益生菌-海带复合发酵液对肥胖大鼠肠道菌群的影响及抗肥胖效果

目的:探讨膳食益生菌-海带复合发酵液对肠道菌群的调控机制。方法:建立高脂饲料诱导的肥胖大鼠模型,分为肥胖对照组(高脂饲料+普通饮水)、益生菌发酵组(高脂饲料+饲水中添加体积分数10%的益生菌发酵液)、益-海复合发酵组(高脂饲料+饲水中添加体积分数10%的益生菌与海带发酵液),并设正常对照组(普通饲料+普通饮水),每组10只。膳食干预8周后计算实验前后大鼠体重增加量、大鼠处死前1天饮水量以及日均食物摄取量;处死大鼠,取结肠内容物,选择焦磷酸测序法鉴定肠道菌群菌属,利用气相质谱分析肠道丁酸和丙酸含量。比较各组大鼠肠道菌群菌属和短链脂肪酸生成的差异。结果:与其他3组比较,益-海复合发酵组肥胖大鼠的体重增加量、处死前1天饮水量均下降(P<0.05)。与肥胖对照组比较,益-海复合发酵组肠道厚壁菌门相对丰度降低,拟杆菌门相对丰度升高(P<0.05)。与肥胖对照组比较,益-海复合发酵组与益生菌发酵组肠道的厚壁菌/拟杆菌比值降低(P<0.05),与益生菌发酵组比较,益-海复合发酵组厚壁菌/拟杆菌比值降低(P<0.05)。与肥胖对照组比较,益-海复合发酵组大鼠肠道肥胖相关菌群相对丰度降低;抗肥胖相关菌群相对丰度升高(P<0.05)。与其他3组比较,益-海复合发酵组肠道丁酸和丙酸含量增加(P<0.05)。结论:益生菌-海带复合发酵液可降低厚壁菌/拟杆菌比值、调节肠道菌群结构、增加短链脂肪酸生成,改善肠道健康,具有良好的抗肥胖效果。

鞣花酸对DSS诱导的溃疡性肠炎小鼠的改善及对COX2/p38/JNK/ERK/IκB-α/NF-κB和iNOS/3-NT/CYP2E1信号通路的作用

目的探讨鞣花酸对溃疡性结肠炎的改善效果及对COX2/p38/JNK/ERK/IκB-α/NF-κB和iNOS/3-NT/CYP2E1信号通路的影响。方法将30只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、鞣花酸组,采用5%硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导溃疡性肠炎模型,给药7 d后,观察小鼠结肠和肝组织形态学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测小鼠血液、结肠组织炎症和氧化因子表达水平变化。结果与模型组比较,鞣花酸组小鼠的结肠长度、结肠重量、肝脏重量呈现改善(P<0.05)。与模型组比较,鞣花酸组小鼠的结肠上皮细胞完整,隐窝、环状细胞损伤、水肿程度较轻;肝组织未发现损伤,其表现与正常组一致。此外,与模型组比较,鞣花酸组的TNF-α、IL-1β、NO、COX2、p-p38、p-JNK、p-ERK、p-IκB-α、p-NF-κB、iNOS、3-NT、CYP2E1蛋白表达量降低(P<0.05)。结论鞣花酸可能通过抑制COX2/p38/JNK/ERK/IκB-α/NF-κB及iNOS/3-NT/CYP2E1信号通路,降低血液TNF-α、IL-1β、NO表达,对溃疡结肠炎的结肠和肝组织发挥改善功效。

益生菌植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌对医院常见致病病原菌的抑菌作用

目的探讨益生菌植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌分别对白色念珠菌、肠炎沙门菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌6种医院常见致病病原菌的抑菌作用。方法分别活化3种益生菌和6种病原菌,用无菌生理盐水稀释为1.5×10^(10) CFU·L^(-1)菌株样品,采用琼脂抑菌试验检测3种益生菌对6种病原菌的抑菌效果。结果植物乳杆菌对白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌率比较差异无统计学意义(F=2.716,P>0.05);植物乳杆菌对肠炎沙门菌的抑菌率均显著低于白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌(P<0.05)。鼠李糖乳杆菌对白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌率比较差异无统计学意义(F=2.400,P>0.05);鼠李糖乳杆菌对肠炎沙门菌的抑菌率均显著低于白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌(P<0.05)。罗伊乳杆菌对白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌率比较差异无统计学意义(F=0.900,P>0.05);罗伊乳杆菌对肠炎沙门菌的抑菌率均显著低于白色念珠菌、大肠埃希菌、福氏志贺菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌(P<0.05)。3种益生菌对白色念珠菌、福氏志贺菌、铜绿假单胞菌的抑菌率比较差异无统计学意义(F=1.000、0.000、0.000,P>0.05)。3种益生菌对肠炎沙门菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑菌率比较差异有统计学意义(F=3426.000、111.000、433.000,P<0.05);罗伊乳杆菌对肠炎沙门菌的抑菌率显著高于植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌(P<0.05);鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌对大肠埃希菌的抑菌率显著高于植物乳杆菌(P<0.05);罗伊乳杆菌对金黄色葡糖球菌的抑菌率显著高于植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌,鼠李糖乳杆菌对金黄色葡萄球菌的抑菌率显著高于植物乳杆菌(P<0.05)。结论益生菌植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊乳杆菌对白色念珠菌、福氏志贺菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果明显,对肠炎沙门菌抑菌效果欠佳。

