢神经系内乙酰胆碱酯酶阳性神经元的分布

本文应用乙酰胆碱酯酶(AchE)药理组化技术,亦称AchE再生技术,探讨AchE阳性神经元在树鼩中枢神经系内的分布及形态特征。按反应强弱程度不同,可见纠强、中、弱三种染色神经元,结果表明强、中染色神经元主要分布纹状体、基底前脑、下丘脑、黑质、红核、腹侧被盖区、蓝斑、脑桥被盖核、脑干网状结构、脑神经运动核及脊髓前角等区域内。

小鼠出生后接触锰对脑发育的毒性影响

为探讨小鼠出生后接触锰对脑发育相关指标的毒性影响 ,用神经行为试验检测肌力、自发性活动和精神焦虑性 ;以神经生化TAB法检测全脑过氧化脂质 (LPO)含量 ,邻苯三酚自氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性 ;以细胞免疫化学法 (ABC法 )检测大脑皮质齿状回胶质细胞纤维酸蛋白 (GFAP)免疫反应强度。结果表明 :( 1)高锰组小鼠身长 (头—臀 )的增长明显滞后于对照组和低锰组 ,而低锰组与对照组之间无明显差异 ;( 2 )在Morris水迷宫的肌力测试中 ,染锰组小鼠到达平台的潜伏期明显比对照组延长 ,且以高锰组更为显著 ;在旷场试验中 ,染锰组小鼠在中央和外周爬格子数及抬头探测的次数均明显多于对照组 ;在ElevatedPlusArms焦虑性试验中 ,染锰组小鼠从中央区进入第一臂的潜伏期均明显缩短 ,而进入开放臂次数 /入臂总次数的比值则均比对照组显著增高 ;( 3 )染锰组小鼠全脑组织LPO含量均比对照组明显升高、而SOD活性则明显降低 ,且均以高锰组更为显著 ;( 4 )染锰组小鼠大脑皮质齿状回的GFAP免疫反应强度及其阳性产物的平均相对密度均比对照组明显增强 ,且以高锰组更为显著。提示小鼠出生后接触锰对其生长发育过程中的体重增长、神经行为、全脑LPO含量与SOD活性、及大脑皮质齿状回GFAP免疫反应均产生了明显的毒性影响。

锰对大鼠子代生长发育的影响

观测了经口染锰对大白鼠子代生长发育的影响。结果显示：（１）高剂量组仔鼠的体重显著下降，但脑重／体重比值却明显升高；（２）在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫试验中，高剂量组仔鼠前５天每天到达潜台的潜伏期显著缩短；在第６天无潜台探测试验中，其在原潜台象限的游泳长度明显增长，但游泳的总长度与对照组和低剂量组之间却无差异；（３）染锰组，特别是高剂量组仔鼠海马的胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度和免疫反应阳性产物的平均相对密度。

高锰对雌性仔鼠大脑发育的影响

用不同锰含量的饮水（分别为２和１０ｇ／Ｌ）使孕鼠染锰，研究对子代大脑发育的影响。结果表明：（１）高剂量染锰组仔鼠大脑额叶和顶叶皮质厚度比低剂量组和对照组显著变薄，而胶质细胞纤维酸蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌａｒｙａｃｉｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）免疫反应强度及其阳性反应产物平均相对密度均明显增高；（２）高、低剂量染锰组仔鼠的扣带回皮质厚度显著较对照组增厚，ＧＦ－ＡＰ反应强度及其阳性反应产物相对密度显著升高；（３）高剂量染锰组仔鼠胼胝体的面积较对照组和低剂量组显著增大，ＧＦＡＰ免疫反应及其阳性反应产物相对密度明显增高，而低剂量组与对照组之间无差异。

锰对大鼠子代脑锥体外系发育的影响

母鼠及子鼠饮用含氯化锰（２ｇ／Ｌ或１０ｇ／Ｌ）的水，研究锰对大鼠子代行为和脑锥体外系发育的影响。结果显示：（１）在“ＥｌｅｖａｔｅｄＰｌｕｓＡｒｍｓＭａｚｅ”迷宫测试中，染锰组仔鼠从中央区进入第一臂的潜伏期缩短，但进入开放臂的次数与对照组无差异；在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫肌力测试中，各组动物仔鼠到达平台的时间无差异。（２）高剂量染锰组尾状核和伏隔核的面积、胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度及反应阳性产物的平均相对密度均较对照组显著升高；（３）高剂量组仔鼠黑质、中脑腹侧被盖区和尾状核的酷氨酸氢氧化酶免疫反应强度及其反应阳性产物的平均相对密度均比对照组明显下降。

锰中毒对新生小鼠脑发育的影响

为研究锰中毒对新生小鼠脑发育的影响 ,经口服和腹腔注射联合途径给新生昆明种小鼠染锰。结果显示 :(1)高锰组小鼠体重增长明显滞后 ,脑重和脑重 体重比值显著降低 ;(2 )在Morris水迷宫的行为检测试验中 ,高锰组小鼠前 5天每天到达潜台的平均时间显著延长 ;而在第 6天的探测试验中 ,其在原潜台象限的游泳时间则明显缩短 ;(3)高锰组小鼠的脑组织蛋白质含量明显降低 ,而乙酰胆碱酯酶活性则升高 ;(4)染锰组 ,特别是高染锰组小鼠海马CA3区的胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度及其阳性产物的平均相对密度均比对照组明显增高。

孕期锰染毒对仔鼠脑内锰、锌、铜、铁的影响

孕期锰染毒对仔鼠脑内锰、锌、铜、铁的影响杨伯宁１张德兴２檀进发１柯铭华１关雄俊３宋苏环３谢涛锰是一种有毒金属，普遍存在于自然界。锰及其化合物在现代工业中用途很广，对人体则是正常代谢所必需的一种微量元素。但过量锰进入机体可产生严重损害。在工业生产中，长...

锰对大鼠仔代脑发育过程中单胺类神经递质的影响

采用荧光分光光度法测定孕期大鼠接触锰的Ｆ１代仔鼠新生儿期、１月龄期、２月龄期和３月龄期脑内单胺类神经递质的含量。结果为：１．新生儿期，染锰组脑内多巴胺（ＤＡ）含量显著增高（Ｐ＜０．０５）；去甲基肾上腺素（ＮＥ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）无明显改变。２．１月龄期，染锰各组脑内ＮＥ含量明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＤＡ和５－ＨＴ含量与对照组相比无显著性差异。３．２月龄期，染锰各组的ＮＥ、ＤＡ和５－ＨＴ含量均比对照组低（Ｐ＜０．０５）。４．３月龄期，染锰各组的ＮＥ、ＤＡ和５－ＨＴ含量，与对照组间无显著性差异。结果提示，孕期接触锰对Ｆ１代仔鼠脑发育过程中单胺类递质的代谢，在其不同的发育时期产生了不同的影响。

孕期锰接触对母体及子代发育的影响

为研究妊娠期大鼠接触锰对母体及子代发育的影响，对妊娠大鼠，于孕第一天开始，每隔一天，腹腔内注射氯化锰水溶液。４个染锰组的染锰剂量分别为每次３．７５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ和３０ｍｇ／ｋｇ。自然分娩，观察母仔的生长发育情况。结果发现：①３０ｍｇ／ｋｇ的染锰剂量对孕鼠有明显的毒性，表现为体重下降，妊娠中止；②１５ｍｇ／ｋｇ染锰组仔鼠的出生体重及头臀长均显著低于对照组；③１个月龄时，３．７５ｍｇ／ｋｇ和７．５ｍｇ／ｋｇ染锰组仔鼠的体重和头臀长均大于对照组，而１５ｍｇ／ｋｇ染锰组则仍低于正常对照组；④２～３个月龄时，１５ｍｇ／ｋｇ染锰组仔鼠体重低于对照组，其余染锰组与对照组之间，未见有显著性差异。提示：孕期锰接触，超过一定量时，对母体及子代的生长发育均可产生明显的影响。

酒精对幼鼠神经行为发育的影响

目的 探讨酒精对雌性幼鼠神经行为发育的影响。方法 4 8只 8周龄昆明雌性幼鼠随机分成对照组、低、中和高浓度组 ,分别用不同浓度的酒精 (0 %、12 5 %、2 5 %和 5 0 % )灌喂 ,按 10ml/kg ,隔天 1次 ,连续 90d ,采用自发活动试验、Morris水迷宫和免疫组化等技术 ,结合图像分析系统定量分析酒精对神经行为与大脑形态变化相关性。结果 ①低浓度组自发活动增加 ,高浓度组自发活动减少 ,高浓度组的Morris水迷宫潜学习成绩延长 :②高浓度组脑重量减轻 ,大脑内侧中央前区(Prcm)、第 1感觉运动皮质区 (S1)和无粒型岛皮质后区 (Alp)、纹状皮质 18区 (Str18)和颞叶听区 (TeAud)皮质厚度明显变薄 ;③高、中浓度组胶质细胞纤维酸蛋白 (GFAP)免疫反应强度增强及反应性胶质细胞的平均相对密度升高。结论 高、中浓度酒精对小鼠神经行为发育有抑制作用。

酒精对小鼠锥体外系的影响

目的 探讨酒精对锥体外系影响机制。方法 48只8周龄雌性幼鼠随机分成对照组和低、中、高浓度组,分别用不同浓度的酒精(0％、12.5％、25％和50％)灌喂,按10 ml/kg,隔天1次,90 d后,分别对各浓度组小鼠进行灌酒前、后转棒试验。转棒试验结束后快速取出小脑和尾壳核,并测量它们的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性。结果 高浓度组小鼠灌酒前、后在棒上停留时间均减少,中浓度组小鼠灌酒后在棒上停留时间也减少;高、中浓度组小脑和尾壳核胆碱酯酶活性降低。结论 酒精致锥体外系功能障碍与小脑、尾壳核的胆碱酯酶活性降低有关。