干酪乳杆菌-山药复合发酵剂对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群的调节及其抗炎作用

目的探讨干酪乳杆菌-山药复合发酵剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道菌群的调节及其抗炎作用。方法将干酪乳杆菌(SJP6841L2)与山药粉末混合发酵,制成干酪乳杆菌-山药复合发酵剂。将60只小鼠随机分为空白对照组、UC模型组、山药对照组、低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组、高剂量复合发酵剂组,每组10只。UC模型组、山药对照组、低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组、高剂量复合发酵剂组小鼠给予2,4,6-三硝基苯磺酸诱导,制备UC模型;正常对照组小鼠经肛门注射体积分数50%乙醇。造模成功后,正常对照组、UC模型组小鼠每天经口灌胃生理盐水(10 mL·kg^(-1)),山药对照组小鼠每天经口给予200 mg·kg^(-1)无发酵山药制剂灌胃,低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组、高剂量复合发酵剂组每天经口分别给予50、100、200 mg·kg^(-1)干酪乳杆菌-山药复合发酵剂灌胃,持续10 d。干预10 d后,观察各组小鼠黏液脓血便、腹泻等一般症状;处死各组小鼠,取结肠,检测结肠的长度、厚度、重量,观察各组小鼠结肠组织水肿情况;应用苏木精-伊红染色观察各组小鼠结肠组织病理学变化,紫外分光光度法检测各组小鼠结肠组织中髓过氧化酶(MPO)活性,酶联免疫吸附法检测各组小鼠结肠组织中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血红素氧合酶-1(HO-1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达水平,Western blot法检测各组小鼠结肠组织中肠道上调密封蛋白1(claudin 1)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)表达,细菌生理生化鉴定法检测结肠肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、肠杆菌数量,气相色谱法检测各组小鼠结肠肠道中乙酸、丙酸、丁酸水平。结果与单一山药干预比较,干酪乳杆菌-山药复合发酵剂能显著改善UC小鼠结肠组织的长度、厚度、重量(P<0.05),及黏液脓血便、腹泻等肠炎症状,减少UC小鼠结肠隐窝、杯状细胞丢失,抑制炎症细胞浸润,恢复结肠受损的黏膜及组织结构。UC模型组、山药对照组、低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组小鼠结肠组织中IL-8、TNF-α、NF-κB、HO-1水平及MPO活性显著高于空白对照组和高剂量复合发酵剂组,claudin 1、ZO-1水平显著低于空白对照组和高剂量复合发酵剂组(P<0.05);空白对照组与高剂量复合发酵剂组小鼠结肠组织中IL-8、TNF-α、NF-κB、HO-1、claudin 1、ZO-1水平及MPO活性比较差异无统计学意义(P>0.05);山药对照组和中剂量复合发酵剂组小鼠结肠组织中TNF-α、NF-κB、HO-1水平及MPO活性显著低于UC模型组和低剂量复合发酵剂组,claudin 1、ZO-1水平显著高于UC模型组和低剂量复合发酵剂组(P<0.05);山药对照组与中剂量复合发酵剂组及UC模型组与低剂量复合发酵剂组小鼠结肠组织中IL-8、TNF-α、NF-κB、HO-1、claudin 1、ZO-1水平及MPO活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。UC模型组、山药对照组、低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌数及双歧杆菌/肠杆菌(B/E)值显著低于空白对照组和高剂量复合发酵剂组,拟杆菌、肠杆菌数显著高于空白对照组和高剂量复合发酵剂组(P<0.05);空白对照组与高剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、肠杆菌数及B/E值比较差异无统计学意义(P>0.05);山药对照组和中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乳酸杆菌数及B/E显著高于UC模型组和低剂量复合发酵剂组,拟杆菌、肠杆菌数显著低于空白对照组和高剂量复合发酵剂组(P<0.05);山药对照组与中剂量复合发酵剂组及UC模型组与低剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌、肠杆菌数及B/E值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。UC模型组、山药对照组、低剂量复合发酵剂组和中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乙酸、丙酸、丁酸水平显著低于空白对照组和高剂量复合发酵剂组(P<0.05);空白对照组与高剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乙酸、丙酸、丁酸水平比较差异无统计学意义(P>0.05);山药对照组、低剂量复合发酵剂组、中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乙酸水平显著高于UC模型组(P<0.05);山药对照组和中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中丙酸水平显著高于UC模型组(P<0.05);中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中丁酸显著高于UC模型组(P<0.05);山药对照组和中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乙酸、丙酸水平显著高于低剂量复合发酵剂组(P<0.05);山药对照组与中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中乙酸、丙酸水平比较差异无统计学意义(P>0.05);中剂量复合发酵剂组小鼠结肠肠道中丁酸显著高于山药对照组和低剂量复合发酵剂组(P<0.05)。结论干酪乳杆菌-山药复合发酵剂能显著抑制UC小鼠结肠组织中IL-8、TNF-α表达及MPO活性,促进结肠组织中紧密连接蛋白的表达及短链脂肪酸的产生,调节肠道菌群平衡;改善UC症状。