大鼠纹状体、中缝核向苍白球和黑质的分叉投射

分别将DAPI和PI注入大鼠同侧苍白球和黑质后,于尾状核、伏隔核、中缝背核和中央上核内见到较多的DAPI和PI单标细胞混杂存在。

大白鼠伏隔核乙酰胆碱酯酶阳性纤维的脑干起源

本文报道应用荧光逆行标记和乙酰胆碱酯酶组织化学相结合技术,研究了大白鼠伏隔核乙酰胆碱酯酶阳性纤维的脑干起源。向一侧伏隔核注入荧光示踪剂二盐酸4′,6-双脒基-2-苯吲哚(DAPI)或樱草黄(Pr)。处死前6~8小时肌注二异丙基氟磷酸(DFP)。用含10%福尔马林的磷缓液灌流,连续冠状冰冻切片,Karnovsky-Roots法孵育,荧光显微镜和普通光学显微镜观察同一切片。结果发现,下列核(区)内可见到胞体既受DAPI或Pr逆行标记,同时又呈AChE阳性反应的细胞(简称荧酶双阳性细胞):中脑被盖腹侧区、黑质、中脑尾侧中缝核、脚桥被盖核;脑桥中缝背核、中央上核、被盖网状核、蓝斑;延髓孤束核区、中缝苍白核、延髓网状结构包括旁正中网状核、中央网状核腹侧亚核和外侧网状核。

树鼩脑干儿茶酚胺神经元的分布

应用FAGLU荧光组化技术观察了树鼩脑干儿茶酚胺神经元(简称CA神经元)的位置分布及其形态特征。结果表明,CA神经元主要分布于下列核区:延髓的腹外侧网状核(LRN),孤束核(Sol);脑桥的面神经核(nVll).脑桥尾侧网状校(PnC),第四脑室顶外侧壁,蓝斑(Lc),脑桥头端与中脑尾端移行部的中缝背核(DR)、中央上核(cs),腹外侧臂旁核(VLPB)、中央灰质腹侧(Vcg);中脑的黑质(SN)、和腹侧被盖区(VTA)。

酒精对锥体外系MDA、SOD的影响

目的 :探讨酒精对锥体外系影响的不良机制。方法 :4 8只 8周龄雌性幼鼠随机分成对照组、低、中和高浓度组 ,分别用不同浓度的酒精 (0 %、12 .5 %、2 5 %和 5 0 % )灌喂 ,按 10 m l/kg,隔天 1次 ,90 d后 ,分别对各浓度组小鼠进行灌酒前、后转棒试验。转棒试验结束后快速取出小脑和尾壳核 ,并测量其丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :90 d后 ,高浓度组小鼠在继续灌酒前、后在棒上停留时间均减少 ,中浓度组小鼠灌酒后在棒上停留时间减少 ;高、中浓度组小脑和尾壳核的SOD活性降低 ,高浓度组小鼠小脑和尾壳核的 MDA含量升高 ,中浓度组小鼠小脑 MDA含量也升高。结论 :酒精致锥体外系功能障碍与小脑、尾壳核的 SOD活性降低和 MDA含量升高有关。

树鼩中脑腹侧被盖区向尾状核的DOPA能和AChE阳性纤维投射研究

应用荧光逆行标记分别与荧光组化(FAGLU)和AChE-药理组化相结合技术,研究了树鼩中脑腹侧被盖区向尾状核头部的DOPA能和ACHE-阳性纤维投射。结果表明:树鼩中脑腹侧被盖区除分别向同侧和对侧尾状核头部发出DOPA能纤维投射外,还向同侧尾状核头部发出AChE阳性投村纤维;此外,腹侧被盖区存在着向双侧尾核头部发出分叉投射纤维的DOPA能细胞。

大鼠端脑内核团向黑质的传入纤维联系

目的研究大鼠端脑内核团向黑质的传入纤维联系。方法应用荧光金(Fluorogold,FG)逆行标记法技术将FG泳入一侧黑质,观察双侧端脑内的FG标记细胞分布。结果在泳入区同侧的额叶、颞叶、顶叶、岛叶、伏核、终纹床核、杏仁中央核、隔核、尾壳核、苍白球、腹侧苍白球、脚内核见到FG逆行标记细胞。结论大鼠端脑内存在丰富核团向黑质投射。

大鼠中脑至上丘的传入投射

目的 :研究大鼠中脑核团到上丘的传入纤维投射。方法 :应用荧光金 (FG)逆行追踪技术研究大鼠上丘传入纤维的中脑起源。结果 :对侧上丘 (SC) ,同侧下丘 (IC) ,外侧丘系背侧核 (dll) ,中央灰质 (CG)和双侧黑质 (SN) ,中脑深核(dp M) ,视束核 (ot) ,二叠体旁核 (pbg)观察到 FG逆行标记细胞。结论 :上丘存在复杂的纤维联系 。